王秀丽
- 作品数：54 被引量：97H指数：4
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 猪霍乱沙门氏菌C79102株的制备与检定被引量：1
- 2017年
- 为研究猪霍乱沙门氏菌C79102株的菌种特性,制备了一批猪霍乱沙门氏菌C79102株,并对菌种的真空度、纯粹、剩余水分、培养特性、形态及生化特性、血清学特性、特异性、毒力等进行检定,重点对菌种的毒力进行研究。试验结果表明,该冻干菌种的真空度、纯粹、剩余水分、培养特性、形态及生化特性、血清学特性均符合《中华人民共和国兽用生物制品规程》二〇〇〇版质量标准的规定,特异性检验结果显示C79102在含1%醋酸铊的普通肉汤中不生长,毒力试验结果显示,不同制备方法获得的肉肝胃消化汤培养的菌液毒力差异明显。本研究可以为猪霍乱沙门氏菌的制备和检定提供参考依据。
- 王秀丽张媛李建彭国瑞刘博辛凌翔蒋玉文
- 关键词：特异性毒力
- 安徽省白羽肉鸡中副鸡禽杆菌的分离鉴定及流行病学分析
- 2020年
- 通过病原分离对安徽省多家白羽肉鸡养殖场持续出现疑似鸡传染性鼻炎的鸡群进行确诊,从不同批次发生鸡传染性鼻炎疑似症状的鸡体内分离细菌,经细菌分离、纯化、回鸡试验,共分离到8株细菌,经形态及培养特性、生化试验、血清学特性、16S rRNA基因序列分析等方法对分离的细菌进行鉴定。结果表明,所分离的细菌有1株为A型副鸡禽杆菌,7株为B型副鸡禽杆菌,在安徽省持续引起幼龄肉鸡发生鸡传染性鼻炎的流行中B型副鸡禽杆菌是主要流行毒株。
- 王秀丽于永于雷辛凌翔张媛李俊平李旭妮
- 关键词：副鸡禽杆菌传染性鼻炎
- 重组腐败梭菌α毒素的生物活性及其灭活疫苗的免疫效果被引量：1
- 2019年
- 为了研究重组腐败梭菌α毒素的生物活性及其灭活疫苗的免疫效果,采用PCR法扩增腐败梭菌α毒素基因,构建重组表达质粒pET28α-csa,转化E.coli BL21(DE3);对表达产物的细胞毒性、小鼠致死毒力和抗毒素中和试验等生物活性进行鉴定,并将其制成灭活疫苗免疫家兔和靶动物绵羊,通过攻毒素试验和血清中和试验与类毒素疫苗进行比较。结果显示,重组α毒素能够与腐败梭菌抗毒素血清反应,具有细胞毒性,小鼠致死毒力超过300 MLD/mL,其毒性可以被腐败梭菌抗毒素中和。制成灭活疫苗免疫家兔,随着免疫剂量的增加血清中和效价随之提高,0.25 mL/只(含重组α毒素0.11 mg)免疫即可使家兔获得100%保护,免疫效果优于类毒素疫苗;0.50 mL/只(含重组α毒素0.22 mg)免疫绵羊攻毒保护率为75%。结果表明,重组腐败梭菌α毒素具有很好的生物活性,所制成的灭活疫苗可以作为预防羊快疫的候选疫苗。
- 彭国瑞蒋玉文彭小兵王秀丽李旭妮王猛
- 关键词：腐败梭菌Α毒素生物活性羊快疫
- 布鲁氏菌病实验室诊断方法的研究进展被引量：41
- 2011年
- 对布鲁氏菌病的病原学和血清学诊断技术的研究进展进行了综述,包括灵敏特异的ELISA、FPA、PCR、核酸探针技术、胶体金标记技术及新型可视化LAMP等,以期为布鲁氏菌病的研究提供参考。
- 王秀丽蒋玉文毛开荣丁家波王秋菊何宇彭小兵
- 关键词：布鲁氏菌病病原学血清学
- 一株表达EGFP基因的重组伪狂犬病毒的构建及其复制稳定性分析
- 2022年
- 为探寻伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)基因缺失株rPRV-bc-8基因组UL4-UL3基因间区域是否可作为外源基因的插入位点,在实验室已构建的含有增强型绿色荧光蛋白(Enhance Green fluorescent protein,EGFP)基因的转移质粒pMD-US6+7-EGFP-US2的基础上,通过DNA体外分子克隆技术将UL4序列替换左同源臂US6+7序列,UL3序列替换右同源臂US2序列,并将PolyA引入转移质粒,得到转移质粒pMD-UL4-EGFP-UL3。利用脂质体转染法将转移质粒pMD-UL4-EGFP-UL3与亲本毒rPRV-bc-8共转染PK-15细胞,经蚀斑纯化成功得到一株能够稳定表达EGFP基因的重组伪狂犬病毒rPRV-UL4-EGFP-UL3。通过倒置荧光显微镜观察以及PCR鉴定确定EGFP基因已成功插入到伪狂犬基因组的UL4-UL3之间,并通过细胞传代试验分析得到重组毒的遗传稳定性良好。通过体外增殖试验分析得到重组病毒rPRV-UL4-EGFP-UL3在细胞内的增殖速度较快,接种后12 h内滴度始终高于亲本毒rPRV-bc-8,接种后40 h达到最高滴度108.3 TCID50/mL,与亲本毒的最高滴度接近,但是最高滴度的出现时间晚于亲本毒,并且在达到平台期后病毒滴度下降的比亲本毒快。通过对病毒培养液中荧光蛋白浓度进行测定,结果显示在接种后56 h时荧光蛋白浓度达到最高值4793.9 ng/mL,之后进入平台期。综上结果表明构建的重组病毒具有良好的遗传稳定性及体外复制能力,并且外源基因EGFP在此位点具有良好的表达效果,为进一步相关重组病毒的构建奠定了基础。
- 杨明珠陈晓春张媛王秀丽李俊平
- 关键词：重组病毒增强型绿色荧光蛋白
- 羊布鲁氏菌病iELISA抗体检测方法的建立及布鲁氏菌omp28基因的克隆与表达
- 布鲁氏菌病（Brucellosis）是一种重要的人兽共患传染性变态反应疾病,具有重要的公共卫生学意义。免疫接种和准确诊断是有效防控该病的两大重要手段。目前布鲁氏菌病的诊断方法大都是基于LPS抗原建立的,本研究试图建立一种...
- 王秀丽
- 关键词：布鲁氏菌IELISA
- 传染性法氏囊病病毒BC6/85株全基因组克隆及其序列分析被引量：1
- 2013年
- 以传染性法氏囊病病毒（IBDV）BC6／85株基因组RNA为模板，采用RT—PCR方法扩增并克隆了IBDVBC6／85株基因组全长eDNA。序列测定结果表明：A节段全长共3260个核苷酸，与IM株的同源性最高为97．4％，与其他血清I型毒株的核苷酸同源性介于91．2％～97．1％；B节段有2827个核苷酸，与IM株同源性最高为98．6％，与其他毒株的核苷酸同源性为88．7％～98．6％。通过对编码的氨基酸序列进行分析，发现BC6／85株有21个特有氨基酸，其中15个位于多聚蛋白VP2—4—3。系统进化树分析表明，BC6／85株与经典毒株、弱毒株和变异株的关系较近，而与超强毒株相对较远。
- 于雷王秀丽杨承槐李俊平李启红刘丹黄建华李慧姣
- 关键词：传染性法氏囊病病毒全基因组
- B型副鸡禽杆菌田间分离株的毒力及免疫原性研究被引量：2
- 2022年
- 为探索分离自安徽省某大型白羽鸡场的1株B型副鸡禽杆菌的毒力及免疫原性,本试验测定了该菌对5~6胚龄SPF鸡胚及35~40日龄SPF鸡的毒力,并用该菌株制备免疫原,免疫35~40日龄SPF鸡,用攻毒的方法测定菌株的免疫原性,同时对本菌株制备的抗原及目前国内、国外市场上销售的鸡传染性鼻炎A型、B型、C型三价或二价灭活疫苗的免疫效力进行比较。毒力试验结果显示,本菌株对SPF鸡胚的最小致死剂量为110 CFU,对SPF鸡的最小发病剂量为5.5×10^(3) CFU。免疫原性试验结果显示,本菌株制备的抗原免疫鸡能有效抵抗本菌株的攻击,说明本菌株的免疫原性良好,而市场上销售的鸡传染性鼻炎三价/二价灭活疫苗免疫鸡均无法抵抗本菌株的攻击,说明市场上销售的疫苗对本菌株的保护效果较差,B型菌疫苗间的交叉保护效果不理想。本试验为B型鸡传染性鼻炎疫苗的研究提供参考和物质基础。
- 王秀丽于永于雷李旭妮蒋玉文辛凌翔张媛李俊平
- 关键词：副鸡禽杆菌毒力免疫原性疫苗
- 猪丹毒丝菌C43-5株菌种毒力检定标准再评价
- 2023年
- 为进一步完善猪丹毒疫苗毒力检定标准,对猪丹毒丝菌C43-5株在肉肝胃消化汤中的生长规律进行了分析,测定了菌株对猪的最小致死剂量,并对1986、1996、2006、2015年4个冻干代次菌种进行了毒力和免疫原性测定。结果显示:C43-5株在肉肝胃消化汤中培养16 h时活菌数最高,而后进入稳定期,培养19 h后活菌数迅速下降,菌体大量死亡;以3.5×10^(10) CFU活菌静脉注射56~63日龄健康易感猪,2只试验猪在4 d内全部死亡;1986、1996、2006、2015年4个冻干代次的C43-5株菌种毒力和免疫原性检定结果均符合要求。同时提出了猪丹毒丝菌C43-5株毒力检定标准的修改建议,为延长菌种的保存期限提供了数据支撑。
- 李旭妮李建王秀丽刘元杰张一帜徐磊冯妍张媛
- 产毒多杀性巴氏杆菌毒素不同重组片段的免疫原性比较被引量：1
- 2016年
- 为了研究多杀性巴氏杆菌毒素(PMT)片段的免疫原性,本试验对8个PMT片段分别进行了原核表达后比较分析。根据toxA基因序列,分别设计引物扩增出8个分段基因,再将其克隆到原核表达载体pET32a系统中。SDSPAGE结果表明,在大肠杆菌BL21(DE3)中均成功表达;Western-blotting结果表明,仅重组PMT1-506aa、PMT1-391aa、PMT505-1285aa和PMT973-1285aa片段的表达产物具有反应原性。将该4个重组PMT片段分别制成疫苗,皮下注射免疫小鼠,间隔14d进行二免。二免后14d,用天然PMT进行皮下注射攻毒。结果以2×LD100进行攻毒时,免疫保护效果PMT1-506aa(10/10)、PMT505-1285aa(10/10)、PMT973-1285aa(8/10)显著优于PMT1-391aa(1/10);以5×LD100进行攻毒时,免疫保护效果PMT1-506aa(10/10)、PMT505-1285aa(10/10)显著优于PMT973-1285aa(3/10)、PMT1-391aa(0/10);以10×LD100进行攻毒时,免疫保护效果PMT505-1285aa(10/10)显著优于PMT1-506aa(3/10)。本研究表明,PMT505-1285aa的免疫保护率最高,最适合作为预防PAR的候选疫苗材料。
- 王猛彭小兵李旭妮彭国瑞张磊李建张媛王秀丽蒋玉文
- 关键词：产毒多杀性巴氏杆菌PMT免疫原性
