王甦
- 作品数：12 被引量：70H指数：5
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- 细胞外信号调解激酶对蟾蜍灵诱导白血病细胞凋亡影响的研究被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨细胞外信号调解激酶(ERK)对蟾蜍灵诱导白血病细胞凋亡的影响。方法:形态学观察和流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:0.5μmol/L蟾蜍灵作用K562细胞24 h诱导典型的细胞凋亡,预先用ERK抑制剂PD98059处理细胞1 h,明显增加蟾蜍灵诱导的细胞凋亡率(P<0.05);而用佛波酯预先处理后,明显拮抗蟾蜍灵的作用(P<0.05)。结论:ERK负向调节蟾蜍灵诱导的K562细胞凋亡过程。
- 王甦张晓晶刘云鹏侯科佐罗颖刘世洲王妍
- 关键词：蟾蜍灵凋亡白血病细胞
- 紫杉醇诱导黑色素瘤细胞凋亡的研究被引量：7
- 2006年
- 目的：探讨紫杉醇体外抑制人黑色素瘤细胞（A375细胞）增殖及诱导凋亡作用机制。方法：四甲基偶氮唑蓝（MTT）还原法测定细胞活力；光镜和电镜观察细胞形态变化；流式细胞术（FCM）检测细胞周期和凋亡率。结果：紫杉醇通过诱导细胞凋亡抑制A375细胞生长。并呈时间和剂量依赖性（P〈0．01）；当0．01-1μmol／L紫杉醇作用于培养细胞24h后即可引起猾亡小体等典型细胞凋亡形态学改变；FCM分析显示：紫杉醇在0．001μmol／L即可诱导细胞凋亡，但不影响细胞周期，在0．01μmol／L时使G0／G1期细胞明显减少，在0．1μmol／L以上时使细胞发生G2／M期阻滞。结论：紫杉醇具有抑制A375细胞生长和诱导细胞凋亡作用。不同浓度紫杉醇诱导细胞凋亡的作用机制不同。
- 张晓晶王甦刘云鹏侯科佐王舒宝
- 关键词：紫杉醇黑色素瘤凋亡
- 丝裂原活化蛋白激酶信号转导系统对Vp-16诱导分化作用的影响
- 2005年
- 目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-acti-vated protein kinases,MAPKs)信号转导系统对依托泊苷(Vp-16)诱导K562细胞分化作用的影响.方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞增殖活性;流式细胞仪解析细胞周期;硝基四氮唑蓝(NBT)还原实验检测细胞向单核/巨噬系统分化.结果:0.1～0.8μg/mL的Vp-16抑制K562细胞增殖,引起细胞G2/M期阻滞,诱导细胞向单核/巨噬系统分化;细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK)抑制剂PD98059降低Vp-16的诱导分化作用,P＜0.05;p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kina-ses,p38 MAPK)抑制剂SB203580增强Vp-16的作用,P＜0.05;而C-JUN氨基末端激酶(c-jun N-terminal ki-n2ses,JNK)抑制剂SP600125对Vp-16的诱导分化作用无明显影响,P＞0.05.结论:在Vp-16诱导K562细胞向单核/巨噬系统分化过程中,ERK正向,p38MAPK负向调节Vp-16的诱导分化作用.
- 王甦刘云鹏侯科佐罗颖刘世洲
- 关键词：丝裂原激活蛋白激酶类依托泊苷
- 蟾蜍灵诱导HL-60细胞凋亡过程中对Bcl-2、Survivin、Smac/DIABLO表达的影响被引量：35
- 2006年
- 目的研究蟾蜍灵在诱导HL-60细胞凋亡过程中,对线粒体凋亡途径相关基因Bcl-2、 Bax、Survivin及Smac/DIABLO表达的影响。方法采用锥虫蓝拒染法检测细胞存活情况,细胞形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot分析Bcl-2、Bax、Smac/DIABLO、Survivin及caspase-3蛋白表达,RT-PCR检测Survivin mRNA表达。结果蟾蜍灵抑制HL-60细胞增殖,24,48及72 h的IC50 值分别为25．8,8．0及2．1 nmoL/L。蟾蜍灵大于50．0 nmol/L时可明显诱导HL-60细胞凋亡。50．0 nmol/L蟾蜍灵作用6,12,24及48 h,Bcl-2蛋白表达分别下调至作用前的88．6％,53．3％,19．2％及 9．5％,而Bax蛋白表达无明显变化,Bcl-2/Bax比值由2．0分别降至1．7,1．1,0．4及0．2。Survivin蛋白表达分别下调至作用前的75．2％,54．8％,37．5％及20．3％;Survivin mRNA表达在作用6,12和24 h 后分别下调至作用前的85．7％,39．4％和12．5％,在作用48 h后几乎检测不到。50．0 nmol/L蟾蜍灵作用12,24及48 h,线粒体部分的Smac/DIABLO蛋白表达分别下调至作用前的77．5％,21．2％及 15．3％,而胞浆部分的Smac/DIABLO蛋白表达分别上调至作用前的1．4,2．0．及3．5倍。蟾蜍灵作用 8-48 h可检测到caspase-3的活化亚基。结论蟾蜍灵诱导的HL-60细胞凋亡与Bcl-2及Survivin表达下调、线粒体释放Smac/DIABLO及caspase-3活化有关。
- 田昕罗颖刘云鹏侯科佐金波张敬东王甦
- 关键词：蟾蜍灵基因,BCL-2细胞凋亡
- 丝裂原激活蛋白激酶信号转导系统对维甲酸诱导NB4细胞分化的影响
- 2008年
- 本研究观察丝裂原活化蛋白激酶对全反式维甲酸(ATRA)诱导NB4细胞分化的影响并探讨其机制。采用MTT法测定细胞增殖活性,用流式细胞术分析细胞周期,NBT还原实验检测粒系分化,底物磷酸化法测定细胞外调节激酶(ERK)活性。结果显示:0.01-0.1μmol/L的ATRA呈时间和剂量依赖方式抑制NB4细胞增殖,并诱导NB4细胞向粒系分化;在这过程中ATRA激活ERK活性,ERK抑制剂PD98059能部分阻断ATRA的作用。p38MAPK的特异抑制剂SB203580与ATRA联合应用部分阻断了ATRA对细胞的生长抑制和诱导分化作用。结论:ATRA在诱导NB4细胞分化过程中激活ERK和P38MAPK途径,并且对该途径有依赖作用。
- 王甦刘云鹏侯科佐王妍罗颖
- 关键词：细胞外调节激酶NB4细胞
- 阿糖胞苷诱导HL-60细胞凋亡的分子机制探讨被引量：2
- 2008年
- 目的：探讨阿糖胞苷（Ara-C）诱导HL-60细胞凋亡的分子机制。方法：采用苔盼蓝拒染法检测细胞活力，MTF法测定细胞生长抑制率；形态学观察和流式细胞仪检测细胞凋亡；Western blot方法检测Bcl-2和caspase-3及其裂解片段的蛋白表达。结果：1～100斗M Ara-C以时间和剂量依赖方式抑制HL-60细胞增殖，诱导细胞凋亡，并下调Bcl-2蛋白表达，激活caspase-3。同时加入MEK抑制剂PD98059明显增加Ara-C的细胞毒作用和对caspase-3的激活作用，且这种作用可被P38MAPK抑制剂SB203580拮抗；PD98059和SB203580二者均未影响Ara-C对Bcl-2蛋白的下调作用。JNK抑制剂SP600125对Ara-C的上述作用无明显影响。结论：Ara-C以时间和剂量依赖方式抑制HL—60细胞增殖，并诱导细胞凋亡，同时下调Bcl-2蛋白表达，激活caspase-3；MEK抑制剂正性调节Ara-C的细胞毒作用，P38MAPK抑制剂负性调节Ara-c的细胞毒作用，二者可能是在caspase-3水平而未改变Bcl-2水平来发挥作用的。
- 王甦刘云鹏候科佐罗颖刘世洲王妍
- 关键词：MAPK阿糖胞苷BCL-2CASPASE-3凋亡
- EGFR信号通路调控结肠癌Caco-2细胞侵袭转移的分子机制被引量：14
- 2006年
- 目的探讨EGFR信号通路与人结肠癌Caco-2细胞增殖和侵袭转移的关系及其调控分子机制。方法采用MTT法和Boyden小室体外侵袭实验检测Caco-2细胞增殖和体外侵袭能力;采用RT-PCR方法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2基因转录水平;采用W estern b lot法检测P-EGFR和P-ERK蛋白表达。结果外源性EGF(10μg/L)增加P-EGFR和P-ERK蛋白表达同时使24 h细胞生长率提高了23.35%(P<0.01),使过膜细胞数由(208±3)上升到(241±5)(P<0.01)。当用AG1478(20μmol/L)和PD98059(40μmol/L)分别阻断EGFR和ERK/MAPK后,EGF作用消失,Caco-2细胞生长明显抑制(P<0.01),但无时间效应关系;Caco-2细胞体外侵袭力明显减弱(P<0.01)。RT-PCR测定显示,EGF能增加Caco-2细胞MMP-2、MMP-9 mRNA的表达和减少TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达;而AG1478能逆转EGF的作用,使MMP-2、MMP-9 mRNA的表达下降,TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达上升,结果MMP-2/TIMP-2比值和MMP-9/TIMP-1比值均下降(P<0.01)。结论EGFR-ERK/MAPK信号通路通过改变基质金属蛋白酶和其抑制剂mRNA比值调控人结肠癌细胞侵袭转移能力。
- 张晓晶王甦刘云鹏候科佐王舒宝
- 关键词：表皮生长因子受体基质金属蛋白酶
- 木黄酮对白血病K562细胞增殖的影响被引量：5
- 2004年
- 目的探讨木黄酮(genistein)抑制白血病K562细胞增殖的机制。方法用噻唑蓝染色法检测genistein对K562细胞增殖的抑制作用;用流式细胞仪进行细胞周期解析,通过细胞形态学观察细胞分裂;应用RTPCR方法检测白血病细胞WT1mRNA表达。结果Genistein浓度分别为2～30μg/ml作用K562细胞72h,细胞增殖呈浓度依赖性受抑,与对照组相比差异显著(P<0.01),IC50=11.4μg/ml;细胞周期解析发现,浓度为30μg/ml的genistein作用K562细胞12h,引起了明显的G2/M期阻滞,24h后G2/M期细胞增至93%;细胞分裂指数与对照组比没有明显差别;30μg/mlgenistein作用K562细胞24h,3h起WT1mRNA表达开始降低,24h时降至对照的30%。结论genistein抑制K562细胞增殖,诱导G2期或M早期阻滞及下调WT1的表达。
- 张敬东侯克佐罗颖刘世洲王甦刘云鹏
- 关键词：木黄酮白血病细胞周期基因
- 抑制细胞外信号调节激酶对As_2O_3诱导胃癌细胞系MGC-803凋亡的作用被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨细胞外信号调节激酶在三氧化二砷(As2O3)诱导胃癌细胞系MGC-803凋亡的信号转导途径中的作用。方法:采用MTT法检测As2O3对胃癌细胞系MGC-803的增殖抑制作用,采用瑞氏-姬姆萨染色和流式细胞仪检测As2O3诱导MGC-803凋亡以及加入选择性ERK抑制剂PD98059后细胞凋亡率的变化。结果:5μmol/L与10μmol/L的As2O3作用24h后凋亡率分别为(4.74±0.03)%和(11.93±0.06)%,而与PD98059联合作用24h后凋亡率分别增加至(11.65±0.09)%和(18.15±0.10)%,P<0.05。As2O3抑制MGC-803细胞的增殖,并诱导凋亡。结论:预先抑制ERK途径增加了As2O3诱导MGC-803细胞的凋亡效应。ERK途径可能参与了As2O3诱导胃癌细胞系MGC-803凋亡的信号转导途径。
- 叶薇侯柯佐刘云鹏王甦王晔李丹
- 关键词：细胞系
- 蟾蜍灵在诱导K562细胞凋亡过程中下调TOPO-Ⅱα蛋白表达被引量：8
- 2006年
- 目的探讨蟾蜍灵(bufalin)诱导K562细胞凋亡的分子机制。方法用流式细胞仪和形态学检测细胞凋亡;用免疫组化SP法检测TOPO-Ⅱα蛋白表达。结果蟾蜍灵在诱导K562细胞凋亡过程中,下调TOPO-Ⅱα蛋白表达;细胞外信号转导激酶抑制剂(extra-cellularsignal-regulatedkinase,ERK)PD98059能协同蟾蜍灵下调TOPO-Ⅱα蛋白表达;而四癸酰佛波酯(TPA)却拮抗蟾蜍灵的作用。结论蟾蜍灵诱导K562细胞凋亡可能与抑制ERK信号途径以及下调TOPO-Ⅱα蛋白表达有关。
- 王甦刘云鹏候科佐王晔叶薇
- 关键词：细胞系蟾蜍灵细胞凋亡
