翁晓琴
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：江苏大学基础医学与医学技术学院更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- OxyR蛋白对不同应激条件下伤寒沙门菌生存能力的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:研究OxyR蛋白对伤寒沙门菌(Salmonella enterica serovar Typhi,S.Typhi)在应激条件下生存能力的影响。方法:用λ-Red系统制备S.Typhi oxyR基因缺陷变异株;通过重组质粒pBAD/gⅢ将oxyR基因和pBAD/gⅢ空质粒分别导入oxyR基因缺陷变异株;构建oxyR缺陷回补株和oxyR缺陷回补空质粒株;制作生长曲线,观察野生株、oxyR缺陷株、oxyR缺陷回补株及oxyR缺陷回补空质粒株在不同应激条件下的生长状况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析OxyR对S.Typhi氧化调节相关基因表达的影响。结果:成功制备S.Typhi oxyR基因缺陷变异株、oxyR基因缺陷回补株和空质粒对照株;生长能力分析结果表明,与野生株相比,oxyR缺陷株在氧应激时生长缓慢(P<0.05),oxyR缺陷回补株的生长能力得到恢复;qRT-PCR结果显示,在氧应激时OxyR蛋白可以抑制hemH基因的表达,活化uxuA基因的表达。结论:OxyR蛋白参与S.Typhi对氧应激的调节,为进一步研究S.Typhi的致病性奠定了基础。
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- 关键词：伤寒沙门菌OXYR氧应激
- OsmY缺失对伤寒沙门菌在高渗应激早期基因表达的影响被引量：3
- 2012年
- 目的:研究伤寒沙门菌OsmY在高渗应激早期对其他基因表达的调节。方法:通过同源重组的方法利用自杀质粒制备伤寒沙门菌osmY基因缺陷变异株;采用伤寒沙门菌全基因组芯片比较野生株和osmY基因缺陷变异株在高渗应激早期的基因表达差异,并对其中部分表达差异基因进行实时定量PCR验证。结果:成功制备伤寒沙门菌osmY基因缺陷变异株;基因芯片结果显示,在高渗应激早期,与野生株相比,伤寒沙门菌osmY基因缺陷变异株有128个基因表达下调,有27个基因表达上调。实时定量PCR与芯片结果一致。结论:OsmY可作为一调节因子在伤寒沙门菌高渗应激早期对基因表达起重要调节作用。
- 孟彦辰王菲杜鸿翁晓琴张海方生秀梅徐顺高黄新祥
- 关键词：伤寒沙门菌基因芯片
- 伤寒沙门菌高渗诱导基因osmY的克隆表达与多克隆抗体的制备
- 2013年
- 目的:克隆表达伤寒沙门菌高渗诱导基因osmY并制备多克隆抗体。方法:通过PCR技术从伤寒沙门菌基因组DNA中获得伤寒沙门菌高渗诱导基因osmY,再将此基因片段克隆到表达载体pET22b(+)上,并转入大肠埃希菌JM109进行表达;Ni柱纯化后的OsmY蛋白作为抗原免疫家兔,并获得多克隆抗体。结果:成功制备伤寒沙门菌高渗诱导基因osmY的蛋白表达菌株,并获得了纯化的OsmY蛋白,成功制备兔抗OsmY的多克隆抗体。结论:成功克隆表达了伤寒沙门菌高渗诱导基因osmY,并获得了多克隆抗体,有助于今后研究OsmY在伤寒沙门菌高渗应激中的作用。
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- 关键词：伤寒沙门菌多克隆抗体
