王剑波
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：河北联合大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项河北省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 二氧化硅诱导的肺纤维化大鼠肺组织及血浆中热休克蛋白70的变化被引量：1
- 2012年
- 目的探讨热休克蛋白70（heat shock protein70，Hsp70）在二氧化硅诱导的大鼠肺纤维化过程中的变化。方法48只Wistar大鼠随机分成对照组和染尘组，每组24只，分别观察7、14、21、28d。染尘组经气管内灌注二氧化硅（50mg／ml），对照组予等剂量的生理盐水。HE染色观察病理学变化，蛋白免疫印迹（Western bolt）法和免疫组织化学法检测肺组织中Hsp70的表达与定位，双抗夹心ELISA检测血浆中Hsp70含量的变化。结果染尘组染尘后7d肺组织中Hsp70含量升高，14d达到高峰，随后降低，但仍高于正常对照。染尘组14、21、28d时血浆中Hsp70含量明显高于生理盐水对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。染尘组血浆中Hsp70含量21d达到峰值[（0．216±0．027）μg/ml]。结论在染尘组大鼠肺组织和血浆中Hsp70含量均明显升高，并随肺纤维化进程出现先升高后降低的趋势，提示肺组织中Hsp70在二氧化硅诱导的肺纤维化过程中有重要的生物学作用。
- 王剑波索炜战锐冷雪闫海波姚林钱令嘉
- 关键词：矽肺肺纤维化热休克蛋白质类70
- 人甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT)表达及抗体制备被引量：2
- 2011年
- 目的重组表达及纯化人甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(betaine-homocysteine methyltransferase,BHMT)蛋白,制备BHMT多克隆抗体并对其性质进行研究。方法 TRizol法提取人HepG2细胞总RNA,RT-PCR获得BHMT基因,经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切,构建重组表达载体pET-28a-BHMT,经0.5 mmol/L IPTG诱导表达,表达产物通过Ni柱亲和纯化获得重组蛋白;以重组BHMT蛋白免疫兔,获得兔多克隆抗体,并对抗体进行纯化,应用Western印迹方法分析其识别人天然BHMT蛋白的能力。结果经测序证明,RT-PCR得到的人BHMT基因与Gen-Bank中人的BHMT基因完全一致;构建的BHMT原核表达载体可稳定地表达可溶性人BHMT蛋白;重组BHMT蛋白免疫兔后,兔血清抗体纯化获得高纯度BHMT抗体,此抗体可以特异性地识别人肝癌组织中的天然BHMT蛋白。结论成功重组表达并纯化人BHMT蛋白,所获得的BHMT多克隆抗体可以应用于人BHMT蛋白的检测,为研究BHMT在高同型半胱氨酸血症中的作用机制奠定基础。
- 冷雪王剑波杲修杰弓景波赵云武磊战锐王新兴刘晓华钱令嘉
- 关键词：克隆免疫印迹
