董超
- 作品数：8 被引量：2H指数：1
- 供职机构：山东大学公共卫生学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生环境科学与工程更多>>
- DNA损伤剂对携带乳腺癌易感基因1功能位点突变细胞的毒性作用研究
- 2015年
- 目的通过比较携带乳腺癌易感基因1(BRCA1)的RING或BRCT功能区内位点突变的乳腺癌细胞系(HCC1937)对不同来源DNA损伤的应答反应的敏感性,探讨BRCA1的RING和BRCT两功能区在DNA损伤反应中所起的作用。方法选择RING和BRCT功能区内与肿瘤发生相关的突变位点C64G和P1749R进行研究,应用BRCA1缺欠的HCC1937细胞系建立稳定表达C64G位点突变(C64G)、P1749R位点突变(P1749R)、野生型BRCA1(wt BRCA1)以及vector(空载体空白对照)4种细胞系,并用Western blotting法测定各细胞系BRCA1蛋白的表达。分别对4种细胞系进行电离辐射处理(一次性给予2、4、6 Gy的X射线),丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)处理(0.2、1、5μg/ml孵育1 h),紫外线(ultraviolet,UV)处理(一次性给予2、4、6 J/m2)继续培养48 h,并设空白对照。通过3H-Td R掺入实验、MTT实验和细胞克隆形成实验研究细胞3H-Td R掺入率和细胞存活率的变化。结果与空白对照组比较,不同剂量电离辐射、MMC、UV处理后,4种细胞系的3H-Td R掺入率均下降,差异均有统计学意义(P<0.05);且随着暴露剂量的升高,4种细胞系的3HTd R掺入率均呈下降趋势。与wt BRCA1相比,相同剂量电离辐射、MMC、UV处理C64G、P1749R、vector细胞系的3H-Td R掺入率和细胞存活率均较低,差异均有统计学意义(P<0.05),但C64G、P1749R细胞系的3H-Td R掺入率和细胞存活率与vector细胞系的变化趋势基本一致。结论 BRCA1的RING和BRCT功能区的位点突变均可导致细胞对电离辐射、MMC和UV所致DNA损伤的敏感性升高,而且C64位点比P1749对各种损伤应答反应更为敏感。提示这两个功能区可能参与了不同的DNA损伤修复过程并起到关键的调控作用。
- 罗月郭刚董超赵锡鹏张凤梅凤志慧
- 关键词：DNA损伤细胞毒性乳腺癌易感基因1
- 丙戊酸对乳腺癌细胞放射敏感性的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨丙戊酸(VPA)对乳腺癌细胞MCF7放射敏感性的影响。方法 MCF7细胞用VPA临床安全剂量0.5 mmol·L-1和临界剂量1 mmol·L-1分别预处理0,24,48和72 h,8Gy电离辐射后6 h,免疫荧光染色法观察磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)焦点形成。对数生长期的MCF7细胞分别以VPA 0.5和1 mmol·L-1预处理72 h,4 Gy电离辐射后48 h,MTT法检测细胞存活率。MCF7细胞用VPA 0.5 mmol·L-1预处理24 h后,按照每皿接种细胞数分别给予电离辐射2 Gy(每皿500和1000),4 Gy(每皿2000和4000)和6 Gy(每皿8000和16000),计算克隆形成率。MCF7细胞分别用VPA 0.5和1 mmol·L-1预处理0,24,48和72 h,流式细胞仪检测细胞周期。结果与正常对照组相比,单独VPA 0.5 mmol·L-1处理0,24,48和72 h后,γ-H2AX焦点阳性率分别为(5.3±0.6)%,(10.8±1.0)%,(12.6±0.9)%和(17.8±1.1)%(r=0.985,P<0.05);VPA 1 mmol·L-1对γ-H2AX焦点形成有相同的影响趋势。单独照射组细胞核内γ-H2AX焦点阳性率为100%,其中表示DNA损伤较重的焦点较大且明亮的B类细胞所占比例为(16.5±1.8)%;与单独照射组相比,VPA 0.5 mmol·L-1预处理0,24,48和72 h后,B类细胞所占比例分别为(16.5±1.8)%,(28.9±1.0)%,(58.0±2.0)%和(70.8±0.9)%(r=0.986,P<0.05);VPA 1 mmol·L-1对辐射诱导的γ-H2AX焦点形成的影响有相同趋势。MTT和细胞克隆形成实验结果显示,与正常对照组相比,单独给予VPA0.5 mmol·L-1可显著降低细胞克隆形成率(P<0.05);与单独照射组相比,VPA预处理后接受电离辐射能显著降低细胞存活率(P<0.05)和细胞克隆形成率(P<0.05);VPA 0.5和1 mmol·L-1对细胞周期影响均无统计学差异。结论临床安全剂量和临界剂量VPA对肿瘤细胞具有放射增敏作用,且对肿瘤细胞生长具有抑制作用,其机制与增加电离辐射所致的DNA双链断裂损伤的蓄积有关。
- 赵锡鹏罗月董超张凤梅凤志慧
- 关键词：丙戊酸乳腺癌DNA损伤放射增敏细胞周期
- 丙戊酸通过抑制DNA复制损伤应答机制杀伤PAHs诱导的乳腺肿瘤作用研究
- 目的多环芳烃(PAHs)是一类常见的环境污染物,其中部分化合物具有较强的致癌作用,PAHs所致乳腺癌是威胁女性健康主要的公共卫生问题,如何有效地防治乳腺癌是该研究领域的重要课题。本课题组前期研究证明丙戊酸(VPA)增敏羟...
- 苏本玉张凤梅董超凤志慧
- 关键词：丙戊酸CHK1
- DNA损伤剂对携带BRCA1功能位点突变细胞的毒性作用研究
- ：本文通过比较携带BRCA1的RING或BRCT功能区内位点突变的HCC 1937乳腺癌细胞系对不同形式DNA损伤的应答反应,探讨在DNA损伤反应中BRCA1的RING和BRCT两功能区的作用. 方法：选择RING...
- 罗月董超赵锡鹏张凤梅凤志慧郭刚
- 关键词：乳腺癌细胞毒性作用
- 乳腺癌细胞系HCC1937和MCF7在DNA损伤修复反应时功能的比较被引量：1
- 2014年
- 目的 通过比较DNA损伤修复基因乳腺癌易感基因1（breast cancer susceptibility gene1，BRCA1）和抑癌基因p53在HCC1937和MCF7两种乳腺癌细胞系中的功能状态及对DNA损伤修复反应的应答特性，研究两种细胞系在功能上的差异。方法 应用western—blotting法检测两种乳腺癌细胞系中BRCA1和p53蛋白的表达，并检测了经过10Gy电离辐射下1、4、8h后BRCAl蛋白在MCF7、HCC1937和HCCl937野生型BRCA1（HCCl937wtBRCA1）细胞系中的表达水平。同时用免疫荧光法观察BRCA1蛋白在MCF7和HCC1937细胞系细胞内的分布和焦点形成情况，并对电离辐射下的BRCA1、Rad51蛋白的焦点形成百分比进行计算。进一步用流式细胞仪检测两种细胞系的细胞周期变化。结果MCF7细胞中野生型的BRCA1和p53主要分布于细胞核内，这两种蛋白对DNA损伤反应有应答。10Gy8h照射条件下，MCF7细胞系中BRCAl蛋白焦点形成百分比较无电离辐射高[（59．40±3．66）％比（11．80±3．51）％，t=16．26，P〈0．05]；MCF7细胞系照射组中RadS1蛋白焦点形成百分比较无电离辐射高[（73．90±8．66）％比（16．70±3．76）％，t=10．49，P〈0．05]，照射组p53蛋白[（82．54±1．04）比（23．75±0．51），t=87．90，P〈0．05]和p21蛋白[（90．95±1．13）比（50．19±0．89），t=49．11，P〈0．05]表达水平均较无电离辐射高，细胞在G1期蓄积。与MCF7细胞相比，在HCC1937细胞中的BRCA1和p53都产生了变异，在细胞核内两种蛋白较少。10Gy8h照射条件下HCC1937细胞中无BRCA1蛋白焦点形成、p53和p21几乎无诱导表达以及细胞在G1和G2-M期无明显的蓄积。当恢复野生型BRCA1在HCC1937细胞内表达后，10Gy8h照射条件下Rad51蛋白焦点形成百分比较无电离辐射高[（61．70±4．03）％比（6．22±2．27）％，t=20．78，P〈0．05]，细胞在G2-M期的蓄积增多。结论乳腺癌细胞系HCC1937和MCF7在应答DNA损伤修复反应时具�
- 董超张凤梅赵锡鹏郭公社罗月凤志慧
- 关键词：乳腺肿瘤DNA损伤
- DNA损伤剂对携带BRCA1功能位点突变细胞的毒性作用研究
- 目的本文通过比较携带BRCA1的RING或BRCT功能区内位点突变的HCC1937乳腺癌细胞系对不同形式DNA损伤的应答反应,探讨在DNA损伤反应中BRCA1的RING和BRCT两功能区的作用。方法选择RING和BRCT...
- 罗月董超赵锡鹏张凤梅凤志慧郭刚
- 关键词：DNA损伤毒性作用乳腺癌易感基因1
- 文献传递
- HCC1937和MCF7两种乳腺癌细胞系在DNA损伤修复反应时功能的比较
- 目的通过比较DNA损伤修复基因乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene1,BRCA1)和抑癌基因p53在HCC1937和MCF7两种乳腺癌细胞系中的功能状态及对DNA损伤修复反...
- 董超张凤梅赵锡鹏郭公社罗月凤志慧
- 关键词：DNA损伤
- 文献传递
- HCC1937和MCF7两种乳腺癌细胞系在DNA损伤修复反应时功能的比较
- 目的 通过比较DNA损伤修复基因乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1)和抑癌基因p53在HCC1937和MCF7两种乳腺癌细胞系中的功能状态及对DNA损伤修...
- 董超张凤梅赵锡鹏郭公社罗月凤志慧
- 关键词：DNA损伤
