管晓斌
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 供职机构：四川农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 牛干扰素-τ在大肠杆菌中的融合表达和鉴定
- 2014年
- 牛干扰素-τ(bIFN-τ)是胚胎妊娠识别物质,通过体外重组表达bIFN-τ蛋白用于妊娠识别机理研究和胚胎工程应用具有重要意义。本研究的目的是利用大肠杆菌作进行bIFN-τ蛋白的体外重组表达和鉴定。通过PCR方法扩增得到牛干扰素-τ(bIFN-τ)基因,克隆到pMD18-T载体中。经BamHⅠ和NdeⅠ双酶切回收后连接到原核表达载体pET-28a(+)中,构建了表达质粒(pET-28a-bIFN-τ),然后将其转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG进行诱导表达。结果表明:bIFN-τ基因序列插入方向和读码框在pET-28a-bIFN-τ中正确;表达产物分析表明其在大肠杆菌BL21(DE3)中实现了融合表达,表达量占菌体总蛋白的20.68%。优化后的表达条件可使其表达量达到28.84%。重组蛋白主要以包涵体形式存在,经纯化和鉴定,表明表达产物为bIFN-τ蛋白。
- 张谊管晓斌张明
- 关键词：大肠杆菌
- 中国黑白花奶牛干扰素-τ成熟蛋白基因的克隆与序列分析及牛干扰素-τ的分类被引量：1
- 2007年
- 通过PCR克隆测序首次测定了黑白花奶牛干扰素-τ成熟蛋白的完整基因序列（GenBank登录号：DQ680846、DQ680847）,其CDS长度为519 bp,编码含有172个氨基酸的牛干扰素-τ成熟蛋白。对所有牛干扰素-τ序列进行聚类分析,可将其聚为4类,发现了一类新的牛干扰素-τ（τ4）和6种新亚型（τ1e、τ3f、τ3g、τ3h、τ4a、τ4b）。DQ680846属于τ4类的一种亚型,标记为τ4a;DQ680847属于τ3类的一种亚型,标记为τ3f。各牛干扰素-τ基因核苷酸序列间的同源性在92.7%-99.8%之间,推导氨基酸序列间的同源性在88.5%-99.4%之间;τ4a、τ3f与其他牛干扰素-τ基因核苷酸序列间的同源性分别在94.0%-97.1%、92.9%-99.6%之间,推导氨基酸序列间的同源性分别在91.4%-96.0%、88.5%-99.4%之间。这一结果反应了牛干扰素-τ基因在进化过程中的高度保守性。二级结构预测发现牛干扰素-τ成熟蛋白是以5个α-螺旋（A-E螺旋）为基础构成的。Asn78、Cys1、Cys29、Cys99、Cys139I、le143、Lys160和C-末端的11个氨基酸为高度保守区,它们是维持牛干扰素-τ的结构和功能所必需的。
- 张明管晓斌朱庆刘学方冯玉梅赖松家
- 关键词：黑白花奶牛分子克隆
- 用牛αS1-酪蛋白基因构建乳腺生物反应器表达载体的研究被引量：3
- 2006年
- 牛αS1-酪蛋白基因是制备乳腺生物反应器常用的表达载体,可以指导外源基因在动物乳腺中高水平表达。对牛αS1-酪蛋白基因的结构、表达载体的各种调控元件及其研究应用进展等方面作一综述。
- 管晓斌李春笑赖松家
- 关键词：乳腺生物反应器转基因
- 牛干扰素-τ基因的克隆及其在大肠杆菌中的融合表达
- 本研究采用克隆测序技术，首次测定了中国荷斯坦奶牛干扰素-τ(bIFN-τ)成熟蛋白基因的编码区(CDS)全序列(GenBank登录号：DQ680846、DQ680847)，并利用生物信息学方法对bIFN-τ的结构和功能进...
- 管晓斌
- 关键词：基因克隆大肠杆菌蛋白纯化
- 文献传递
