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王莉莉

作品数:3 被引量:0H指数:0
供职机构:南通大学公共卫生学院江苏省神经再生重点实验室更多>>
发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 2篇蛋白
  • 2篇融合蛋白
  • 2篇MYOSTA...
  • 1篇原核
  • 1篇原核表达
  • 1篇原核表达及纯...
  • 1篇抗体
  • 1篇抗体制备
  • 1篇抗血清
  • 1篇克隆表达
  • 1篇核表达
  • 1篇Β蛋白
  • 1篇S100Β
  • 1篇S100Β蛋...
  • 1篇TIBIAL
  • 1篇WESTER...
  • 1篇IMMUNO...
  • 1篇成熟肽
  • 1篇ANTIBO...
  • 1篇ANTISE...

机构

  • 3篇南通大学

作者

  • 3篇王莉莉
  • 3篇顾晓松
  • 2篇黄丽
  • 2篇刘梅
  • 1篇丁斐
  • 1篇蒋茂荣

传媒

  • 1篇神经解剖学杂...
  • 1篇交通医学
  • 1篇Neuros...

年份

  • 1篇2010
  • 1篇2009
  • 1篇2007
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
大鼠Myostatin蛋白成熟肽的原核表达及纯化
2007年
目的:利用谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白表达系统在大肠杆菌中表达纯化Myostatin成熟肽。方法:应用RT-PCR从大鼠的腓肠肌mRNA中逆转录扩增Myostatin成熟肽编码序列,克隆入原核表达载体pGEX-4T1中,IPTG诱导其在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,采用Western-blot用抗-GST抗体验证融合蛋白表达。融合蛋白经Glutathione-agarose色谱纯化。结果:PCR扩增的Myostatin基因序列与GenBank数据库中的序列一致;30°C,0.1mmol/LIPTG诱导16小时,GST-Myostatin融合蛋白获得优化表达,表达效率为25%;Western-blot证实融合蛋白的特异性表达。结论:成功构建融合蛋白GST-Myostatin重组基因,并在大肠杆菌中获得有效表达,为Myostatin抗体的制备及进一步研究该蛋白的功能奠定基础。
王莉莉黄丽刘梅顾晓松
关键词:原核表达融合蛋白
犬S100β蛋白的体外克隆表达及抗体制备
2010年
目的:制备犬S100β蛋白抗血清,为组织工程和神经损伤及修复研究提供实验基础。方法:提取犬坐骨神经总RNA,采用RT-PCR方法扩增S100β基因,并克隆入pGEM-T载体。经测序验证后,将S100β基因亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1中,IPTG诱导GST-S100β融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。GST-S100β融合蛋白经Glutathione Sepharose亲和层析纯化后免疫新西兰大白兔,获得抗血清,经酶联免疫吸附试验(ELISA)法、Western Blot和免疫组化法检测抗体的效价和特异性。结果:测序结果表明,扩增的犬S100β基因序列与GenBank中的序列一致;并得到了较高纯度的GST-S100β融合蛋白和兔源性抗S100β血清,经Western Blot、免疫组织化学及ELISA实验证实所得抗体具有较高的特异性及效价。结论:构建了犬S100β基因的重组原核表达质粒,并获得了高效表达。成功制备了兔抗犬S100β抗血清,并具有较高的效价和特异性,为进一步研究神经损伤与修复机制提供实验基础。
蒋茂荣王莉莉顾晓松丁斐
关键词:融合蛋白抗血清
Preparation and application of rat myostatin antiserum
2009年
Objective To prepare and identify a polyclonal antibody against rat myostatin and investigate myostatin expression in the rat atrophic gastrocnemius muscle after tibial nerve crush. Methods The purified fusion protein was used as antigen to immunize rabbits for the preparation of polyclonal antibody. The polyclonal antibody of the protein was measured by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), western-blot and immunochemistry. Myostatin protein expression levels in normal and atrophic gastrocnemius muscle were detected by western-blot and immunochemistry assays. Results The GST-myostatin had a purity of 96% and possessed high titer and specificity. The level of myostatin in gastrocnemius muscle significantly increased one week after tibial nerve crush, reached the peak on day 14, and then returned to normal level on day 28. Conclusion We have successfully made antiserum of rat myostatin and found that the expression level of myostatin protein in the gastrocnemius after tibial nerve crush-induced atrophy was time-dependent. This study provides an experimental basis to clarify the possible role of myostatin during skeletal muscle atrophy.
黄丽王莉莉刘梅顾晓松
关键词:MYOSTATINANTIBODYIMMUNOHISTOCHEMISTRY
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