罗岚
- 作品数：8 被引量：15H指数：3
- 供职机构：重庆理工大学药学与生物工程学院更多>>
- 发文基金：“重大新药创制”科技重大专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组凋亡融合蛋白TRAIL-Fc在CHO中的表达、纯化及生物学活性研究
- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)是由Wiley于1995年首次克隆并鉴定的一个能够诱导肿瘤细胞凋亡...
- 罗岚
- 关键词：CHO细胞无血清培养
- 文献传递
- 聚乙二醇化重组集成α干扰素在食蟹猴长期毒性中结合抗体和中和抗体的活性
- 2010年
- 研究了食蟹猴皮下注射聚乙二醇化重组集成α干扰素(代号PEG-SA)低、中、高剂量(10,30,90μg/kg及对照组)1次/7 d,共180 d后血清中第15,29,43,57,71,92,113,134,162,180 d及停药后30 d的结合抗体及中和抗体滴度。结合抗体测定采用的是间接ELISA法,中和抗体测定采用的是细胞病变抑制法。结合抗体滴度以OD值大于阴性对照组OD值2.1倍为阳性。中和抗体活性的产生以保护50%细胞免受病毒侵犯为判断依据,即50%细胞病变表明产生中和抗体。结果表明,两者活性均在57 d到达高峰,停药后结合抗体和中和抗体活性减弱或消失,中高剂量组抗体活性高于同时段低剂量组活性。PEG-SA皮下注射后,可诱导食蟹猴产生结合抗体及中和抗体,二者活性具有剂量相关性。
- 范开杨华君罗岚
- 关键词：ELISA食蟹猴中和抗体
- 重组人β干扰素-1b的融合表达及制备被引量：1
- 2010年
- 通过融合表达获得无需复性的重组人β干扰素-1b(17Ser-β-IFN)。运用PCR方法扩增带有EK(肠激酶)蛋白酶酶切位点的人β干扰素-1b基因,构建重组表达载体pET32-a-EK-β-IFN-1b,通过工程菌(pET32-a-EK-β-IFN-1b/Qrigami DE3)表达融合蛋白TRX-β-IFN-1b。经纯化的融合蛋白,在一定的酶切条件下用EK酶酶切后,通过反相C18柱纯化获得高纯度的重组人β-IFN-1b,再经细胞病变抑制法测定其抗病毒比活性。结果表明,TRX-β-IFN-1b融合蛋白表达量达到菌体总蛋白的30%以上,EK酶酶切效率不低于90%。制备的重组人β-IFN-1b的质谱分子量与理论值一致,抗病毒活性比国内外报道的相同蛋白高出2倍以上,达到4.5×107IU/mg。通过融合表达制备的重组人β-IFN-1b具有治疗多发性硬化症或肝炎的临床价值。
- 刘日勇罗岚范开
- 关键词：Β干扰素肠激酶抗病毒活性
- 重组人角质细胞生长因子Ⅰ型缺失突变体二硫键配对与生物活性被引量：5
- 2010年
- 研究了大肠杆菌表达的重组Ⅰ型人角质细胞生长因子缺失突变体(△23KGF-Ⅰ)二硫键的配对形式及生物活性。结果表明,重组大肠杆菌可溶性表达的△23KGF-Ⅰ中Cys40,Cys102和Cys106三个游离半胱氨酸间无二硫键形成,经铜离子处理形成Cys102-Cys106配对的二硫键,且经体内外活性研究,发现含二硫键配对的△23KGF-Ⅰ比不含二硫键形式的活性分别高40%和70%左右。
- 张增涛陈清罗岚曹宇范开
- 关键词：二硫键生物活性
- 残留干扰素对聚乙二醇化重组集成干扰素体外活性测定的影响研究
- 目的：测定本品PEG-IFN-SA中残留游离IFN-SA对其体外活性的影响。
方法：通过Gel-HPLC分离纯化PEG-IFN-SA，分别收集相应的Di—PEG—IFN—SA、PEG-IFN-SA和IFN-SA...
- 罗岚杨华君刘日勇范开
- 关键词：聚乙二醇抗病毒活性
- 文献传递
- 促胰岛素分泌肽的聚乙二醇化修饰和体内外生物活性研究被引量：3
- 2011年
- 通过基于Byetta结构的促胰岛素分泌肽类似物的PEG修饰和筛选,以期获得一种长效促胰岛素分泌肽修饰物。利用化学合成的方法获得C末端突变成半胱氨酸的Byetta类似物(Ex4C),再用不同分子质量大小的马来酰亚胺活化的mPEG(MAL-mPEG)对其半胱氨酸的游离巯基进行定点修饰,修饰后产物用阴离子交换色谱和反相色谱进行纯化。通过测定其体外刺激RINm5F细胞释放cAMP的水平,以及体内对STZ模型小鼠的降血糖作用来评价其生物活性。MAL-mPEG化的促胰岛素分泌肽的SDS-PAGE及RP-HPLC纯度均达98%以上,且修饰位点专一;促胰岛素分泌肽经5 k、20 k、35 k分子质量大小的mPEG修饰后体外刺激RINm5F细胞释放cAMP的ED50分别为1.61 ng/mL、15.68 ng/mL、32.95 ng/mL;3种修饰物在相同剂量(40μg/kg)皮下给药对正常小鼠和STZ模型小鼠体内均有明显的降血糖作用,维持降血糖时间分别达24 h、48 h和72 h。
- 陈清范开王琳罗岚张淳
- 关键词：PEG修饰生物活性
- 含人Fc重组凋亡融合蛋白体内外抗肿瘤活性初步研究被引量：2
- 2011年
- 目的初步研究含人抗体Fc片段的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL-Fc)重组融合蛋白的体内外抗肿瘤活性。方法①体外实验:将人急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞、人结肠癌LOVO细胞、人胃癌MKN45细胞、人表皮癌A431细胞、人肝癌HEPG2细胞、人乳腺癌MCF-7细胞和小鼠肝癌H22细胞均随机分为TRAIL-Fc重组融合蛋白组、对照组和空白对照组,分别加入浓度为1000、250、62.5、15.6、3.9、0.97ng/ml的TRAIL-Fc重组融合蛋白和TRAIL对照品以及完全培养液,采用MTT法检测TRAIL-Fc重组融合蛋白对7种肿瘤细胞株的体外生长抑制率。②体内实验:腹腔和腋下接种H22细胞建立小鼠肝癌模型,据治疗药物的不同将小鼠随机分为空白对照组、5-Fu组和TRAIL-Fc重组融合蛋白组。测量记录腹腔接种小鼠的腹围和体重以及腋下接种小鼠的肿瘤体积,15d后取外周血处死各组小鼠,计算抑瘤率并检测血清中AST、ALT含量。结果体外实验结果显示,TRAIL-Fc重组融合蛋白对7种肿瘤细胞株的生长均有不同程度的抑制作用,且抑制作用呈剂量依赖效应;其中对MCF-7细胞的抑制作用最强,其最大生长抑制率为82.5%,其次依次为LOVO(81.9%)、MKN45(52.3%)、H22(51.2%)、Jurkat(50.9%)、HEPG2(35.4%)和A431细胞(20.3%)。与对照品相比,TRAIL-Fc重组融合蛋白对LOVO(IC50为83.5)、MKN45(IC50为243.2)、MCF-7(IC50为84.6)细胞更敏感。体内实验结果显示,空白对照组小鼠腹部明显膨出,后期体重略有下降,肿瘤体积持续显著增加;TRAIL-Fc重组融合蛋白组小鼠腹部轻微膨胀,体重维持较好,肿瘤体积后期略有增加;5-Fu组小鼠腹部无膨胀,体重急剧下降,肿瘤体积明显缩小。TRAIL-Fc重组融合蛋白的抑瘤率为45.79%,AST和ALT检测结果显示其对小鼠肝功能无明显影响。结论 TRAIL-Fc重组融合蛋白具有较强的抑制肿瘤细胞生长的能力,且在体内半衰期明显延长。
- 罗岚刘洪洪李祥范开
- 关键词：TNF相关凋亡诱导配体重组融合蛋白质类
- 肿瘤坏死因子诱导凋亡配体TRAIL研究进展被引量：5
- 2011年
- 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)是肿瘤坏死因子超家族成员之一,能通过与死亡受体结合选择性诱导多种肿瘤细胞系的凋亡,而对正常细胞无明显影响,有望成为一种新的抗肿瘤制剂。介绍了TRAIL及其受体的诱导凋亡机制、开发现状及临床应用方面的研究进展。
- 范开罗岚刘洪洪
- 关键词：受体细胞凋亡肿瘤治疗
