王月颖
- 作品数：15 被引量：52H指数：4
- 供职机构：西北民族大学医学院更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金江苏省临床免疫学重点实验室基金甘肃省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- BTLA对T细胞活化的起始和早期阶段免疫应答的调节
- 目的：观察BTLA在T细胞上的表达并探讨其在各个阶段不同时相对T细胞活化的抑制.方法：分离人外周血单个核细胞,经阴性选择磁珠分离纯化获得T淋巴细胞.流式检测新鲜分离T细胞上BTLA、HVEM、LIGHT、CTLA-4和P...
- 王月颖张世杰邵毅蒋玉平顾宗江
- 人VSIG4基因转染细胞的构建及其对T细胞的共刺激效应的初步研究被引量：3
- 2009年
- 目的:分别构建含有人VSIG4基因两种不同变异体(VSIG4L和VSIG4S)的重组逆转录病毒载体,获得稳定表达VSIG4L和VSIG4S基因的L929细胞并初步研究其对T细胞的共刺激作用及可能机制。方法:从人肺cDNA文库中扩增出VSIG4L和VSIG4S的全长基因,并分别克隆入T载体中,再双酶切装入逆转录病毒载体pEGZ-Term中,与辅助病毒载体用脂质体法共转染包装细胞293T,以其培养上清感染L929细胞72小时后,经Zeocin筛选出稳定表达VSIG4L或VSIG4S分子的L929细胞株;采用RT-PCR和流式细胞仪分析VSIG4分子的表达,MTT和ELISA分别检测T细胞增殖及IL-2的分泌。结果:构建了含人VSIG4L基因和VSIG4S基因的重组逆转录病毒载体,并获得含有VSIG4L基因和VSIG4S基因的重组病毒,筛选获得能稳定高表达人VSIG4L和VSIG4S分子的L929转基因细胞;该转基因细胞具有体外抑制T细胞增殖、活化和IL-2分泌的作用。结论:构建了稳定表达人VSIG4L和VSIG4S膜型分子的细胞株,该分子两种不同变异体在体外均可抑制T细胞增殖和IL-2分泌。
- 张世杰王蕾王月颖蒋靓蒋玉平高超张学光顾宗江
- 关键词：逆转录病毒基因转染共刺激分子
- HVEM在人CD4^+CD25^+调节性T细胞上的表达及功能研究被引量：1
- 2009年
- 研究单纯疱疹病毒侵入介质(herpesvirus entry mediator,HVEM)在人CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)上的表达及对Treg功能的影响。分离人外周血单个核细胞,磁珠纯化获得T细胞及其不同亚群,流式细胞术检测Treg上HVEM的表达。Treg按不同比例分别与去除Treg的CD3^+T细胞、CD4^+CD25^-T细胞或CD8^+T细胞混合培养,加入抗HVEM抗体或同型对照抗体,并用CD3抗体单独或联合CD28抗体刺激T细胞,MTT法检测T细胞增殖。结果显示,Treg上HVEM表达量为90%～95%(n=15)。抗HVEM抗体组与对照组相比,降低了Treg对各类T细胞增殖的抑制作用(P<0.05),证明Treg表达的HVEM介导了其发挥抑制功能。
- 王月颖张世杰李道明陈曦邵毅张学光顾宗江
- 关键词：CD4+CD25+调节性T细胞HVEM免疫抑制
- 激发学习医学微生物学兴趣的方法探索与实践被引量：7
- 2018年
- 医学微生物学是联系基础与临床的重要桥梁课程。在教学中为激发学生学习兴趣,提高教学效果,在教学理念和方法等方面进行了一些有益的尝试。将讲授内容与常见人畜共患病及传染病疫情相联系、理论联系实际及现实生活、与其他基础学科和临床病例相融合等,提高学生对医学微生物学重要性的认识,激发学生的学习兴趣,调动了学生的积极性,增强了学生的实践技能和综合素质,取得了良好的教学效果。
- 董开忠王月颖胜利傅思武赵晋
- 关键词：医学微生物学教学方法
- BTLA信号对T细胞活化的起始和早期阶段的调节作用被引量：12
- 2010年
- 目的:观察BTLA分子在T细胞上的表达并探讨其在各个阶段不同时相对T细胞活化的抑制。方法:分离人外周血单个核细胞,经阴性选择磁珠分离纯化获得T淋巴细胞。检测T细胞上BTLA、CTLA-4和PD-1的表达;用CD3抗体刺激T细胞活化,比较BTLA、CTLA-4和PD-1在T细胞活化过程中的动态表达。CD3抗体联合CD28抗体活化T细胞,在不同的活化时间,MTT法检测BTLA单抗8H9对T细胞增殖的影响。GM-CSF和IL-4体外诱导单核细胞分化成未成熟DC,CD40抗体刺激DC成熟,流式检测HVEM在DC上的表达。用DC诱导T细胞活化,加入游离8H9或抗HVEM抗体,阻断HVEM和BTLA结合,MTT法检测T细胞增殖。结果:静止T细胞组成性高表达BTLA,不表达CTLA-4和PD-1分子。T细胞活化后,BTLA分子表达有所降低,然后迅速回升至高水平。CTLA-4、PD-1分子在活化后两天几乎不表达,第三天开始表达并逐渐上升。8H9可以抑制CD3和CD28抗体活化的T细胞增殖。CD3和CD28抗体预先活化T细胞24小时或48小时后,再加入8H9仍然具有抑制效应,但不如在T细胞活化之初加入8H9的抑制效应。单核细胞诱导的不成熟DC上高表达HVEM,当DC成熟后,HVEM表达降低。用游离8H9或HVEM抗体阻断DC表面HVEM与T细胞表面BTLA结合,48小时之内均明显增强了DC诱导的T细胞增殖。结论:BTLA信号可以提高T细胞的活化阈值,在T细胞活化的起始和早期阶段发挥重要的负性调控作用。
- 王月颖张世杰邵毅蒋玉平顾宗江
- 关键词：BTLAT细胞活化免疫调节
- 医学微生物学实验教学改革的体会被引量：2
- 2013年
- 医学微生物学是一门以科学实验为基础的学科,实验教学是培养学生理解能力、创新能力的重要环节,为提高实验教学质量,本文结合多年教学实践,仅就医学微生物学实验内容的改进谈点个人体会。
- 胜利慈彩虹殷祎隆米友军王月颖
- 关键词：医学微生物学教学
- 抗生素在养殖业中的应用现状被引量：17
- 2019年
- 目前,我国每年约一半的抗生素作为饲料添加剂被普遍使用于畜禽养殖业,抗生素具有防治疾病、促进生长、节约营养等作用。由于监管体系的不够完善,受利益驱使等原因,厂商和养殖户在抗生素的使用过程中存在盲目添加、滥用抗生素等一系列问题,进而引发细菌耐药性增加、危害人体健康、破坏环境生态及损害经济等影响。现就我国抗生素在养殖业中的应用现状进行分析并提出应对措施。
- 陈红英王月颖傅思武
- 关键词：抗生素畜禽养殖
- 人VSIG4-Fc融合蛋白的表达及其生物学活性的研究被引量：2
- 2009年
- 为获取人VSIG4-Fc融合蛋白,并研究其对T细胞的调节效应。首先采用PCR获取人VSIG4基因的胞外段序列及人IgG1Fc恒定区序列,将两者顺次连接插入逆转录病毒载体,以293T为包装细胞,制备含病毒颗粒的培养上清,反复感染CHO细胞,Zeocin筛选能稳定分泌VSIG4-Fc蛋白的基因转染细胞并以RT-PCR、Dot-blot及Western blot等鉴定。以MTT和ELISA分别检测VSIG4-Fc融合蛋白对T细胞增殖及IL-2分泌的影响。结果成功获取了CHO基因转染细胞,该细胞能稳定分泌VSIG4-Fc蛋白,纯化后的VSIG4-Fc蛋白能与T细胞表面未知受体结合,并具有体外抑制T细胞增殖、活化和IL-2分泌的作用。
- 张世杰王蕾王月颖李道明朱守兵蒋玉平蒋靓张学光顾宗江
- 关键词：逆转录病毒融合蛋白共刺激分子
- 两株鼠抗人VSIG4单克隆抗体的研制及其生物学特性的研究
- 2010年
- 目的:制备鼠抗人VSIG4分子单克隆抗体(mAb)及对其生物学特性进行鉴定。方法:以高表达膜型VSIG4分子的基因转染细胞L929/VSIG4L为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术,经流式细胞术检测和多次克隆化培养,筛选出特异分泌鼠抗人VSIG4分子的杂交瘤细胞株;采用间接免疫荧光法、Westernblot、竞争抑制试验及MTT增殖试验等对单抗的生物学特性进行鉴定。结果:获得2株持续、稳定分泌鼠抗人VSIG4mAb的杂交瘤细胞株,分别命名为9A7和9D5。对mAb生物学特性的研究结果表明,2株mAb均能识别巨噬细胞以及Jurkat、THP-1、H446等肿瘤细胞株表面的VSIG4分子。对T细胞增殖抑制的阻断实验显示,这2株抗体对VSIG4分子抑制T细胞增殖均有阻断作用。结论:成功地获得了2株鼠抗人VSIG4功能性mAb,为进一步研究VSIG4及其未知受体的生物学功能奠定了基础。
- 张世杰王蕾汪家敏陈曦蒋靓王月颖胡玉敏张学光顾宗江
- 关键词：杂交瘤单克隆抗体巨噬细胞
- 4-1BB信号拮抗肿瘤上清诱导的树突状细胞凋亡及其机制被引量：1
- 2009年
- 目的研究4-1BB信号对肿瘤上清诱导的小鼠骨髓来源树突状细胞(DCs)凋亡的拮抗作用及其机制。方法IL-4和GM-CSF诱导C57BL/6小鼠骨髓细胞,得到未成熟DCs,磁珠纯化。以抗4-1BB激发型抗体2A或CD40激发型抗体1c10刺激DCs,在不同条件下检测DCs的凋亡情况。以抗体标记NFκ-Bp65亚基,激光共聚焦显微镜检测抗4-1BB激发型抗体2A处理后DCs内NFκ-Bp65亚基向核内的转位情况。结果DCs上4-1BB信号的激发能拮抗由B-16肿瘤上清诱导的DCs凋亡,效果低于CD40信号,并能引起NFκ-Bp65亚基向核区转位。结论4-1BB信号的激发提高了DCs抵抗肿瘤上清诱导凋亡的能力,此作用通过包含NFκ-B通路的相关胞内信号传导途径实现。
- 陈曦蒋玉平王月颖周春刚张世杰张学光顾宗江
- 关键词：树突状细胞4-1BB凋亡NFΚ-B
