王丽丽
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
- 供职机构：遵义医学院附属医院更多>>
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- 蓝光致人RPE细胞分泌VEGF及PEDF变化及与Ca2＋-PKC信号通路的关系被引量：8
- 2015年
- 目的 探讨蓝光照射致体外培养人RPE细胞分泌VEGF、色素上皮衍生因子（PEDF）、RPE细胞内三磷酸肌醇（IP3）和二酰甘油（DAG）的浓度变化,分析Ca2＋-蛋白激酶C（PKC）信号通路之间的相互作用.方法 实验研究.将体外培养的第4代人RPE细胞随机分为6个组,A组：无光照组;B组：蓝光光照组;C组：蓝光光照＋PKC激动剂佛波酯（PMA）组;D组：蓝光光照＋PKC抑制剂钙磷酸结合蛋白（Calphostin C）组;E组：蓝光光照＋硝苯地平组;F组：蓝光光照＋钙磷酸结合蛋白组＋硝苯地平组.用（2 000±500）lux蓝光照射体外培养人RPE细胞6h,终止培养24 h,采用ELISA测定各组RPE细胞分泌VEGF、PEDF、RPE细胞内IP3和DAG的浓度,采用流式细胞仪检测A、B及F组细胞的凋亡率.结果 A～E组的VEGF浓度分别为（584.38± 10.66）、（700.70±5.88）、（698.21±6.66）、（623.87±3.12）、（648.30±4.91） ng/L.其中B、C、E组的VEGF浓度高于A组,差异有统计学意义（P=O.002,0.002,0.016）.A～E组的PEDF浓度分别为（75.96±1.70）、（71.82±1.67）、（72.43±0.58）、（86.31＋1.35）、（93.716±1.24） μg/L.其中B、C组PEDF浓度低于A组（P=0.004,0.011）.B组和C组的VEGF/PEDF比值显著高于A组（P=0.008,0.027）,E组和D组的VEGF/PEDF比值低于B组（P=0.016,0.015）.A～E组的IP3浓度分别为（9 108.42±0.74）、（117.23±1.05）、（137.12±2.70）、（139.17±1.39）、（149.60±0.76） μg/L.B、C、D、E组IP3浓度均高于A组（P=0.003,0.007,0.000,0.000）,并且C、D、E组IP3浓度均高于B组（P=0.011,0.000,0.000）.A～E组的DAG浓度分别为（995.47±13.61）、（1070.10±10.07）、（1046.39±7.90）、（1041.12±9.76）、（1273.13±10.89） pmol/L.B、C、D、E组DAG浓度均高于A组（P=0.000,0.000,0.000,0.000）,与B组比较,组DAG的浓度增高（P=0.000）,而C、D组DAG浓度降低（P=0.021,0.007）.A、B和F组的细胞凋亡率分别是（10.26±1.87）％、（25.06±2.66）％和�
- 汪利敏蔡善君武志鹏宫鑫吕建平宿罡王丽丽
- 关键词：光刺激视网膜色素上皮血管内皮生长因子A
- 蓝光照射对人视网膜色素上皮细胞钙离子-蛋白激酶C信号通路的影响被引量：2
- 2014年
- 目的 观察蓝光照射对人视网膜色素上皮细胞钙离子（Ca2-）-蛋白激酶C（PKC）信号通路的影响.方法 体外培养并鉴定人视网膜色素上皮（RPE）细胞,取第4代人RPE细胞随机分组进行实验.采用蛋白免疫印迹法测定培养细胞PKC蛋白表达,检测佛波酯（PMA）和钙磷酸结合蛋白（calphostin C）对PKC活性的影响,确定PMA与calphostin C影响PKC活性的最适宜浓度.采用非放射性核素法测定蓝光照射处理对培养细胞PKC活性的影响.采用20 W,波长450～500 nm医用蓝光灯作为光源,光照强度（2000±500） Lux,照射6h,24 h后终止培养,以此制造体外培养人RPE细胞光损伤.将培养细胞随机分成5个组,即无光照、单纯光照、光照联合硝苯地平、光照联合calphostin C、光照联合PMA组.其中,无光照组不接受光照;单纯光照组仅接受光照;光照联合硝苯地平组接受光照和0.1 mmol/L的硝苯地平;光照联合calphostin C组接受光照和100.0 nmol/L的calphostin C;光照联合PMA组接受光照和100.0 nmol/L的PMA.用乙酰氧基甲基酯Ca2＋荧光探针标记各组培养细胞,激光扫描共焦显微镜测定各组细胞内Ca2＋浓度.比较各组细胞内Ca2＋浓度差异.结果 经鉴定,体外培养人RPE细胞成功.100.0、200.0 nmol/L PMA处理的RPE细胞中PKC蛋白相对表达量高于0.1、1.0、10.0、50.0 nmol/L PMA处理的RPE细胞,差异有统计学意义（F=217.537,P＜0.05）,但100.0、200.0 nmol/L PMA处理组间PKC蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义（P=0.072）.100.0、200.0 nmol/L calphostin C处理的RPE细胞中PKC蛋白相对表达量低于5.0、25.0、50.0、75.0 nmol/L calphostin C处理的RPE细胞,差异有统计学意义（F=164.543,P＜0.05）,但100.0、200.0 nmol/L calphostin C处理组间PKC蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义（P=0.385）.蓝光照射处理后,RPE细胞的PKC活性显著升高,与未接受蓝光照射处理的RPE细胞的PKC活性比较,差异有统计学意义（t=-
- 武志鹏蔡善君吕建平李海辉宫鑫宿罡汪利敏王丽丽
- 关键词：眼损伤病理生理学视网膜色素上皮光刺激
