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苗季: 作品数：24 被引量：90H指数：5; 供职机构：厦门大学更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划福建省科技重大专项福建省农科院青年科技人才创新基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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利用穿梭质粒快速构建含乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因的重组杆状病毒被引量：3: 1998年; 目的应用新型杆状病毒表达系统快速构建含有ＨＢｓＡｇ基因的重组杆状病毒，高效表达ＨＢｓＡｇ，为ＨＢＶ诊断试剂、疫苗及治疗研究提供依据。方法构建含有ＨＢｓＡｇ基因的供体质粒ｐＦＢ－ＢＳ，转化Ｂａｃ－ｔｏ－Ｂａｃ杆状病毒表达试剂盒中的ＤＨ１０Ｂａｃ致敏菌，利用其含有的细菌Ｔｎ７转座系统将ＨＢｓＡｇ基因重组至穿梭质粒Ｂａｃｍｉｄ上，快速筛选出含有ＨＢｓＡｇ基因的重组杆状病毒。结果此重组病毒能在昆虫细胞中表达出有生物学活性的ＨＢｓＡｇ，表达产物主要集中在细胞内，ＥＬＩＳＡ滴度为１：２×１０４，产量可以达到２μｇ／１０６细胞。; 苗季丛旭谭文杰丛郁陈刚詹美云; 关键词：杆状病毒乙型肝炎病毒表面抗原

中国不同地区和人群HDV　cDNA的筛选、克隆及抗原编码区基因异质性的分析被引量：1: 1996年; 为研究我国不同地区不同人群中ＨＤＶ毒株的感染分子特征，从我国河南、内蒙、北京、四川、广西、西藏、新疆、辽宁、上海等地的ＨＤＶ健康携带者、慢性丁肝病人与重症肝炎病人中筛选获得１０余份ＨＤＶ－ＲＮＡ阳性血清。经逆转录一多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）交叉扩增获得ＨＤＶ抗原编码区的ｃＤＮＡ片段并克隆到ＰＧＥＭ－３Ｚｆ（－）或ＰＧＥＭ－Ｔ载体上，经序列分析研究其基因结构特点，结果表明：中国的ＨＤＶ毒株基因型均为Ⅰ型，但至少存在ⅠＡ、ⅠＢ两个亚型，ＨＤＶ毒株在不同地区间存在异质性，其中河南－１、－２、－３株及新疆株与台湾株同源性较高（核苷酸与氨基酸同源性分别大于９２．１％与８６．９％）．当为ⅠＡ型；内蒙－１、四川、广西、西藏－１、辽宁、北京株与美国－１株同源性较高（核苷酸与氨酸同源性分别大于９４．３％与８８．８％），当为ⅠＢ亚型；上海株与意大利株的核昔酸同源性最高，为９８．１％。研究证明我国新疆、内蒙、西藏等地区抗ＨＤ阳性率比其他省市高并不是由于存在其他基因型所致。; 谭文杰詹美云易炎杰毕胜利苗季; 关键词：丁型肝炎病毒 CDNA

戊型肝炎病毒新潜在中和性表位的发现被引量：1: 2010年; 目的探讨戊型肝炎病毒（HEV）衣壳蛋白是否存在除主要免疫优势中和表位aa459～606以外的其他中和表位。方法通过对几株单克隆抗体及其表位的性质进行分析，对比位于主要免疫优势表位区aa459—606和位于该表位N端序列aa394～458区域的数个表位的中和活性。结果发现位于aa423～437的表位对应的单抗具有潜在中和活性，不同于已知的HEV中和性表位（aa459～606），该表位是一个线性非免疫优势表位。结论HEV ORF2 aa423～437为新的潜在的线性非免疫优势中和表位，该发现丰富了对HEV衣壳结构的认识，为HEV预防与治疗提供了新的针对靶点。; 郑子峥唐明苗季赵敏黄慧李婧娴俞海李少伟张军夏宁邵; 关键词：戊型肝炎病毒衣壳

戊型肝炎病毒ORF1多聚蛋白的不同功能域在细胞内的定位被引量：1: 2011年; 为了探讨戊型肝炎病毒多聚蛋白ORF1的多个功能域在宿主细胞中的表达和定位情况,我们首先将psk-HEV重组载体上的ORF1各功能域的编码序列克隆到绿色荧光蛋白载体pcDNA3.1-GFP上,构建成融合表达的重组质粒,并测序和酶切鉴定其构建成功。再通过Western-Blot验证各融合蛋白在细胞中正确表达,并用激光扫描共聚焦显微镜观察融合蛋白在细胞内的分布和定位。在Huh7细胞中,RdRp蛋白主要分布于细胞核内,HEL蛋白以囊泡状分布于细胞核周,MET蛋白以颗粒状存在于细胞核和细胞质中,PLP蛋白呈极性分布于细胞核周,X蛋白在细胞核和细胞质中均存在。各融合蛋白在细胞中的不同定位印证了对这些蛋白质的功能预测和体外研究结果,这为进一步研究HEV不同蛋白功能提供了支持。; 黄慧郑子峥赵敏李婧娴赖旺生苗季张军夏宁邵; 关键词：HEV

用逆转录-套式聚合酶链反应检测我国不同临床型肝炎/肝病患者中庚型肝炎病毒感染被引量：4: 1998年; 目的为了研究庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在我国的感染状况。方法根据已发表的ＨＧＶ的５’端非编码区（５’－ＵＴＲ区）及螺旋酶区（ＮＳ３区）两段高度保守的基因序列分别设计两套引物，用逆转录－套式聚合酶链式反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）检测ＨＧＶＲＮＡ。结果从北京、秦皇岛、河南等地采集各种肝病患者及职业献血员血清３５４份，ＨＧＶＲＮＡ阳性７９份，阳性率为２２．３％。其中已确定的临床型肝炎／肝病患者２５４例，ＨＧＶＲＮＡ阳性者为５０例，阳性率为１９．６％。原因不明的或非甲～戊型肝炎患者４３例，ＨＧＶＲＮＡ阳性者为１３例，阳性率为３０．２％。丙型肝炎阳性的职业献血员５７例，ＨＧＶＲＮＡ阳性者为１６例，阳性率为３０．２％。结论提示ＨＧＶ感染在我国多种人群中普遍存在，它不仅可能是引起非甲～戊型肝炎的重要病原之一。; 丛郁谭文杰陈刚苗季张文英田瑞光詹美云; 关键词：庚型肝炎病毒 RNA 聚合酶链反应

一种同时检测丙型与庚型肝炎病毒的逆转录-巢式聚合酶链反应方法被引量：2: 1998年; 目的庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）同属黄病毒科，且传播途径相似，重叠感染率高，本研究旨在建立一种同时检测ＨＧＶ与ＨＣＶ感染的方法。方法根据ＨＣＶ与ＨＧＶ的基因序列分别选取５’－ＵＴＲ（ＨＣＶ）与ＮＳ３（ＨＧＶ）的两套引物，在同一管内进行逆转录－巢式聚合酶链反应，并初步应用于１５３例标本。结果该方法能同时检出ＨＧＶ与ＨＣＶ感染，扩增片段大小与设计相符。结论该方法简便特异。; 谭文杰夏宁邵丛郁陈刚陈刚苗季伊瑶; 关键词：丙型肝炎病毒庚型肝炎病毒聚合酶链反应

热休克蛋白90与戊型肝炎病毒重组衣壳蛋白P239相互作用的初步研究被引量：1: 2008年; 目的对前期研究中所筛选出的能够与戊型肝炎病毒（hepatitis E virus，HEV）重组衣壳蛋白颗粒P239存在特异性的相互作用的蛋白进行分析验证。方法使用pull-down、MALDI-TOF-MS、免疫共沉淀技术及免疫荧光技术对与P239有潜在相互作用的蛋白进行鉴定和进一步分析。结果MALDI-TOF-MS及免疫共沉淀技术，均表明该蛋白为热休克蛋白90（HSP90）并与P239相互作用。随后，对P239进入细胞的过程中胞内HSP90蛋白量及其分布的变化做了初步研究。发现虽然HSP90在蛋白总量上并没有发生明显的变化，但其定位却伴随着P239在胞内的迁移发生了由细胞膜向细胞核核周的转移。结论HSP90可能参与了P239入胞后的转运并介导了HEV入胞后向效应细胞器的转运，为研究HEV的感染机制及对HEV的预防和控制提供了有益的线索。; 郑子峥苗季吴小成何水珍唐明孙媛媛王颖彬杜海莲张军夏宁邵; 关键词：戊型肝炎病毒热休克蛋白90 蛋白相互作用

丙型肝炎病毒核壳蛋白在转基因小鼠中的表达及与Fas抗原关系的初步研究被引量：4: 1997年; 将中国人丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）分离株的５’－非编码区和结构基因（５ＵＴＲ＋Ｃ＋Ｅ１＋Ｅ２）区基因插入到ｐｃＤＮＡ３载体中构成表达质粒，通过显微注射法将此质粒注射入Ｆ１代杂交鼠（Ｃ５７ＢＬ／６ＸＩＣＲ）受精卵，并植入假孕母鼠输卵管中，经筛选获得整合有目的基因的转基因小鼠系。免疫组化研究表明，ＨＣＶ核壳蛋白在转基因小鼠各组织中皆有表达，多呈核型染色，心肌细胞中可见浆型。核壳蛋白在各组织中的表达水平；心＞肺＞肾＞肝，同时在转基因小鼠心、肾、肝中检出Ｆａｓ抗原的表达，其表达水平与核壳蛋白的表达呈正相关关系。提示ＨＣＶ核壳蛋白的表达可引起Ｆａｓ抗原的表达。; 谭文杰郎振为丛郁陈刚陈刚詹美云; 关键词：丙型肝炎病毒转基因小鼠丙型肝炎

中国不同临床型来源的丁型肝炎病毒(HDV)部份基因组序列的分析比较被引量：2: 1996年; 从我国河南、内蒙、北京等地的ＨＤＶ健康携带者、慢性丁肝病人与重症肝炎病人中，筛选获得４份ＨＤＶ—ＲＮＡ阳性血清。经逆转录—聚合酶链反应（ＲＴ—ＰＣＲ）交叉扩增获得ＨＤＶ—ｃＤＮＡ片段（６５１—１６６０ｎｔ，按Ｍａｋｉｎｏｅｔａｌ定位），并克隆到ＰＧＥＭ—３ｚｆ（－）或ＰＧＥＭ－Ｔ载体上。经序列分析研究其基因结构特点，结果表明，同属基因Ⅰ型的４株中国丁型肝炎病毒，在基因序列上具有相似的保守区域，但与同亚型ＨＤＶ健康携带者相比，重症肝炎病人与慢性丁肝病人来源的ＨＤＶ毒株，在多个位点上发生了核苷酸的改变，由此推导的抗原编码区相应的氨基酸发生了替换。这些核苷酸与氨基酸的改变位点散在，但多集中于抗原编码区的羧基端。如慢性丁肝发生的６个氨基酸改变中，５个位于１６６—１８８位；重症肝炎发生的１２个氨基酸改变中，８个位于１７０—２１４位。有趣的是，在１７５位上发生了由脯氨酸向丝氨酸的共同替换。提示ＨＤＶ的感染致病可能与ＨＤＶ的基因结构相关。; 谭文杰苗季丛旭詹美云; 关键词：丁型肝炎病毒基因组

重组戊型肝炎病毒衣壳蛋白p239特异性吸附、侵入HepG2细胞并阻断野病毒对肝细胞的感染被引量：4: 2007年; By using Western blot and immunofluorescence assays,the recombinant HEV capsid protein p239 was found specifically attached to the HepG2 cell surface and entered to the cytoplasm with the increase of incubation temperature.Pre-mixture of wild-type HEV with p239 blocked the infectivity of the virus on primary cultured human hepatocytes and HepG2 cells,indicating that p239 and HEV competed the same targeting site on these cells.These data provide evidence that p239 has a similar cell surface structure with wild-type HEV.; 苗季郑子峥何水珍刘平果吴小成孙媛媛唐明张军夏宁邵

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