王端顺
- 作品数:33 被引量:44H指数:4
- 供职机构:北京师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 钙调素对肿瘤细胞周期的调节作用被引量:2
- 1993年
- 利用钙调素拮抗剂三氟拉嗪(TFP)研究了钙调素对HeLa细胞周期进程的影响,TFP处理的细胞被阻抑在G_1/S,使S期群体及DNA合成下降,G_2期群体增加.有丝分裂(M)前期细胞减少,中期细胞增加.结果表明钙调素对G_1至S期.G_2至M期和M中期至M后期具有调节作用,钙调素通过细胞周期中上述3个位点对肿瘤细胞增殖进行调节.
- 许亮国王端顺
- 关键词:钙调素细胞周期调节肿瘤细胞
- 钙调素对DNA合成的影响被引量:5
- 1995年
- 利用钙调素calmodulin,CaM)拮抗剂─三氟拉嗪(trifluoperazine,TFP)对G0期小鼠C3H10T1/2成纤维细胞进入S期和DNA合成进行了研究.G0期细胞进入S期时,大量钙调素进入细胞核,其水平为G0期的2倍。TFP处理的细胞被阻抑在G1期,不仅使S期细胞群体下降,而且3H-TdR掺入DNA强度受到明显抑制.同时,TFP处理的细胞胸腺嘧啶核苷激酶(thymidinekinase,TK)基因表达及TK活性亦明显下降,但不影响S期细胞核内的钙调素水平,结果表明钙调素功能之抑制不仅阻抑细胞从G1期至S期的进程,而且对细胞DNA合成强度亦有抑制作用.
- 金珊柳惠图王端顺
- 关键词:DNA细胞三氟拉嗪调钙蛋白
- 钙调素高表达对NRK细胞中DG-PKC和cAMP-PKA水平的影响被引量:3
- 1999年
- 钙调素(CaM)作为Ca2+的主要受体,对细胞增殖起重要调节作用,而且在转化细胞中CaM的水平明显高于正常细胞.cAMP作为一种第二信使,起着将细胞外刺激信号转化为细胞内各种生理活动的媒介作用.蛋白激酶A(PKA)则是这种转化过程中的关键激酶.蛋白激...
- 张伟柳惠图王端顺
- 关键词:钙调素CAMP-PKA
- 细胞骨架与早期基因mRNA定位的相关性研究被引量:3
- 1997年
- 近年来利用高压电子显微镜、组化、生化和冰冻蚀刻等技术发现了一些mRNA,多聚核糖体及蛋白转译延伸因子在细胞骨架上的定位。蛋白转译机构在细胞骨架上的定位,提示细胞骨架可能与基因表达有关。早期基因c-jun,c-fos,c-mys的产物都是转录因子,对Go至S期有重要调节作用。Zambetti等发现微丝解聚剂——细胞松弛素D(Cytochalasin D,CD)可刺激Hela细胞。c-fos的转录活性,并发现问期细胞中80%的c-fos mRNA与细胞骨架相结合,而CD处理使微丝解聚后,70%以上的mRNA出现在可溶相中, 但微丝解聚剂对C-jun,C- myc的转录活性是否有影响,其mRNA是否与细胞骨架相结合,迄今尚未见报道。
- 鞠文君王端顺
- 关键词:细胞骨架早期基因基因转录
- 人肿瘤细胞与正常细胞内微管的PAP免疫酶细胞化学观察被引量:2
- 1986年
- 我们利用兔抗微管蛋白抗体和兔抗辣根过氧化物酶(HRP)抗血清制备的HRP—抗HRP(PAP)复合物,建立了微管的PAP免疫酶细胞化学方法。应用此法观察到人食管癌ECa 109、胃癌SGC 7901,乳腺癌MCF 7和成骨肉瘤OS 732细胞间期胞质微管减少或消失,只有大量弥散分布的微管蛋白棕色反应产物,在微管组织中心(MTOC)附近十分密集,而正常成纤维细胞和胎儿胃粘膜上皮细胞间期,都有发达的胞质微管结构(CMTC)。在分裂期,这些肿瘤细胞都显示纺锤体微管,与正常细胞比较无明显差异。本研究应用PAP方法进一步证明,以前用免疫荧光细胞化学方法观察到的人肿瘤细胞间期胞质微管缺陷的特征。除去低温(4℃)或秋水仙酰胺处理后,解聚的CMTC又可恢复,表明本方法与免疫荧光染色法,同样具有很高的特异性。本工作在细胞固定及免疫反应的某些步骤上有所改进。
- 林仲翔王端顺范保荣严宇新高捷孟松娘汪堃仁
- 关键词:微管微管组织中心肿瘤细胞
- 钙调素对微管组装的调节作用被引量:3
- 1994年
- 利用我们建成的钙调素(calmodulin,CaM)表达可调细胞模型──RC3细胞,对CaM高表达时微管(microtubule,MT)组装行为进行了研究。当用生理剂量(1 μmol/L)的地塞米松(daxamethasone,DXM)处理RC3细胞后,细胞内CaM水平提高,而管蛋白浓度没有变化,造成钙调素/管蛋白比值上升,MT解聚。但同时加入CaM桔抗剂三氟拉嗓(trifluoperazine,TFP)处理时,则可抑制MT的解聚。C3H10T1/2转化细胞CaM含量的增加是引起MT解聚的主要因素,TFP处理可恢复MT组装。RC3细胞CaM高表达导致MT解聚的实验结果是细胞转化后CaM含量增加致使MT不稳定的有力佐证,说明钙调素与管蛋白间浓度比的动态平衡是维持MT系统相对稳定的重要条件。
- 金珊柳惠图王端顺
- 关键词:调钙蛋白
- 在ts-RSV LA90细胞转化过程中钙流变化的研究
- 1990年
- 本文以ts-RSV LA90细胞为模型,用放射性同位素示踪技术测定了通过细胞质膜的^(45)Ca^(2+)流水平;同时用钙指示剂Indo-1 AM和光学多道分析仪测定了胞内[Ca^(2+)]_i,初步研究了Ca^(2+)流和[Ca^(2+)]_i在v-src基因引起细胞转化过程中的动态变化。结果表明LA90细胞质膜上^(45)Ca^(2+)流的改变是细胞转化过程中可以检测到的早期事件之一,转化状态(33℃)细胞的^(45)Ca^(2+)流大于正常状态(40℃)的,细胞从正常到转化(40℃→33℃)的25分钟内^(45)Ca^(2+)流就有明显增大。TMB-8可以抑制转化引起的^(45)Ca^(2+)流出的增大,小牛血清可以刺激正常状态细胞的^(45)Ca^(2+)流出增大,^(45)Ca^(2+)流出与温度有一定依赖关系;细胞转化引起的^(45)Ca^(2+)流入增大,可被异博定抑制,^(45)Ca^(2+)流入不受温度的影响。LA90细胞[Ca^(2+)]_i在转化早期有明显升高,并维持在较正常细胞高2—3倍的水平,A23187-Br可提高正常LA90细胞[Ca^(2+)]_i,[Ca^(2+)]_i不受温度的影响。从质膜上^(45)Ca^(2+)流和[Ca^(2+)]_i的增大说明转化细胞虽然对胞外Ca^(2+)浓度依赖性下降,但维持增殖及转化状态仍然需要一定的胞外Ca^(2+),并通过提高质膜Ca^(2+)流入和释放内源性Ca^(2+),使转化细胞[Ca^(2+)]_i维持在较高水平上。LA90细膜质膜上^(45)Ca^(2+)流和[Ca^(2+)]_i的增大在细胞转化中起着重大作用。
- 张云王端顺郑冬冬张鸿卿薛绍白
- 关键词:细胞转化
- 钙调素拮抗剂TFP对Hela细胞微丝及波形纤维蛋白分布的影响
- 1994年
- 利用钙调素拮抗剂三氟拉嗪(TFP)及微管的不同聚合状态对Hela细胞微丝及波形纤维蛋白分布的影响进行了研究。Hela细胞微丝明显解聚,而波形纤维蛋白则密集分布在细胞核一侧。细胞经TFP处理2d后,可见微丝分布的恢复,而波形纤维蛋白分布则变得分散,并向质膜延伸。但对TFP处理2d后的细胞用低温(2~4℃)处理,使微管解聚,或以紫杉酚(taxol)处理24h,使微管高度聚集以破坏其微管网络系统时,微丝则随之发生明显的解聚现象,而波形纤维蛋白又恢复为密集分布于细胞核一侧的状态。若在低温处理前加taxol预处理1.5h,以稳定微管时,此时在细胞周边仍可见微丝存在,波形纤维蛋白仍保持其分散分布状态。结果表明经TFP处理的Hela细胞微丝及波形纤维蛋白分布的变化可能与微管分布的改变具有一定的联系。
- 许亮国孙惟东徐淑惠王端顺
- 关键词:微丝TFPHELA细胞
- 哺乳动物胚胎心肌细胞间隙连接的超微结构研究
- 1992年
- 用超薄切片技术研究了家兔和大鼠胚胎心肌细胞间隙连接(GJ)的超微结构.发现与多种成熟和新生的哺乳动物心肌细胞中观察到的类同:在家兔和大鼠的胚胎心肌细胞中有一种被称为结合GJ小泡(GJAV)结构;已组装好的GJ有环状和线状2种,并有一些GJAV正连环组装环状的GJ.分析并探讨了心肌细胞GJ的组装特点.
- 陈力胡云英周固王端顺Gwendolyn E GoingsErnest Page
- 关键词:胚胎心肌细胞超微结构
- 蛋白激酶A抑制剂对HeLa细胞S期进程的影响被引量:1
- 2001年
- 以同步化的HeLa细胞为实验材料 ,研究了蛋白激酶A (PKA)抑制剂对HeLa细胞S期进程的影响及其作用的分子机理 .通过TdR双阻断法 ,获得了同步化的S期细胞 ,3H TdR掺入实验表明PKA抑制剂typeⅢ(80mg/L)明显提高了S期3H TdR的掺入水平 ,提示了PKA在S期进程中起阻抑作用 .进一步实验表明 ,在PKA抑制剂typeⅢ作用下胸苷激酶 (TK)活性和PCNA蛋白水平均有所提高 ,同时明显促进了CyclinA蛋白的表达 ,并抑制了周期负调因子 p2 1蛋白的水平 ,但对CDK2表达几乎无影响 .结果表明 ,PKA可通过作用于PCNA和引擎分子CyclinA的水平和通过影响 p2 1的表达负调于S期进程 .这可能是PKA负调HeLa细胞S期进程的分子机理之一 .
- 孙霞柳惠图童迎凯王端顺
- 关键词:蛋白激酶AS期HELA细胞