王艳利
- 作品数：7 被引量：19H指数：3
- 供职机构：西北工业大学生命学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家重点实验室开放基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 模拟微重力对NIH-3T3细胞clock及bmal1基因表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨模拟微重力对NIH-3T3细胞节律基因clock与bmal1 mRNA表达的影响。方法 NIH-3T3细胞采用回转器分别回转培养6 h,12 h,18 h,24 h,30 h,36 h,42 h和48 h,同时设置1 G静置培养为对照组。Trizol试剂提取细胞总RNA,实时定量PCR法检测节律基因clock及bmal1 mRNA在各时间点的相对表达量。通过余弦法获取节律参数,并经振幅检验分析是否存在昼夜节律。结果 clock及bmal1基因mRNA的表达趋势相近。对照组clock与bmal1 mRNA相对水平呈现节律性表达,而回转组表达无节律性。回转组mRNA相对水平最大值出现于约6 h时间点,最小值出现在约18 h,而对照组分别出现于约18 h与24 h。与对照组比回转组的周期延长了约16 h。回转后clock与bmal1的峰值相位前移。结论 NIH-3T3细胞中clock与bmal1的表达存在同步化的转录特征。模拟微重力可影响clock与bmal1节律的周期长度及峰值相位。
- 王艳利吕柯钟悦江舟曲丽娜陈海龙毕蕾曹宏卿李秀锦李莹辉
- 关键词：模拟微重力近日节律CLOCK基因
- 尾吊对小鼠肝脏组织中clock与bmal1基因节律的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究尾吊对持续黑暗条件下小鼠肝脏节律基因clock与bmal1节律表达的影响。方法常规明暗光照条件导引(entrainment)C57BL/6J(C57)小鼠1周后,在持续黑暗条件下采用头低位-30°尾吊C57小鼠,于尾吊第12天、13天、14天每隔4 h连续18个时间点进行肝脏组织取材,提取总RNA,并运用Real-time PCR方法检测肝脏组织clock和bmal1节律基因mRNA的表达变化。结果尾吊组与对照组肝脏clock与bmal1节律基因mRNA水平均呈现出节律性表达特征。在尾吊条件下,clock基因mRNA的峰值相位提前约4 h,bmal1基因mRNA表达节律的振幅在每天授时因子时间(zeitgeber time,ZT)ZT2与ZT6显著下降(P<0.05)。结论在持续全黑暗条件下,C57小鼠肝脏组织节律基因clock与bmal1的mRNA水平表现出明显的近日节律性,尾吊对clock基因产生峰值相位提前的效应,对bmal1基因产生振幅减少的效应。
- 温美丽吕柯曲丽娜陈海龙王艳利毕蕾万玉民刘鸿宇李莹辉
- 关键词：近日节律尾吊肝脏CLOCK基因
- 木犀草素对东莨菪碱所致大鼠学习记忆障碍的改善作用被引量：4
- 2017年
- 研究了木犀草素对东莨菪碱所致大鼠学习记忆障碍的改善作用。将SD大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、多奈哌齐组和不同剂量(30mg·kg^(-1)、60mg·kg^(-1)、120mg·kg^(-1))木犀草素组,腹腔注射东莨菪碱建立大鼠学习记忆障碍模型,采用Morris水迷宫实验和避暗实验测试大鼠学习记忆能力,同时测定大鼠海马组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、乙酰胆碱酯酶(AchE)活性及丙二醛(MDA)含量。结果表明:与模型组比较,木犀草素(120mg·kg^(-1))处理可显著缩短大鼠在Morris水迷宫实验中的逃避潜伏期(P<0.05或P<0.01),增加大鼠穿台次数、目的象限时间比和游程比(P<0.05),延长避暗实验中大鼠的入暗潜伏期(P<0.01);同时木犀草素(120mg·kg^(-1))处理可提高大鼠海马组织SOD活性(P<0.01),降低AchE活性(P<0.05)及MDA含量。木犀草素可通过抑制海马区氧化损伤和增强胆碱能功能改善东莨菪碱所致大鼠学习记忆障碍。
- 张永亮陈海龙王婷梅王艳利冀国华李莹辉曲丽娜
- 关键词：木犀草素学习记忆
- per1,per2 3′UTR双荧光素酶报告基因重组质粒的构建
- 2016年
- 构建了包含目的片段小鼠节律基因per1,per2 3′UTR全长的重组质粒,为初步分析转录后可能调控per1,per2基因的miRNAs提供了有效手段。用反转录试剂盒将从小鼠肝脏组织提取的RNA反转录得到cDNA,以获得的cDNA为模板PCR扩增per1,per2 3′UTR全长,经回收纯化、酶切后将目的片段定向克隆到PGL3-promoter质粒上,再经转化扩增挑取克隆进行菌落PCR,对获得的阳性克隆进行酶切鉴定并测序。PCR产物鉴定结果表明,目的片段per1,per2 3′UTR序列扩增成功;菌落PCR及单酶切鉴定结果表明,per1,per2 3′UTR已插入PGL3-promoter载体中;测序结果表明,per1,per2 3′UTR插入序列,插入方向正确。per1,per2 3′UTR双荧光素酶报告基因重组质粒的成功构建为进一步研究节律基因转录后的调控机制奠定了基础。
- 王艳利吕柯陈海龙冀国华王婷梅张永亮毕蕾钟萍李莹辉曲丽娜
- 关键词：生物节律
- 生物节律基因非编码RNA调控机制被引量：11
- 2016年
- 节律性的振荡不仅存在于生物节律中枢也存在于外周器官、组织及细胞中,其产生依赖于节律基因的转录、转录后及翻译后水平调控。近几年,生物节律转录后水平调控机制研究成为热点。非编码RNA(ncRNAs)调控组分小RNA(microRNA)与长链非编码RNA(lncRNA)作为参与转录后调控的重要分子,已有研究表明microRNA与lncRNA调控节律基因mRNA与蛋白的相位及振幅。本文概述microRNA与lncRNA参与昼夜节律中枢与外周调控的研究进展,为生物节律转录后调控机制的进一步研究提供参考。
- 王艳利曲丽娜李莹辉
- 关键词：生物节律节律基因小RNA长链非编码RNA
- 小鼠节律基因clock,bmal1 3'UTR重组质粒构建与应用
- 2016年
- 为探讨miRNA与节律基因的相互作用,首先通过NCBI查找小鼠节律基因clock,bmal1 3'UTR序列,PCR扩增节律基因clock,bmal1 3'UTR全长后将目的片段定向克隆到PGL3-promoter质粒上并测序验证,构建节律基因clock,bmal1 3'UTR重组质粒。然后通过Target Scan软件预测可能与clock,bmal1 3'UTR相互作用的miRNAs,利用脂质体将miRNA模拟物与重组质粒共转293T细胞进行荧光活性检测,初步分析可能调控clock,bmal1表达的miRNAs。结果显示,采用RVP4引物进行的重组质粒反向测序结果与NCBI上查找的序列反向互补,成功构建小鼠节律基因clock,bmal1 3'UTR重组质粒,为进一步研究节律基因转录后调控机制奠定基础。miR-199a-5p(P<0.05)与miR-142-3p(P<0.01)下调重组质粒活性约33%和45%,初步证实miR-199a-5p能够与clock 3'UTR,miR-142-3p能够与bmal1 3'UTR作用调控基因转录活性。
- 王艳利吕柯陈海龙冀国华王婷梅张永亮毕蕾钟萍曲丽娜李莹辉
- 关键词：CLOCKBMAL1
- 尾吊复合隔离导致的大鼠抑郁样行为研究被引量：3
- 2017年
- 目的研究2周的尾吊复合隔离环境所导致的大鼠抑郁样行为。方法 24只雄性SD大鼠随机平均分为3组:对照(Con)、尾吊(tail suspension,TS)、尾吊复合隔离(tail suspension combined with isolation,TS+I)。造模前后检测摄食量和体重变化,造模结束后依次进行空场、新奇事物探索、强迫游泳实验。结果 TS和TS+I组大鼠体重和摄食量低于对照组,且TS+I组最低。TS和TS+I组大鼠的主动性活动显著少于对照组,且TS+I组大鼠最少。TS和TS+I组大鼠探索潜伏期变长,且探究行为减少,其中TS+I组大鼠表现最差。TS和TS+I组大鼠的攀爬次数少于对照组,TS+I组大鼠不动时间最长。结论 2周的尾吊复合隔离环境导致的抑郁样行为比单一尾吊更为严重,此模型可用于航天抑郁发病机制研究及对抗药物开发。
- 张永亮陈海龙王婷梅王艳利冀国华吕柯李莹辉曲丽娜
- 关键词：尾吊抑郁样行为
