程彦丽 作品数:23 被引量:53 H指数:4 供职机构: 天津农学院动物科学与动物医学学院 更多>> 发文基金: 国家现代农业产业技术体系建设项目 公益性行业(农业)科研专项 山东省科技发展计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 天文地球 更多>>
商品肉鸡中包涵体肝炎病毒的分离鉴定 从山东省自然发生疑似鸡包涵体肝炎的商品肉鸡群中分离到4株鸡包涵体肝炎病毒,分别命名为山东章丘株(SDZQ)、山东费县株(SDFX)、山东日照株(SDRZ)和山东潍坊株(SDWF)。这些毒株的复制可被5-溴尿嘧啶-2-脱氧... 国纪垒 刁有祥 薛聪 王蛟 李建侠 唐熠 程彦丽关键词:商品肉鸡 包涵体肝炎 鸭源新城疫NP蛋白的遗传变异与原核表达 本试验对分离自患病鸭一株鸭源新城疫SDFC株的NP基因进行了克隆和原核表达载体的构建,进行了诱导表达和重组蛋白抗原性的检测。从而为进一步研究NP的功能及鸭源新城疫预防和控制提供了理论依据。SDS-PAGE分析表明,可见大... 程彦丽 刁有祥 欧全宾 崔京腾关键词:鸭源新城疫病毒 NP蛋白 原核表达 鸭源新城疫NP蛋白的遗传变异与原核表达 引言鸭源新城疫,是一种有囊膜的、单股不分节段的负链高致病性的RNA病毒,其基因组共编码六种结构蛋白。其中NP蛋白、L蛋白、P蛋白及病毒RNA相结合组成了病毒的核衣壳。NP蛋白主要是保护病毒基因组RNA,参与病毒的复制和转... 程彦丽 刁有祥 欧全宾 崔京腾文献传递 肉鸡呼吸道病料中AIV、NDV、IBV、aMPV共感染的检测 本文从山东省济南、潍坊、青岛等地区肉种鸡群采集107份有呼吸道症状的病、死鸡肺脏样品,检测病料中低致病性禽流感病毒(Avian Influenza virus,AIV)、新城疫病毒(Newcastle disease v... 孙静 刁有祥 刘霞 孙杰 李建侠 程彦丽关键词:传染性支气管炎病毒 共感染 文献传递 鸭源新城疫病毒RT-LAMP快速检测方法的建立 被引量:3 2011年 【目的】建立鸭源新城疫病毒逆转录环介导等温核酸扩增(RT-LAMP)快速检测方法,为鸭源新城疫病毒的快速诊断提供支持。【方法】选取鸭源新城疫病毒NP基因的相对保守区序列,利用Primer Explorer V4在线软件设计了3对RT-LAMP引物,以鸭源新城疫病毒SDFCH株RNA为模板进行RT-LAMP反应,通过对反应温度、时间及反应体系各组分浓度的筛选,优化反应体系和反应条件,然后对该方法的灵敏性和特异性进行检测(以RT-PCR方法为对照),并将其应用于临床病料检测。【结果】优化的RT-LAMP反应体系能够在63℃下1h内实现目标核酸区段的大量扩增,反应结果可直接用肉眼判断;建立的鸭源新城疫病毒RT-LAMP检测方法特异性较强,灵敏度较高,与其他病毒,如H9N2亚型禽流感病毒(AIV)、鸭呼肠孤病毒(DRV)、禽偏肺病毒(aMPV)、传染性支气管炎病毒(IBV)等的核酸无交叉反应,可检测到1×10-3稀释度的目标RNA(0.1pg/μL),较普通RT-PCR的灵敏性高10倍;利用建立的鸭源新城疫病毒RT-LAMP检测方法对24份疑似鸭源新城疫样品的阳性检出率为41.7%。【结论】建立的鸭源新城疫病毒的RT-LAMP检测方法,具有快速、准确、特异性强、灵敏度高的特点。 鞠小军 刁有祥 唐熠 程彦丽 陈琳 李建侠 宋晓娜关键词:新城疫病毒 高抗体水平下H9N2亚型禽流感病毒对鸭的致病性 被引量:1 2013年 将60只种鸭免疫接种H9N2灭活疫苗,在高抗体水平下,通过点眼、滴鼻、气管注射3种接种途径人工感染300日龄种鸭,观察种鸭的发病情况、症状及剖检变化;于感染后3、6、9d采血进行血液生化指标检测;利用建立的RT-PCR方法检测各试验组和对照组的带毒情况;采集输卵管、肝脏、肺脏和气管等组织固定、切片、HE染色,观察各器官病理组织学变化;利用建立的IFA方法对H9N2在种鸭体内的分布进行研究。结果显示,3组接种H9N2亚型禽流感后,引起种鸭采食下降、流泪、排白色稀便等症状;总蛋白(TP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(AKP)的含量发生了显著变化;病理组织学变化以肝脏颗粒变性和空泡变性,肺脏广泛性出血和炎性细胞浸润,输卵管纤维蛋白渗出为特征;IFA阳性信号主要分布于气管、输卵管、肺脏、肝脏和胰腺等处;对照组精神状态良好,各项生理指标趋于正常,IFA未检测到阳性信号。结果表明,在高抗体水平下,H9N2亚型禽流感病毒也可通过眼结膜、鼻腔黏膜、气管黏膜等侵入机体导致鸭的发病。 肖坡 刁有祥 李建侠 吴海洋 程彦丽关键词:H9N2 血液生化指标 组织病理学 间接免疫荧光 鸭瘟病毒对SPF鸭的致病性研究 被引量:2 2012年 【目的】探讨鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)对SPF鸭的致病性。【方法】将DPV分别通过点眼滴鼻和皮下注射接种途径人工感染SPF鸭,以未攻毒健康SPF鸭为对照,观察各组鸭的发病情况及症状,于感染后不同时间随机剖杀试验组和对照组SPF鸭,采集肝脏、脾脏、肾脏、肺、心脏、气管、食道、肠道、胸腺、法氏囊、脑和泄殖腔等组织,常规方法制备石蜡切片,HE染色,观察各器官病理组织学变化,同时利用间接免疫荧光染色法(IFA)对DPV抗原在鸭体内的分布进行检测,并进行血常规和血液生化指标检测,分析了DPV对SPF鸭淋巴细胞转化率的影响。【结果】DPV接种后,引起鸭高热、下痢,组织器官出血、坏死,食道、泄殖腔黏膜出血、溃疡并有灰黄色假膜覆盖;病理组织学变化以血管壁损伤为主,肝、脾细胞变性、坏死,消化道黏膜上皮细胞坏死脱落。DPV感染后,在鸭的脾脏、胸腺、法氏囊、肝脏、食道、泄殖腔、肠道、肾脏、肺及气管中均检测到DPV抗原,且以肝脏、脾脏等组织中荧光最强;在脑和心脏中均未检测到DPV抗原。DPV感染组鸭血清中白细胞总数(WBC)、红细胞总数(RBC)、血小板总数(PLT)和总蛋白(TP)、血红蛋白(HGB)含量及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性、淋巴细胞转化率与对照组差异大多达显著或极显著水平。【结论】DPV感染主要引起SPF鸭各组织器官广泛性出血;脾脏、胸腺、法氏囊等免疫器官首先受到攻击和损害,并造成免疫抑制;皮下注射接种DPV比点眼滴鼻接种对SPF鸭的致病性强。 张坤 刁有祥 程彦丽 崔京腾 王蛟 刘鑫关键词:鸭瘟病毒 淋巴细胞转化 病理组织学 狐阴道加德纳氏菌的分离鉴定 2010年 本研究对山东省日照地区送检的病死狐样品进行了细菌的分离,根据分离菌株的形态特征、培养特性、生化试验和PCR鉴定,确定为狐阴道加德纳氏菌。对鉴定出的狐阴道加德纳氏菌进行药敏试验,结果表明该分离菌对万古霉素、复合磺胺敏感,而对卡那霉素、氨苄青霉素、头孢他啶等药物有耐药性。该研究为狐阴道加德纳氏菌病的预防、控制和临床治疗提供了重要的参考依据。 刘悦竹 刁有祥 颜赟 吴召强 李宏梅 吴焕荣 李瑶瑶 程彦丽 国纪垒人工感染种鸭生殖系统新城疫病毒的检测 本研究旨在探明鸭新城疫病毒通过人工感染后在种鸭生殖系统中分布。应用本实验室分离的一株经鸭胚传递的新城疫病毒SDFCH株,对42只无新城疫病毒感染的28周龄樱桃谷种鸭进行人工感染试验,试验分A、B、C 3组,A组母鸭攻毒组... 李建侠 刁有祥 刘霞 程彦丽 肖坡 国纪垒 孙静 吴海洋关键词:人工感染试验 种鸭 新城疫病毒 生殖系统 RT-PCR检测 B亚型禽偏肺病毒重组G蛋白间接ELISA方法的建立及应用 被引量:4 2013年 以纯化的B亚型禽偏肺病毒(aMPV)疫苗株(VIR-115B)重组G蛋白作为包被抗原,对各项条件进行优化,确定判定标准,建立检测B亚型aMPV抗体的间接ELISA方法。将构建好的重组质粒转入Rosetta(DE3)感受态细胞进行诱导表达,获得重组G蛋白。利用亲和层析法对表达产物进行纯化,并用Western-blotting对表达产物进行鉴定。以纯化后的重组G蛋白作为诊断抗原,对ELISA反应条件进行优化,初步建立检测B亚型aMPV抗体的间接ELISA诊断方法。结果显示,成功表达并纯化了B亚型aMPV疫苗株(VIR-115B)重组G蛋白,Western-blotting检测结果证明表达产物具有良好的反应原性。以重组G蛋白作为诊断抗原,建立了间接ELISA诊断方法。交叉试验结果表明重组G蛋白与新城疫、禽流感(H9N2)、传染性支气管炎和传染性法氏囊阳性血清均不发生交叉反应。该方法与法国IDEXX公司生产的aMPV抗体检测试剂盒符合率为96.0%。采用本试验建立的间接ELISA方法对山东省7个地区鸡场的1 139份鸡血清进行了检测,结果表明,山东省部分地区aMPV的抗体阳性率为37.05%。本试验建立的间接ELISA方法具有较好的特异性、敏感性和重复性,利用该方法初步证实山东省部分地区存在aMPV感染现象。这一研究为aMPV诊断试剂盒的研制奠定了基础,并为该病的诊断与流行病学调查提供有效的技术手段。 陈琳 刁有祥 邹金峰 唐熠 程彦丽 欧全宾 薛聪 崔京腾 鞠小军 孙晓艳 裴萍萍关键词:B亚型 间接ELISA