王慧
- 作品数：8 被引量：17H指数：3
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金黑龙江省研究生创新科研项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 籽鹅卵泡颗粒细胞α-烯醇化酶基因RNA干扰表达质粒的构建及鉴定被引量：1
- 2014年
- 目的构建籽鹅卵泡颗粒细胞α-烯醇化酶(α-enolase,ENO1)基因RNA干扰表达质粒,并进行鉴定。方法利用RNAi Designer等网络在线RNA干扰设计软件设计3条可能会干扰籽鹅卵泡颗粒细胞ENO1基因表达的插入DNA序列:shRNA-ENO1-350、shRNA-ENO1-892、shRNA-ENO1-591,将体外合成的3条干扰序列分别与线性化的pGPU6/GFP/Neo载体连接,构建ENO1 RNA干扰表达质粒,在Lipofectamine 2000的介导下转染原代培养的籽鹅卵泡颗粒细胞,转染48 h后,荧光倒置显微镜下观察GFP的表达;实时荧光定量PCR和Western blot法检测转染细胞中ENO1基因mRNA的水平及蛋白的表达水平。结果 pGPU6/GFP/Neo-shDNA重组质粒经单酶切及测序证实构建正确;转染后48 h,转染重组质粒的颗粒细胞在荧光倒置显微镜下可见较强的绿色荧光,转染效率可达60%;与培养液组、转染试剂组和无关序列干扰组(shNC)相比,shRNA-ENO1-350组颗粒细胞中ENO1基因mRNA水平和蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),其他各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论成功构建了籽鹅卵泡颗粒细胞ENO1基因RNA干扰表达质粒,在原代培养的籽鹅卵泡颗粒细胞中,其表达量显著下降,为后续有关ENO1功能的研究奠定了基础。
- 张虹亮计红耿仁德薛琳琳杨焕民王建发司鸿飞王慧甘艺
- 关键词：RNA干扰颗粒细胞籽鹅
- H_2O_2诱导BRL-3A细胞模拟大鼠肝脏氧化应激损伤的研究被引量：10
- 2013年
- 动物冷暴露过程中,肝脏因发生氧化应激而受损。利用不同浓度过氧化氢(H2O2)作用BRL-3A细胞,根据细胞存活率确定500μmol/L H2O2作用细胞3h为施加条件,然后通过检测蛋白质羰基含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性,探讨在细胞水平上建立冷暴露大鼠肝脏损伤模型。结果显示,H2O2处理组细胞存活率下降,蛋白质羰基含量升高,SOD、GSH-Px和CAT活性均降低。与对照组相比,其存活率、细胞内蛋白质羰基含量和CAT活性,均差异极显著(P<0.01),细胞内SOD和GSH-Px活性,差异显著(P<0.05)。结果表明,500μmol/L H2O2作用于BRL-3A细胞可导致氧化应激的发生,其相关指标与大鼠冷暴露后肝脏受损指标改变趋势类似,利用BRL-3A细胞建立冷暴露引起的肝脏氧化损伤模型,为进一步探讨冷应激对肝脏损伤的机制奠定基础。
- 臧琳郭景茹郭爽王慧计红甄莉汪志杨焕民
- 关键词：过氧化氢冷暴露肝脏氧化应激
- 腺病毒介导hsp70过表达对H_2O_2诱导BRL细胞凋亡的保护作用研究
- <正>氧化应激损伤会导致肝细胞发生凋亡。Hsp70具有分子伴侣、抗氧化及抗凋亡等生物学功能,可提高细胞的应激耐受性,保护细胞免受氧化和凋亡损伤。基于此。本实验选用不同浓度H_2O_2作用BRL细胞,建立氧化凋亡损伤模型;...
- 王慧计红杨焕民甄丽孔凡志郭景茹郭丽
- 文献传递
- 兽用注射器
- 1.本外观设计产品的名称：兽用注射器。;2.本外观设计产品的用途：用于兽用医疗器具。;3.本外观设计产品的设计要点：在于形状。;4.最能表明设计要点的图片或照片：立体图1。;5.其他需要说明的情况：其他：标示A部分为透明...
- 刘静怡王慧郝畅崔洪郡孟令滢曹佳慧于浪潮苏杰唐金圣
- 过氧化氢诱导BRL细胞凋亡损伤模型的建立被引量：3
- 2015年
- 动物冷应激过程中肝脏因发生氧化应激而受损。本试验采用过氧化氢(H2O2)诱导buffalo大鼠肝细胞(BRL)凋亡,建立体外氧化应激的凋亡损伤模型,为深入研究冷应激对肝脏损伤的机理奠定基础。试验采用不同浓度H2O2刺激BRL细胞2h,运用WST-1法检测细胞生长活力、Annexin-V/FITC-PI双染技术检测细胞凋亡率及Western blot方法检测Caspase-3的表达量来筛选BRL细胞凋亡的H2O2作用浓度。结果显示,与空白对照组相比,150μmol/L H2O2作用后,细胞增殖率明显下降,Caspase-3的蛋白表达量增加,流式细胞仪检测的凋亡率升高,同时细胞坏死较其他H2O2处理组低。结果表明,150μmol/L H2O2作用BRL细胞2h可模拟氧化应激造成的凋亡损伤。
- 王慧计红薛琳琳耿仁德郭静茹王建发孔凡志杨焕民郭丽
- 关键词：过氧化氢氧化应激凋亡
- hsp70过表达对过氧化氢诱导BRL细胞凋亡及Bcl-2/Bax的影响
- 目的动物冷应激过程中肝脏因发生氧化应激而受损。hsp70是一种能提高机体应激耐受的蛋白,参与调控细胞应激、增殖和凋亡等生理过程。因此本实验研究腺病毒介导的hsp70对过氧化氢（H2O2）诱导buffulo大鼠肝细胞（BR...
- 王慧计红杨焕民
- 关键词：热休克蛋白70细胞凋亡BCL-2/BAX
- 腺病毒介导的hsp70过表达对H2O2诱导BRL细胞凋亡的保护作用研究
- 氧化应激损伤会导致肝细胞发生凋亡。Hsp70具有分子伴侣、抗氧化及抗凋亡等生物学功能，可提高细胞的应激耐受性，保护细胞免受氧化和凋亡损伤。基于此，本试验采用腺病毒感染的方法，观察Hsp70过表达对H2O2诱导BRL细胞（...
- 王慧
- 关键词：HSP70细胞凋亡凋亡相关蛋白氧化应激
- 文献传递
- 热休克蛋白70过表达对过氧化氢诱导BRL细胞caspase 3表达的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨热休克蛋白（heat shock protein,Hsp）70过表达对过氧化氢（hydrogen peroxide,H_2O_2）诱导Buffalo大鼠肝细胞（BRL细胞）cleaved caspase 3表达的影响。方法将BRL细胞分为6组：空白对照组、Ad-CMV-Null组、Ad-CMV-Hsp70组、H_2O_2组、Ad-CMV-Null＋H_2O_2组和Ad-CMV-Hsp70＋H_2O_2组,Ad-CMV-Null、Ad-CMV-Hsp70、AdCMV-Null＋H_2O_2、Ad-CMV-Hsp70＋H_2O_2组分别加入1×10~7 PFU/ml的Ad-CMV-Null或Ad-CMV-Hsp70培养48 h后,H_2O_2、Ad-CMV-Null＋H_2O_2和Ad-CMV-Hsp70＋H_2O_2组分别加入150μmol/L H_2O_2处理2 h,空白对照、Ad-CMVNull和Ad-CMV-Hsp70组分别加入培养液培养。分别采用实时荧光定量PCR检测细胞中Hsp70基因mRNA的转录水平,Western blot法检测细胞中Hsp70及cleaved caspase 3蛋白的表达水平。结果与H_2O_2组相比,Ad-CMVHsp70＋H_2O_2组细胞中Hsp70基因mRNA的转录水平和蛋白表达水平均显著升高（P〈0.01）,cleaved caspase 3蛋白表达水平显著下降（P〈0.01）。结论Hsp70可抑制caspase 3的激活最终保护BRL细胞,减少凋亡损伤。
- 计红张伟宏连帅王慧马莉李悦郭景茹郭文晋李士泽杨焕民
- 关键词：热休克蛋白70CASPASE过氧化氢
