王燕
- 作品数：47 被引量：211H指数：8
- 供职机构：南京市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：南京市医学科技发展项目江苏省卫生厅预防医学科研基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 携eGFP及表达人gp100-TCR基因的慢病毒表达载体的构建与鉴定
- 2011年
- 目的构建携eGFP的人gp100-TCR基因慢病毒表达载体。方法应用基因重组手段,从pGCsamgp100APB质粒上扩增出人gp100-TCR片段,将其插入到pLentiLox3.7(pLL3.7)慢病毒表达载体中,同时将其U6启动子替换为EF-1a启动子,形成慢病毒表达载体pLL3.7-gp100TCR-pEf-1a。将其与包装质粒混合,采用磷酸钙转染法转染293FT细胞,包装产生慢病毒,荧光显微镜观察GFP蛋白的表达水平。检测病毒滴度。结果 PCR、酶切及测序表明慢病毒表达载体pLL3.7-gp100TCR-pEf-1a构建成功。转染后的293FT细胞在荧光显微镜观察可见强绿色荧光,形成的慢病毒可感染293FT细胞,包装的慢病毒浓缩后滴度为4.5×106 TU/ml。结论成功构建eGFP和gp100-TCR共同表达的慢病毒表达载体,为gp100-TCR在肿瘤治疗中的功能研究提供了有效平台。
- 丁洁王燕
- 关键词：慢病毒表达载体绿色荧光蛋白
- HLA-A基因多态性与江苏地区汉族人群结核病易感性的研究
- 目的：对HLA-A等位基因与本地区结核发病的相关性进行初步分析研究。方法：一、研究对象结核组病人138例;对照组共100例。二、研究方法1、基因组DNA的提取;2、PCR-SSP反应;3、统计分析应用SPSS11.5.0...
- 王燕石利民王炜何敏许文炯陈晓蔚丁洁
- 关键词：结核病HLA-A基因基因多态性汉族人群易感性
- 文献传递
- 一起聚集性肺炎疫情病原的快速实验室诊断与分析被引量：4
- 2012年
- 目的:通过实验室病原学检测,结合流行病学史及临床表现,初步筛查疫情致病病原体。方法:采集患者咽拭子标本,分别采用荧光PCR方法检测甲型流感病毒、乙型流感病毒、肺炎支原体基因。结果:11份患者咽拭子中有4份标本荧光PCR扩增支原体基因阳性,1份为弱阳性。所有标本的甲、乙型流感荧光PCR扩增结果为阴性。同时采集与患者同班的3例无症状对照标本,3例标本的肺炎支原体DNA检测均为阴性。结论:实验室研究结果并结合此次疫情的流行病学和患儿的临床表现,初步判断可能是一起由肺炎支原体引起的聚集性支原体肺炎疫情。
- 石利民杜雪飞洪镭马涛王燕丁洁
- 关键词：聚集性肺炎肺炎支原体荧光PCR
- 酶联免疫斑点实验与蛋白芯片检测结核分枝杆菌免疫应答的研究被引量：1
- 2013年
- 目的:同时检测结核病人的细胞和体液免疫应答,初步探讨结核病人的免疫应答特点。方法:应用自行研制的酶联免疫斑点方法,联合结核分支杆菌蛋白芯片(阿拉伯甘露糖LAM、16 KD蛋白、38 KD蛋白、14 KD蛋白、9.7 KD蛋白和19 KD蛋白六种抗原)检测我市78例结核病患者的标本,进行相关统计学分析。结果:61例芯片阳性反应中,四种抗体阳性者比例最高,占34.43%(21/61),其中又以抗LAM+16KD+38KD+14KD+反应模式的比例较高。Epidot-ELISPOT在结核芯片各阳性组和结核芯片阴性组形成的SF-Cs中位数无显著性差异。78例结核病患者的Epidot-ELISPOT方法阳性率为62.82%(49/78),蛋白芯片法阳性率为78.21%(61/78),一致阳性率为44.87%(35/78)。结论:分泌γ-干扰素的T细胞反应程度与针对6种抗原的不同结核抗体反应模式间并无明显相关性。联合体液和细胞免疫检测可以进一步提高检测灵敏度。
- 许文炯王燕石利民崔红莲张荣奎史秋磊朱坤乔梦凯雍玮孙美艺丁洁
- 关键词：结核蛋白芯片
- 2012年南京市艾滋病筛查实验室质量考评结果分析被引量：9
- 2013年
- 目的:掌握目前南京市艾滋病筛查实验室HIV抗体检测工作质量、实验室管理水平,发现各实验室检测过程中可能存在的问题,促进其整体检测能力提高。方法:以卫生部《艾滋病检测工作技术规范》《南京地区艾滋病检测工作管理规范》为主要依据,通过发放质控品进行盲样考核和专家实验室现场督导相结合的方式对全市73家艾滋病筛查实验室进行考评。其中盲样考核包括检测结果的准确性以及实验的规范性,两部分各占25%;实验室现场督导占50%;结果总分100分。结果:73家艾滋病筛查实验室酶联法(ELISA)试验结果符合率均为100%,平均得分25分;实验的规范性平均得分为22.4分;实验室现场督导平均得分为49.3分。结论:南京艾滋病筛查实验室检测能力均较好,能够满足艾滋病筛查工作的需要。但是在实验过程中的规范化管理及实验室质量管理两方面均需进一步提高和完善。
- 董晓庆季建强王燕
- 关键词：艾滋病质量考评
- 南京市2012年-2013年肠道病毒71型分离株VP1基因特性分析被引量：3
- 2015年
- 目的了解南京地区肠道病毒71型流行株的遗传学背景。方法采集2012年-2013年手足口病患者咽拭子样本,经特异性逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）鉴定EV71病毒核酸阳性者进行细胞接种分离病毒。选取阳性分离株扩增其VP1完整编码区全长基因并进行序列测定,利用生物信息学软件对序列加以分析,构建序列遗传亲缘关系树。结果共分离得到14株EV71毒株,经VP1全长基因测序分析发现,所分离病毒VP1区核苷酸与EV71病毒A型代表株同源性为79.6%～81.3%,与B型代表株的同源性为81.7%～84.7%,而与C型代表株的同源性明显较高,为86.0%～95.2%,其中与C4代表株（AY895144）的同源性最高,为93.8%～95.2%。进化树分析发现本地流行株与上海、安徽等地区流行株的亲缘较近,而与台湾地区流行株亲缘较远。相应的氨基酸位点分析也表明符合C基因型的氨基酸模式。结论南京地区2012年-2013年肠道病毒71型的流行株主要为C4亚型,与上海和安徽地区流行株亲缘较近,可能具有同一来源。
- 乔梦凯雍玮石利民王璇王燕丁洁
- 关键词：肠道病毒71型手足口病基因型
- 南京市2015-2016年HIV抗体阳性人群中HBVHCV及梅毒感染情况被引量：2
- 2018年
- 艾滋病病毒（HIV）、丙型肝炎病毒（HCV）、乙型肝炎病毒（HBV）及梅毒传播途径相同,其中一种疾病的感染也会增加其他病原体的感染机会,而合并感染增加了疾病的复杂程度和治疗的难度。为了解本市HIV感染者合并感染情况,对2015-2016年南京市1 593例HIV感染者抗-HCV、乙肝表面抗原（HBsAg）、梅毒特异性抗体检测结果报告如下。
- 许文炯王燕董潇潇董晓庆吴咏梅张敏
- 关键词：乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒梅毒
- 重组聚合酶扩增技术(RPA)定量检测淋巴细胞中的HIV-1pol基因
- 2019年
- 目的建立一种方便快捷的重组聚合酶介导等温扩增技术定量检测HIV-1 DNA的方法。方法参考文献合成1对引物,选择内参基因,用标准品扩增结果绘制标准曲线,对HIV血清学确证阳性(HIV抗体阳性)样本的淋巴细胞总DNA进行检测。结果 HIV-1 DNA标准品在10^2~10^6拷贝线性关系良好,R=0. 99,HIV血清学确证阳性病人淋巴细胞检测结果均为HIV DNA阳性。结论本研究初步建立了内标法定量快速检测淋巴细胞中HIV-1 DNA的方法,为HIV感染检测提供一个新的方法。
- 王燕董晓庆董潇潇许文炯张洪英
- 关键词：HIV
- 应用分子血清分型技术鉴定抗原缺失沙门菌血清型被引量：1
- 2022年
- 目的 利用液相芯片技术和全基因组测序2种分子血清分型技术,对抗原缺失血清型沙门菌进行血清分型。方法 采用玻片凝集法对3株沙门菌进行分型;提取沙门菌基因组DNA,采用液相芯片技术进行血清型分型;然后全基因组测序后组装草图,用SISTR预测沙门菌血清型。结果 3株沙门菌分离株,用传统玻片凝集法鉴定属于B群和E1群沙门菌,未能继续分型,属于抗原缺失沙门菌。经液相芯片技术分型分析,3株分别为斯坦利沙门菌、鼠伤寒沙门菌和伦敦沙门菌,全基因组测序鉴定结果与液相芯片技术分析一致,3株沙门菌MLST分型预测依次为ST29、ST19和ST155型。结论 利用液相芯片技术和全基因组测序成功对3株抗原缺失血清型沙门菌进行血清型分型,且结果完全一致;可在有条件的机构应用于日常工作中沙门菌抗原缺失型菌株的血清分型分析。
- 刘品程婷婷龚红瑾王燕杜雪飞雍玮
- 关键词：沙门菌液相芯片技术全基因组测序
- 南京市2011-2014年度流感流行特征的分析被引量：7
- 2015年
- 目的：了解南京市2010-2014年流感流行趋势及病毒株变化,为流感防控提供科学依据。方法：对2010-2014年南京市3家流感哨点医院流感样病例用实时荧光定量PCR检测进行核酸检测,核酸阳性标本采用MDCK细胞进行病毒分离培养,对流感毒株型别、年龄段及性别分布等特征进行比较。结果：2010-2014年共采集流感样病例9823例。其中核酸阳性病例1277例,阳性率13.00%。其中A型各亚型共874例,B型各亚型共403例。男女阳性标本比例1.15∶1,两者阳性率比较差异无统计学意义（P〉0.05）。25岁~年龄段流感样病例数最高。结论：监测结果提示流感流行包括多种型别流感病毒交替和混合流行,不同年份不同季节呈现一种或多种不同优势株,每年基本有两个流行高峰,即冬春季和夏季高峰。
- 王燕石利民何敏王璇乔梦凯
- 关键词：流感病毒流感样病例
