程林友
- 作品数：7 被引量：23H指数：4
- 供职机构：青岛农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- Bt菌株QCL-1中cry2Ac10基因的克隆、表达和活性研究被引量：4
- 2007年
- 目的：从高毒力Bt菌株中克隆cry2Ac10基因,并研究其表达和杀虫活性。方法：以Bt菌株QCL-1质粒为模板,利用cry2特异性引物FY2A5和FY2A3进行PCR扩增,将目的片段克隆到表达载体pET-21b（＋）,构建T7启动子控制的大肠杆菌重组表达质粒pET21b-cry2Ac。经IPTG诱导后,SDS-PAGE检测基因表达情况,然后对表达产物进行生物活性测定。结果：从菌株QCL-1中克隆出目的基因,该基因的编码框由1 872个碱基组成,编码的蛋白质由623个氨基酸组成,与已报道的Cry2Ac氨基酸同源性为97.4%-99.7%。该基因（GenBank accession EF405952）已被国际Bt基因命名委员会正式命名为cry2Ac10。该基因在大肠杆菌BL21（DE3）中能够正常表达70kDa的蛋白,表达产物对棉铃虫、粘虫和粉纹夜蛾幼虫具有高毒力,同时对甜菜夜蛾幼虫生长有抑制作用,其中对棉铃虫和粘虫初孵幼虫的LC50分别为30.0μg/g和16.7μg/g。结论：成功克隆和表达了cry2Ac10基因,并明确了cry2Ac10蛋白的活性,为该基因的研究和应用奠定基础。
- 白雪峰李长友程林友郑桂玲周洪旭李国勋
- 关键词：苏云金芽孢杆菌基因克隆蛋白表达
- Bt杀虫蛋白基因cry8Ea2的克隆、表达和活性被引量：8
- 2008年
- 根据已知Btcry8类基因的全长序列设计一对特异性引物JJX5和JJX3,以Bt菌株B-DLL的质粒DNA为模板扩增出3.5 kb大小的片段;将该片段插入大肠杆菌表达载体pET-21b中,并完成了该片段的全序列测定。该基因编码区为3 495 bp,编码的蛋白质由1 164个氨基酸残基组成,相对分子质量为131.8 kDa,等电点为pH 4.71,为弱酸性蛋白。该基因(GenBank:EU047597)编码的氨基酸序列与Cry8Ea1的氨基酸序列同源性高达99.31%,被国际Bt基因命名委员会正式命名为cry8Ea2。经IPTG诱导后该基因在大肠杆菌BL21(DE3)中能够正常表达130 kDa的蛋白,表达产物对暗黑鳃金龟、琉璃弧丽金龟和柳蓝叶甲具有活性,在浓度为8.98μg/g时对暗黑鳃金龟、琉璃弧丽金龟一龄幼虫14 d的校正死亡率分别为46.67%和55.56%;在浓度为89.8μg/mL时对柳蓝叶甲三龄幼虫96 h的校正死亡率为33.33%。
- 刘兴龙程林友李天龙李长友李国勋
- 关键词：BT基因克隆蛋白表达杀虫活性
- 两种对蛴螬具有杀虫活性的Bt杀虫蛋白基因的研究
- 金龟子幼虫(蛴螬)属鞘翅目金龟子总科,是农林牧草的重要地下害虫,为害日趋严重,是国内外公认的难防治的地下害虫。寻找抗金龟子类害虫的杀虫蛋白基因并加以开发利用,生产生物工程杀虫剂和转基因植物,对其防治将具有重要的理论和实践...
- 李长友程林友刘兴龙李国勋
- 文献传递
- 对甜菜夜蛾高毒力Bt新菌株的PCR-RFLP分析及生物活性测定被引量：1
- 2005年
- 利用PCR-RFLP对Bt.新菌株cyz-13,T4-3的基因型进行分析。结果表明,cyz-13含有cry1Aa,cry1Ac,cry1Bc,cry2Ab4种基因型,其中cyz-13菌株的PCR产物的酶切片断类型不同于已知的基因类型;T4-3菌株含有cry1Aa,cry1Ac,cry1Ag,cry2Ac,cry1Ia5种基因型。室内生测结果显示,两菌株对甜菜夜蛾、粘虫、棉铃虫、玉米螟均具有高毒力,好于H D-1标准菌株。两菌株的发酵液均有杀虫活性,二者上清的杀虫因子不同。
- 程林友陆秀君李国勋
- 关键词：CRY基因
- 苏云金杆菌-δ内毒素作用机理及抗性研究进展被引量：5
- 2006年
- 文章在分子水平上介绍了苏云金杆菌作用机理及其在中肠作用靶标—中肠上皮细胞刷状缘膜(BB-MV)受体的研究进展;害虫产生抗性是由多个因素引起的,从受体和蛋白酶活性两个主要方面阐述了害虫对Bt产生抗性的机理;简要的介绍了害虫抗性治理的基本策略。
- 张怀江李长友程林友盖树鹏郑桂玲李国勋
- 关键词：苏云金杆菌抗性
- 高毒力苏云金杆菌菌株的筛选及基因型鉴定
- 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis简称Bt)是目前研究最深入、使用最广泛的杀虫微生物之一,但甜菜夜蛾对目前已发现的绝大多数Bt菌株不敏感或低敏感,已商业化的苏云金杆菌杀虫剂对其效率很低.由于甜菜...
- 程林友
- 关键词：苏云金杆菌PCR-RFLP生物测定
- 文献传递
- 桃园节肢动物群落不同功能团、营养层的垂直分布和时序变化被引量：5
- 2006年
- 本文从功能团和营养层的角度研究了节肢动物群落在垂直分布上的变化。结果表明,生防园与化防园相比,桃园节肢动物群落不同功能团及营养层的垂直分布和不同营养层的时序变化差异不明显,在化防园中可能由于受到农药干扰只有少数功能团在下部比例升高。功能团是从各物种的生物学特点和在群落中的功能和作用来划分的,在研究和调查中比物种更为方便,可以代替物种分析节肢动物的群落结构。
- 周洪旭李淑文谭秀梅董亮王俊平程林友
- 关键词：节肢动物群落营养层
