苟冬梅
- 作品数：13 被引量：9H指数：2
- 供职机构：南京工业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划江苏高校优势学科建设工程项目更多>>
- 相关领域：化学工程轻工技术与工程更多>>
- 过量表达烟酸单核苷酸腺苷酰转移酶对大肠杆菌NZN111产丁二酸的影响被引量：6
- 2012年
- 大肠杆菌NZN111是敲除了乳酸脱氢酶的编码基因(ldhA)和丙酮酸-甲酸裂解酶的编码基因(pflB)的发酵生产丁二酸的潜力菌株。厌氧条件下NADH不能及时再生为NAD+,引起胞内辅酶NAD(H)的不平衡,最终导致厌氧条件下菌株不能利用葡萄糖生长代谢。nadD为催化NAD(H)合成途径中烟酸单核苷酸(NaMN)生成烟酸腺嘌呤二核苷酸(NaAD)的烟酸单核苷酸腺苷酰转移酶(Nicotinic acid mononucleotide adenylyltransferase,NAMNAT)的编码基因,通过过量表达nadD基因能够提高NAD(H)总量与维持合适的NADH/NAD+比例。文中构建了重组菌E.coli NZN111/pTrc99a-nadD,在厌氧摇瓶发酵过程中通过添加终浓度为1.0 mmol/L的IPTG诱导表达,重组菌E.coli NZN111/pTrc99a-nadD中NAD+和NADH的浓度分别比宿主菌E.coli NZN111提高了3.21倍和1.67倍,NAD(H)总量提高了2.63倍,NADH/NAD+从0.64降低为0.41,使重组菌株恢复了厌氧条件下生长和代谢葡萄糖的能力。重组菌与对照菌相比,72 h内可以消耗14.0 g/L的葡萄糖产6.23 g/L的丁二酸,丁二酸产量增加了19倍。
- 苟冬梅梁丽亚刘嵘明张常青吴明科马江锋陈可泉朱建国姜岷
- 关键词：丁二酸厌氧发酵
- 一株产丁二酸基因工程菌及其发酵生产丁二酸的方法
- 本发明属于生物工程技术领域，涉及一株产丁二酸基因工程菌及其发酵生产丁二酸的方法。具体是高效利用葡萄糖产丁二酸基因工程菌株<I>Escherichiacoli</I>BA103菌株及其构建方法及其产丁二酸的方法。通过表达外...
- 姜岷苟冬梅梁丽亚刘嵘明张常青马江锋陈可泉韦萍
- 文献传递
- 利用合成培养基纯厌氧生长产丁二酸的大肠杆菌及其应用
- 本发明涉及一株利用合成培养基纯厌氧生长产丁二酸的大肠杆菌，其分类命名为埃希氏菌属大肠埃希氏菌<I>Escherichiacoli</I>BER108，其保藏号登记号为：CCTCCNO：M2012068。本发明还公开了上述...
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- 文献传递
- 利用葡萄糖产丁二酸的基因工程菌株及其发酵产酸方法
- 本发明属于生物工程技术领域，涉及利用葡萄糖产丁二酸的基因工程菌株及其发酵产酸方法。本发明的产丁二酸基因工程菌菌株分类命名为大肠埃希氏菌BA205，其保藏号登记号为CCTCCNO：M2011447。其构建过程主要以缺乏乳酸...
- 姜岷梁丽亚刘嵘明苟冬梅张常青马江锋陈可泉韦萍欧阳平凯
- 文献传递
- 产丁二酸基因工程菌及其构建及应用
- 本发明提供了一株产丁二酸基因工程菌菌株，其分类命名为大肠埃希氏菌BA016（<I>Escherichiacoli</I>BA016），其保藏号登记号为CCTCC NO：M 2012350。本发明还提供了该菌株的构建方法与...
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- 产丁二酸的菌株及其生产丁二酸的方法和应用
- 本发明公开了一种产丁二酸的菌株及其生产丁二酸的方法和应用。其中，所述菌株的分类命名为大肠埃希氏菌（<I>Escherichiacoli</I>）BER208，其保藏编号为：CCTCCNO：M2012351。所述菌株在发酵...
- 姜岷万青张常青梁丽亚陈旭苟冬梅刘嵘明马江锋
- 文献传递
- 烟酸转磷酸核糖激酶和丙酮酸羧化酶共表达对大肠杆菌BA002产丁二酸的影响被引量：1
- 2013年
- 大肠杆菌BA002是敲除了乳酸脱氢酶的编码基因(ldhA)和丙酮酸-甲酸裂解酶的编码基因(pflB)的工程菌。厌氧条件下NADH不能及时再生为NAD+,引起胞内辅酶NAD(H)的不平衡,最终导致厌氧条件下菌株不能利用葡萄糖生长代谢。pncB是烟酸转磷酸核糖激酶(NAPRTase)的编码基因,通过过量表达pncB基因能够提高NAD(H)总量与维持合适的NADH/NAD+,从而恢复了厌氧条件下重组菌E.coli BA014(BA002/pTrc99a-pncB)的生长和产丁二酸的性能。然而,BA014在厌氧发酵过程中有大量丙酮酸积累,为进一步提高菌株的丁二酸生产能力,减少副产物丙酮酸的生成,共表达NAPRTase和来自于乳酸乳球菌NZ9000中丙酮酸羧化酶(PYC)的编码基因pyc,构建了重组菌E.coli BA016(BA002/pTrc99a-pncB-pyc)。3 L发酵罐结果表明,BA016发酵112 h后,共消耗了35.00 g/L的葡萄糖。发酵结束时,菌体OD600为4.64,产生了25.09 g/L丁二酸。通过共表达pncB和pyc基因,使BA016的丙酮酸积累进一步降低,丁二酸产量进一步提高。
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- 关键词：丙酮酸羧化酶丁二酸NADH厌氧发酵
- 进化代谢选育高渗透压耐受型产琥珀酸大肠杆菌被引量：3
- 2012年
- 在以碳酸钠为酸中和剂的大肠杆菌两阶段发酵产琥珀酸的过程中,由于Na+的积累造成发酵体系中渗透压的提高,严重抑制了琥珀酸的产物浓度。为了增强大肠杆菌对渗透压的耐受性,考察了利用进化代谢方法筛选高渗透压耐受型高产琥珀酸大肠杆菌菌株的可行性。进化代谢系统作为一种菌株突变装置,可以使菌体在连续培养条件下以最大的生长速率生长。以NaCl为渗透压调节剂,通过在连续培养装置中逐步提高NaCl浓度使菌体在高渗透压条件下快速生长,最终得到了一株高渗透压耐受型琥珀酸生产菌株Escherichia coli XB4。以碳酸钠为酸中和剂,在7 L发酵罐中利用Escherichia coli XB4进行两阶段发酵,厌氧培养60 h后,琥珀酸产量达到了69.5 g/L,琥珀酸生产速率达到了1.81 g/(L.h),分别比出发菌株提高了18.6%和20%。
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- 关键词：琥珀酸大肠杆菌渗透压
- 胞内外调控辅酶NAD(H)对产丁二酸大肠杆菌影响的研究
- 丁二酸，是TCA循环中重要的中间代谢产物，被广泛应用于医药、工业、食品等行业。大肠杆菌由于其具有基因组信息清楚、培养条件简单、代谢网络较明确、易改造、易操作、生长迅速等特点，成为近年来生物法合成丁二酸的研究热点。课题组在...
- 苟冬梅
- 关键词：厌氧发酵生化反应
- 利用合成培养基纯厌氧生长产丁二酸的大肠杆菌及其应用
- 本发明涉及一株利用合成培养基纯厌氧生长产丁二酸的大肠杆菌，其分类命名为埃希氏菌属大肠埃希氏菌<I>Escherichiacoli</I>BER108，其保藏号登记号为：CCTCC NO.M2012068。本发明还公开了上...
- 姜岷张常青苟冬梅梅佳军刘嵘明马江锋吴明科曹伟佳
