焦雪
- 作品数:14 被引量:10H指数:2
- 供职机构:中国医科大学附属第四医院更多>>
- 发文基金:辽宁省自然科学基金国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- B7-H1基因沉默对结肠癌细胞生长的抑制作用和对CIK细胞杀伤活性的影响
- 曾雪王士勇刘畅刘艳萍张晖杜微丽张哲王佳玲武秀艳何英张璐焦雪
- 晚期肿瘤患者外周血中髓源性抑制细胞比例及其临床意义
- 目的:了解晚期肿瘤病人外周血髓源性抑制细胞(MDSC)比例与肿瘤患者病情及治疗的相互关系.方法:收集20例TNM分期Ⅲ-Ⅳ期晚期肿瘤患者的临床资料,抽取病人外周血,并抽取性别和年龄相匹配的20例健康人外周血作为对照.分离...
- 马克驥王士勇焦雪刘畅黄文越何英张晖杜微丽张哲王佳玲武秀艳梁春艳
- 抗原致敏的DC-CIK对前列腺癌细胞DU145杀伤的作用被引量:7
- 2012年
- 目的探讨抗原致敏的DC与CIK细胞共同培养后获得的DC-CIK细胞(Ag-DC-CIK)对前列腺癌细胞株DU145的杀伤作用。方法分离健康志愿者外周血单个核细胞,贴壁细胞以GM-CSF、IL-4及TNF-α诱导并加入DU145全细胞冻融抗原培养抗原致敏的DC,非贴壁细胞以IL-2、IL-1α、IFN-γ和mAb诱导培养CIK细胞,并将两种细胞共同培养6d获得Ag-DC-CIK;每隔2天计数细胞;流式细胞术检测细胞免疫表型;以共培养6d的Ag-DC-CIK作为效应细胞,以相同天数未致敏的DC-CIK和CIK细胞为对照组,DU145细胞作为靶细胞,采用MTT法分析各组杀瘤率。结果外周血单核细胞成功诱导DC,Ag-DC-CIK细胞培养6d的扩增倍数为CIK的1.69-2.56倍(P<0.05)。CIK组、DC-CIK组及Ag-DC-CIK组中CD3+CD56+细胞所占百分比分别为(19.15±1.55)%,(28.43±1.51)%和(39.12±2.29)%,依次升高(P<0.01),对前列腺癌DU-145细胞24h杀瘤率分别为(26.39±4.47)%,(46.82±5.68)%,(62.80±2.01)%,依次升高(P<0.01)。结论 Ag-DC-CIK细胞增殖活性强,对前列腺癌DU-145细胞有明显杀伤作用,强于未致敏DC-CIK细胞和CIK细胞。
- 刘畅王士勇焦雪刘迪杰黄文越马克骥王佳玲
- 关键词:前列腺癌过继性细胞免疫治疗
- 小鼠肝癌细胞肺高转移株的建立及鉴定
- 2011年
- 目的:建立小鼠肝癌细胞肺高转移株,为研究转移相关分子机制提供合适的模型.方法:将H22肝癌腹水瘤细胞(简称M0)经尾静脉注入昆明小鼠,获取肺转移结节,再制备腹水瘤、尾静脉注射、形成肺转移瘤.重复操作获得第4代肺高转移株(简称M4),检测其小鼠肺转移能力和体外增殖能力、细胞分裂指数、染色体形态及细胞周期比例,并用RT-PCR方法测定RhoC基因mRNA的表达来进一步加以验证.结果:经尾静脉注射,M4较早出现肺转移,肺转移结节数多、体积大.M4与M0体外结果比较:倍增时间缩短了38.73%;细胞分裂指数是4.11%±0.11%,明显多于M0的4.70%±0.19%(P=0.014);S期比例是56.10±4.76%,明显高于M0的46.98±4.49%(P=0.022);二者染色体数目相同,但M4异型性明显;RhoC基因表达分别是1.011±0.163和0.486±0.045,M4的表达显著增高(P=0.0029).结论:建立了小鼠肝癌细胞肺高转移细胞株,其RhoC基因表达明显上调.
- 王士勇张璐张晖杜微丽张哲王佳玲武秀艳何英曾雪刘畅焦雪
- 关键词:肝癌肺转移小鼠细胞株RHOC
- 仙客来皂苷对肝癌细胞体外增殖和凋亡的选择性作用及其机制
- 2019年
- 目的:探讨紫金牛科植物紫金牛仙客来皂苷对肝癌细胞体外增殖和凋亡的选择性作用,并阐明作用靶点及其相关机制。方法:按照不同处理方式将人肝癌细胞HepG2或人正常肝细胞HL-7702分为仙客来皂苷组(加入0、2.5、5.0和10.0μmol·L^(-1)仙客来皂苷)、胆固醇干预组(仙客来皂苷+20.0mg·L^(-1)胆固醇)和对照组(0.5%DMSO),MTT法检测各组细胞存活率,Filipin标记法检测细胞中胆固醇水平,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测细胞LDH释放水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞中Fas、FADD和caspase-8蛋白表达情况。结果:5.0和10.0μmol·L^(-1)仙客来皂苷组HepG2细胞存活率明显低于HL-7702细胞(P<0.05)。Filipin标记后HepG2细胞中胆固醇水平明显高于HL-7702细胞(P<0.05)。仙客来皂苷组HepG2细胞LDH释放水平高于HL-7702细胞(P<0.05)。与5.0μmol·L^(-1)仙客来皂苷组比较,胆固醇干预组(5.0μmol·L^(-1)仙客来皂苷+20.0mg·L^(-1)胆固醇)LDH释放水平和细胞凋亡率均明显降低(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,仙客来皂苷组HepG2细胞中Fas和PADD蛋白和caspase-8蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与仙客来皂苷组比较,胆固醇干预组HepG2细胞中Fas、FADD和caspase-8蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:仙客来皂苷对肝癌细胞有选择性增殖抑制作用,其分子机制可能与通过肝癌细胞膜上胆固醇成分改变细胞膜通透性、进而以配体非依赖的方式激活凋亡相关Fas信号通路有关。
- 于涛焦雪付长峰李嵚
- 关键词:肝肿瘤胆固醇
- 人PDCD5基因重组慢病毒载体构建及其在肿瘤细胞中的表达
- 王士勇曾雪刘艳萍梁春艳张晖杜微丽刘畅焦雪张哲何英王佳玲武秀艳张璐
- 小鼠肝癌细胞肺高转移株的建立及其初步鉴定
- 目的:建立小鼠肝癌细胞肺高转移株,为研究转移相关分子机制提供合适的模型.方法:将H22肝癌腹水瘤细胞(简称M0)经尾静脉注入昆明小鼠,获取肺转移结节,再制备腹水瘤、尾静脉注射、形成肺转移瘤.重复操作获得第4代肺高转移株(...
- 张璐王士勇张晖杜微丽张哲王佳玲武秀艳何英曾雪刘畅焦雪
- 长期培养的CIK细胞hTERT基因表达水平的动态变化被引量:1
- 2012年
- 目的:初步探讨长期培养的CIK细胞hTERT基因表达水平的变化,进一步评价CIK细胞治疗的安全性。方法:抽取3名健康人外周静脉血进行CIK细胞培养,每周台盼蓝染色计数细胞,实时荧光定量PCR法检测培养第0、2、7、21及42天的CIK细胞hTERT基因的表达水平,流式细胞仪分析培养第0、7、14、28、49及56天的CIK细胞周期的改变并检测凋亡,MTT法测定培养第14、30天的CIK细胞对肺癌LTE细胞系的细胞毒活性。结果:CIK细胞在体外培养第28天至第35天细胞增殖达高峰,与第0天相比扩增约6.7至15.95倍,此后存活细胞逐渐减少,最终约60天左右细胞全部死亡,与流式细胞仪检测细胞凋亡结果一致。hTERT表达水平在培养48小时最高,较第0天增加约(2.84±1.27)倍,随后随培养时间延长表达水平下降,在培养1周时降至培养初始水平,并在此后的培养过程中维持低水平表达。在CIK培养1周时处于S期细胞比例最高,约(41.27±4.57)%,随培养时间延长G0/G1期细胞比例占绝大部分,在培养第49天G0/G1期细胞比例在90%以上[(97.56±1.17)%];CIK细胞在第14天杀瘤活性约(58.58±8.52)%,在30天时杀瘤活性明显下降,约(32.47±7.51)%。结论:长期培养的CIK细胞随培养时间延长hTERT表达水平下降,未见细胞永生化倾向。
- 武秀艳王士勇焦雪刘畅刘迪杰王佳玲黄文越张晖何英杜微丽梁春艳张璐
- 关键词:HTERT基因CIK细胞细胞凋亡
- 进展期NSCLC患者MDSCs比例明显增高且随着化疗呈动态改变
- 目的:研究外周血MDSCs(CD11b+CD14-CD33+cells)与肿瘤分期、转移、免疫功能及化疗的相互关系.方法:测定了初治的94例NSCLC患者和30例健康对照外周血MDSCs和淋巴细胞亚群比例,并检测了系统化...
- 王士勇符一宁马克骥刘畅焦雪杜微丽张晖张哲武秀艳王佳玲张璐刘殊何英梁春艳
- 化疗药物对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)的影响
- 2014年
- 探讨化疗药物及地塞米松对CIK细胞增殖活性及淋巴细胞亚群的影响。分别选取不同浓度顺铂、氟尿嘧啶、紫杉醇和地塞米松与不同诱导天数的CIK细胞共培养,在加入或不加入IL-2的情况下,采用MTT法检测各种药物对CIK细胞增殖活性的影响,流式细胞术检测CIK细胞中各亚群的比例。顺铂、氟尿嘧啶、紫杉醇及地塞米松均在一定程度上抑制CIK细胞的增殖活性,其中顺铂和紫杉醇表现出明显的剂量依赖性(P<0.05);IL-2可对CIK细胞产生保护作用,在一定程度上降低化疗药物对CIK细胞的抑制作用(P<0.05)。顺铂主要降低CD3+CD56+亚群比例(P<0.05),对CD3+CD4+、CD3+CD8+亚群比例无显著影响(P>0.05)。
- 焦雪王士勇刘畅刘迪杰单风平
- 关键词:化疗药物MTT淋巴细胞亚群