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猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备被引量：2: 2012年; 试验通过RT-PCR法扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)核衣壳蛋白(N蛋白)基因并克隆到原核表达载体pet-30a中,转入到BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达,使用SDS-PAGE和Western blotting分析表达产物的特性。利用Ni柱纯化该重组蛋白,采用NC膜皮下包埋法免疫Balb/C小鼠,取免疫后的脾细胞与SP2/0细胞进行融合后筛选杂交瘤细胞株,检测杂交瘤细胞株的特性并制备单克隆抗体。SDS-PAGE和Western blotting结果表明,该重组蛋白表达正确,约为20ku,能被抗PRRSV的阳性血清特异性识别。超声后用Ni柱纯化,经SDS-PAGE分析可得单一的目的条带。NC膜皮下包埋法免疫效果良好,通过细胞融合、ELISA筛选获得3株能稳定分泌抗PRRSV N蛋白抗体的杂交瘤细胞株(H7、F7、C8),制备出高特异性的针对N蛋白的H7单抗。IFA与Western blot-ting结果显示制备的单抗可与病毒N蛋白产生特异性反应。亚型鉴定为IgG2b型,染色体分析证实杂交瘤细胞染色体数目正确。结果成功实现了N蛋白的原核表达,并获得高特异性的单克隆抗体,为PRRSV N蛋白抗原的检测奠定基础。; 王晶王星星高飞苑嗣纯吴国娟; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白原核表达单克隆抗体

磺胺甲噁唑单克隆抗体试剂盒及检测方法: 本发明公开了一种检测磺胺甲噁唑的酶联免疫试剂盒及其检测方法。本发明所提供的检测磺胺甲噁唑的酶联免疫试剂盒，包括磺胺甲噁唑特异性单抗及包被的磺胺甲噁唑与载体蛋白的偶联物和酶标二抗。该单克隆抗体由杂交瘤细胞系(保藏号为CGM...; 吴国娟沈红张中文陆彦吴红军王彦英王星星郭玮; 文献传递

磺胺母核抗原合成及多克隆抗体的制备: 制备磺胺类药物母核结构的半抗原(H),通过免疫家兔得到多克隆抗体,为制备针对多种磺胺类药物的单抗和磺胺药检测免疫胶体金试纸条研制奠定基础。以对乙酰氨基苯磺酰氯(ASC)和对氨基苯甲酸甲酯(PABA)合成磺胺母核的半抗原H...; 郭玮裴兆柱王星星吴国娟; 关键词：磺胺类药物人工抗原多克隆抗体牛血清白蛋白卵清蛋白; 文献传递

免疫胶体金层析法检测动物性产品中磺胺类药物多残留: 【目的】以制备的磺胺类药物（SAs）母核结构（SH-BSA）为抗原,建立了动物性食品中磺胺类药物多残留检测的免疫胶体金检测方法（GICA）。【方法】采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,用胶体金标记磺胺类药物母核结构的单克隆抗...; 郭玮王星星裴兆柱吴国娟张中文沈红陆彦; 关键词：免疫胶体金法动物性食品磺胺类药物多残留; 文献传递

猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白刺激小鼠产生抗体的研究被引量：3: 2010年; 为比较传统免疫、脾内免疫、胶粒免疫和硝酸纤维素膜皮下包埋等4种方法制备的猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)核衣壳蛋白抗原免疫小鼠后刺激机体产生特异性抗体的水平,比较不同方法对于特定抗原刺激机体产生免疫应答的影响,筛选一种最有效的能够用于PRRSV核衣壳蛋白多克隆抗体和单克隆抗体制备的免疫方法。用PRRSV核衣壳蛋白作免疫原,分别用传统皮下免疫法、脾内免疫法、胶粒免疫和硝酸纤维素皮下包埋法免疫BABL/c小鼠,间接ELISA检测血清效价,用Western blotting检测其特异性。三免后,常规免疫小鼠血清效价为1.28×105,脾内免疫法为1.28×105,胶粒免疫为3.2×104,NC膜皮下包埋法为6.4×104。结果表明,4种免疫方法均获得了高滴度、高特异性的多克隆抗体,与传统免疫法相比,其他3种方法有其明显的优势,即节省抗原,其中脾内免疫法为优先选用的免疫方法,其免疫效果好,可节省大量抗原和时间。; 王星星张中文王晶郭玮赵剑利吴国娟; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白抗体硝酸纤维素膜

猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白的表达、纯化和单抗的制备: 【目的】:克隆PRRSV核衣壳蛋白（N蛋白）基因片段,表达并纯化N蛋白,制备高特异性的单克隆抗体,为PRRSV病毒感染的检测奠定基础。【方法】:在MARC-145细胞中繁殖病毒,蔗糖密度梯度离心法纯化病毒。利用RT-PC...; 王星星郭玮王晶王彦英张中文陆彦吴国娟; 关键词：PRRSV 核衣壳蛋白纯化; 文献传递

磺胺母核抗原合成及多克隆抗体的制备被引量：1: 2008年; 制备磺胺类药物母核结构的半抗原(H),通过免疫家兔得到多克隆抗体,为制备针对多种磺胺类药物的单抗和磺胺药检测免疫胶体金试纸条研制奠定基础。以对乙酰氨基苯磺酰氯(ASC)和对氨基苯甲酸甲酯(PA-BA)合成磺胺母核的半抗原(H);以牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)为载体,采用混合酸酐法,合成了免疫原H-BSA和包被原H-OVA通过紫外光谱定性证明偶联物偶联成功与否,以H-BSA免疫家兔,制备多克隆抗体,ELISA法对其特异性及效价进行检测。成功合成了磺胺母核人工抗原即免疫原H-BSA和包被原H-OVA,二者的蛋白浓度分别为8.46 mg/mL和10.53 mg/mL,结合比分别为13∶1和9∶1;制备的多克隆抗体特异性良好,血清效价为1∶256 000。; 郭玮裴兆柱王星星吴国娟; 关键词：磺胺类药物人工抗原多克隆抗体

磺胺母核抗原合成及多克隆抗体的制备: 制备磺胺类药物母核结构的半抗原(H),通过免疫家兔得到多克隆抗体,为制备针对多种磺胺类药物的单抗和磺胺药检测免疫胶体金试纸条研制奠定基础。以对乙酰氨基苯磺酰氯(ASC)和对氨基苯甲酸甲酯(PABA)合成磺胺母核的半抗原H...; 郭玮裴兆柱王星星吴国娟; 关键词：磺胺类药物人工抗原多克隆抗体; 文献传递

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王星星