王小刚
- 作品数：10 被引量：4H指数：1
- 供职机构：中国科学院沈阳应用生态研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 利用定点突变技术对金黄色葡萄球菌肠毒素C2中二硫环功能的分析
- 作为一种超抗原,金黄色葡萄球菌肠毒素 C2(SEC2)可以与 T 细胞受体(TCR)Vβ区和主要组织相容性复合体二类分子(MHCII)结合,并激活大量 T 细胞。先前的对 SEC2晶体结构研究表明,
- 王小刚徐明恺张惠文刘杰苏振成张成刚
- 文献传递
- 产SEB金黄色葡萄球菌α-溶血毒素基因缺失菌株的构建
- 2007年
- 构建产肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)的金黄色葡萄球菌α-溶血毒素(α-hemolysin,α-HL)缺失菌株。首先构建用于α-HL基因敲除的同源重组质粒pMHL-α,经金黄色葡萄球菌RN4220修饰后再通过原生质体转入金黄色葡萄球菌SM-01。含重组质粒pMHL-α的金黄色葡萄球菌SM-01在42℃诱导条件下培养多代,最终筛选出α-溶血毒素基因缺失菌株。经序列分析和血平板溶血实验结果证明最终获得产SEB金黄色葡萄球菌α-HL缺失菌株。为野生型金黄色葡萄球菌的体内遗传操作及构建产超抗原药物金黄色葡萄球菌基因工程菌株提供了一定的理论基础和方法。
- 王小刚张惠文苏振成徐明恺罗永平张成刚
- 关键词：金黄色葡萄球菌同源重组肠毒素B
- 一种超抗原活性增强的SEC2突变基因及其制备方法
- 本发明涉及基因工程技术，具体说是一种超抗原活性增强的SEC2突变基因及其制备方法。具体为具有序列表SEQ ID NO：1中的碱基序列并具有序列表SEQ ID NO：2中的氨基酸序列。本发明利用基因定点突变技术，首次构建了...
- 王小刚张惠文徐明恺张成刚
- 文献传递
- 融合免疫毒素B－L－Vpr基因及克隆和异源表达方法
- 本发明涉及基因工程领域，具体的说是一种融合免疫毒素B－L－Vpr基因及克隆和异源表达方法。具有序列表SEQ ID No：1中碱基序列，同时融合免疫毒素B－L－Vpr基因所编码的蛋白具有SEQ ID No：2中氨基酸序列。...
- 徐明恺张惠文张成刚王小刚
- 文献传递
- 一种超抗原活性增强的SEC2突变基因及其制备方法
- 本发明涉及基因工程技术，具体说是一种超抗原活性增强的SEC2突变基因及其制备方法。具体为具有序列表SEQ ID NO：1中的碱基序列并具有序列表SEQ ID NO：2中的氨基酸序列。本发明利用基因定点突变技术，首次构建了...
- 王小刚张惠文徐明恺张成刚
- 文献传递
- 抗菌肽CP10A在大肠杆菌中的融合表达被引量：4
- 2008年
- CP10A是一种由抗菌肽Indolicine经过序列改造,且对多数革兰氏阳性病源细菌具有较强抗菌活性的多肽序列。研究根据已报道的CP10A氨基酸序列,兼顾大肠杆菌密码子偏好性,设计CP10A的核苷酸序列,利用PCR技术合成相应的DNA序列,后克隆构建重组表达载体pET32a(+)-CP10A,转入大肠杆菌AD494菌株。经IPTG诱导表达和15%SDS-PAGE电泳检测后发现产物以包涵体形式存在,且融合表达量占总蛋白的50%。在变性条件下经Ni-NTA亲合柱层析及复性,最终获得了较高纯度的可溶性重组蛋白。研究首次实现了CP10A抗菌肽在大肠杆菌中的融合表达,为进一步研究其生物学活性及应用奠定了一定的基础,同时也为研究抗菌肽表达提供了一种方法。
- 罗永平张惠文王小刚徐明恺苏振成张成刚
- 关键词：克隆大肠杆菌纯化
- 肠毒素C2超抗原突变蛋白基因的克隆和异源表达方法
- 本发明涉及基因工程技术，具体说是肠毒素C2超抗原突变蛋白基因及克隆表达和制备方法。具体为具有序列表SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQID NO：3和SEQ IDNO：4中碱基序列。本发明基因的异源表达...
- 张成刚王小刚徐明恺张惠文苏振成
- 文献传递
- 一种抗菌肽基因及其制备方法和该基因在毕赤酵母载体中的表达质粒的构建
- 本发明涉及生物技术领域，具体是一种抗菌肽基因及其制备方法和该基因在毕赤酵母载体中的表达质粒的构建。具体抗菌肽基因序列为序列前端加Kex2蛋白酶切割位点，后面加终止密码子TAA，两端有EcoR I和Xba I酶切位点，如S...
- 张惠文罗永平王小刚苏振成张成刚
- 文献传递
- 一种肠毒素C2蛋白的制备方法
- 本发明涉及基因工程技术，具体说是一种肠毒素C2蛋白的制备方法。具体为：(1)以金黄色葡萄球菌基因组作为模板，采用分别带有Nco I和XhoI酶切位点及5’端保护碱基为引物，按照常规PCR扩增编码金黄色葡萄球菌肠毒素的基因...
- 徐明恺张惠文张成刚王小刚
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌肠毒素C2的结构特征与生物学功能研究
- 通过PCR技术对Staphylococcal enterotoxin C2(SEC2)的氨基端和羧基端部位进行删除突变。研究结果显示删除羧基端77个氨基酸对SEC2超抗原和致热活性没有显著影响，但更进一步的删除导致SEC...
- 王小刚
- 关键词：金黄色葡萄球菌结构特征生物学功能
