葛晔华
- 作品数：16 被引量：30H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 中心体蛋白Centrin家族在大鼠精子发生过程中的表达
- 2001年
- 孙晓冬俞作仁李赛马静葛晔华薛社普韩代书
- 关键词：中心体蛋白CENTRIN精子发生
- 小鼠精子发生后期生精细胞的基因表达谱被引量：8
- 2002年
- 在精子发生后期由圆形精子细胞分化为成熟精子的过程称为精子形成（spermiogenesis）.为探索参与精子细胞变态的相关基因,利用cDNA微阵列技术研究了Balb/c 小鼠精母细胞、圆形精子细胞及长形精子细胞的1176个已知基因的表达谱.结果表明在这3种生精细胞中,共检测到208个基因的表达,其中大多数基因从精母细胞到圆形精子和长形精子表现为表达下调,但有7个基因在圆形精子细胞中表达上调,3个基因在长形精子细胞中表达上调.从以上差异表达的基因中选取了7个基因,利用半定量RT-PCR方法对微阵列的结果进行了验证.发现其中的6个基因在不同生精细胞中的差异表达与微阵列结果一致,1个基因未显示出差异表达.这些结果为研究精子形成相关基因的表达、调节以及功能提供了重要的线索.
- 俞作仁关纪奎葛晔华马静郭睿李赛薛社普韩代书
- 关键词：精子形成CDNA微阵列基因表达谱生殖生物学小鼠生精细胞
- 乳腺癌中miR-146a对肿瘤相关巨噬细胞功能的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨miR-146a对肿瘤相关巨噬细胞(TAM)功能的影响及其在TAM中表达水平变化的调控机制。方法分别对比BALB/c小鼠4T1移植瘤TAM和腹腔巨噬细胞(PEC)、人乳腺癌组织TAM和外周血单核细胞,q-PCR法检测miR-146a的表达变化。转染miR-146a antagomir的巨噬细胞与4T1混合接种,确定TAM中miR-146a表达对肿瘤发生发展的影响。结果 miR-146a在荷瘤小鼠(P<0.05)和人乳腺癌(P<0.01)相关巨噬细胞中显著下调。miR-146a inhibitor明显抑制肿瘤的生长。结论 TAM中miR-146a可能通过其对巨噬细胞的调控进而促进肿瘤生长。
- 王佳华马思思葛晔华刘彦信郑德先史娟
- 关键词：MICRORNA肿瘤相关巨噬细胞MIR-146A
- 大鼠中心体蛋白家族基因的克隆及其在睾丸中的表达特征被引量：1
- 2002年
- centrin是进化上高度保守的中心体蛋白家族,已从多种生物中克隆到其同源基因,但基因文库中尚无大鼠centrin序列的报道.采用RT-PCR从大鼠睾丸组织中克隆到centrin-1,-2和-3 cDNA片段,对其衍生的氨基酸序列进行同源性比较,结果显示,人、小鼠、大鼠中相应的centrin蛋白同源性很高.采用半定量RT-PCR技术研究了它们在大鼠精子发生过程中的表达特征.结果表明,centrin-1的表达具有睾丸组织和生精细胞特异性,并呈现出发育阶段相关的规律,它仅在减数分裂开始后转录,其mRNA水平在圆形精子细胞中达到高峰.centrin-2和centrin-3在睾丸精原细胞中有高表达,进入减数分裂后其mRNA水平迅速降低,同时在一些体细胞中也有表达.推测centrin-1可能在减数分裂或精子细胞变态分化过程中发挥作用,而centrin-2,-3可能与有丝分裂有关.
- 孙晓冬葛晔华马静俞作仁李赛薛社普韩代书
- 关键词：睾丸精子发生基因克隆基因表达
- 大鼠cenexin蛋白多克隆抗体的制备及其在精子发生过程中的表达的研究
- 2001年
- 孙晓冬李赛俞作仁马静葛晔华韩代书薛社普
- 关键词：精子发生中心体蛋白多克隆抗体
- 原红细胞在体外EPO诱导分化进程中基因表达谱的研究
- ＜正＞ 红细胞在分化过程中,体积变小,核仁消失,核浓缩,血红蛋白积聚,最后排核。这其中涉及到许多基因表达的变化,但有关红细胞分化的调控机理尚不清楚。为了研究调节红细胞分化的分子机理,我们用Atlas Mouse 1.2 ...
- 李赛葛晔华马静俞作仁关纪奎薛社普韩代书
- 文献传递
- 原红细胞在体外EPO诱导下的增殖分化特征
- 2003年
- 目的 系统了解小鼠红细胞终末分化过程中细胞增殖和分化的动力学。方法 选用FVA细胞模型 ,利用密度梯度离心的方法从感染Friend致贫血病毒 (anemia inducingstrainofFriendvirus ,FVA)的小鼠脾脏中分离出同步的原始阶段红细胞 (FVA细胞 )。通过研究EPO诱导下细胞的生长曲线 ,3H TdR掺入率以及细胞分化过程中 β 珠蛋白 ( β globin)基因的表达和血红蛋白合成的时空关系 ,分析FVA细胞在体外EPO诱导分化过程中增殖及分化的特性。结果 FVA细胞在EPO诱导早期生长旺盛 ,诱导 2 4小时细胞数量达高峰 ,为 0时的 4倍 ;3H TdR掺入在诱导后 12小时达高峰 ;从诱导后12小时开始有β globin基因的转录 ,在 2 4小时达高峰 ,随后减低 ;从 18小时开始出现血红蛋白 ,至 48小时 ,几乎全部细胞都表达大量血红蛋白。结论 本研究结果阐明了FVA细胞在体外EPO诱导下增殖及分化的动力学 。
- 李赛马静葛晔华薛社普韩代书
- 关键词：红细胞细胞增殖终末分化Β-珠蛋白基因细胞分化
- 红细胞分化去核因子在诱导小鼠红白血病细胞分化以及恶性逆转中的作用被引量：2
- 2001年
- 研究小鼠红细胞分化去核分化因子 (MEDDF)在红细胞终末分化中的功能。方法构建在真核细胞中表达的重组质粒 pcDNA- MEDDF，用其转染小鼠红白血病细胞系 (MEL)。通过分析细胞的生长曲线、分裂指数及在半固体培养基中的集落形成率比较细胞的生长特性，采用 RT- PCR检测 c- myc及β-珠蛋白 (β- globin)基因的表达。结果转染 pcDNA- MEDDF与转染空载体 (pcDNA3.1)的细胞相比较，细胞的增殖率减慢、分裂指数降低、在半固体培养基中形成集落的数量减少。转染细胞的联苯胺阳性率达 32.8％。用 RT- PCR检测发现，转染细胞β-珠蛋白的表达量上升了 3.43倍， c- myc表达量下降了 66.3％。结论 MEDDF能使小鼠红白血病细胞分化并抑制其恶性变。
- 赵青葛晔华周建平马静陈克铨薛社普韩代书
- 关键词：小鼠红细胞分化红白血病
- 中心体蛋白Centrin在不育症病人精子中的异常表达被引量：1
- 2002年
- 为研究中心体蛋白Centrin与男性不育的关系,从而深入理解Centrin在精子发生过程中的功能,用抗Centrin多克隆抗体对10例正常人及18例男性不育症病人的成熟精子进行了免疫荧光染色.结果发现,在正常男性成熟精子中有两个明显的点状荧光阳性信号,位于鞭毛的基体部,分别为近端中心粒和远端中心粒;而一些不育病人精子中Centrin蛋白定位异常,染色信号呈弥散分布,未显示正常大小的近端和远端中心粒.这表明中心体蛋白异常可能与某些男性不育相关,这一表型有可能用作某些男性不育及精子异常的新标志.
- 孙晓冬马静葛晔华李赛俞作仁薛社普韩代书
- 关键词：CENTRIN男性不育症精子中心体蛋白
- 中心体蛋白Cenexin在大鼠精子发生过程中的表达特征被引量：3
- 2002年
- 中心体蛋白Cenexin是成熟中心粒的唯一标志分子。为阐明中心粒在大鼠精子发生过程中的成熟以及功能,我们首先通过RT-PCR技术从大鼠睾丸组织中扩增出了Cenexin cDNA片段,原核表达重组蛋白后,用其免疫小鼠制备了高滴度的抗Cenexin的多克隆抗体,然后利用免疫荧光染色、Western Blot和半定量RT-PCR方法,研究了大鼠精子发生过程中Cenexin蛋白和基因的表达特征。结果显示Cenexin mRNA水平在精原细胞和精母细胞中较高,随后表达水平下降,而蛋白质分子在精原细胞到精子细胞中都定位于细胞的一个中心粒上,表示有成熟中心粒的存在,在长形精子细胞中该蛋白位于鞭毛的基体部。附睾的绝大多数成熟精子中Cenexin免疫染色消失。中心体蛋白Cenexin在精子变态期的表达变化可能与精子鞭毛形成的起始有关。
- 孙晓冬俞作仁马静葛晔华李赛薛社普韩代书
- 关键词：中心体蛋白精子发生
