沈琴芳
- 作品数：25 被引量：111H指数：6
- 供职机构：杭州市余杭区畜牧兽医局更多>>
- 发文基金：浙江省科技计划项目宁波市科技计划项目贵州省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学自动化与计算机技术更多>>
- 一种跨膜输出蛋白基因选择克隆T载体及其应用
- 本发明公开了一种跨膜输出蛋白基因选择克隆T载体及其应用。T载体，通过如下方法构建：将阿拉伯糖启动子插入pMBL载体中β-内酰胺酶基因的上游，得到重组克隆载体；在所述重组克隆载体的β-内酰胺酶基因与启动子之间引入两个Xcm...
- 余旭平朱军莉刘江梅牛冬沈琴芳姚学萍袁佳杰谭双
- 文献传递
- 番鸭呼肠孤病毒ZJ99株σC基因在甲醇酵母中的表达被引量：3
- 2006年
- 将番鸭呼肠孤病毒ZJ99株σC基因插入到酵母表达载体pPIC9K内,转化大肠杆菌TG1,挑取阳性克隆,获得酵母表达重组质粒pPIC9K-σC。用DraⅠ酶切线性化重组表达质粒pPIC9K-σC和对照质粒pPIC9K,电转化至甲醇酵母GS115感受态细胞内,经G418抗性筛选和PCR鉴定,获得了2株pPIC9K-σC酵母阳性整合子和2株pPIC9K空载体对照酵母阳性整合子。分别挑取1株进行甲醇诱导表达,SDS-PAGE检测发现pPIC9K-σC酵母整合子在不同时段的诱导表达上清液中均有可见的目的蛋白条带,分子质量与预计大小相符,而对照pPIC9K酵母整合子的诱导表达上清液中没有相应的蛋白条带。说明番鸭呼肠孤病毒ZJ99株σC基因真核甲醇酵母表达体系构建成功,目的σC蛋白在酵母中能够有效地分泌表达。
- 余旭平刘慧芳何世成郑新添沈琴芳张秀亮刘江梅
- 关键词：番鸭呼肠孤病毒甲醇酵母
- 犬瘟热病毒Guizhou株血凝素基因的克隆及序列分析被引量：12
- 2006年
- 参照已发表的文献合成1对引物，以犬瘟热病毒Guizhou分离株感染Vero细胞收获病毒提取的RNA为模板，RT-PCR扩增获得血凝素蛋白基因（H）901～1661位大小为761bp的片段，并将PCR扩增产物进行克隆和测序。将Guizhou株与GenBank数据库中的31株CDV及国内NanjingOP株的H基因序列进行同源性和系统发生树分析，发现Guizhou株的H基因部分序列与疫苗毒株Convac和Onderstpoort的同源性最低，只有90％；与日本野毒株Tanu96、KDK-1、Hmanatsu、Yanaka、UENO的同源性较高，为96％～98％；且与国内从大熊猫和小熊猫分离的野毒株GP和LP的同源性也较高，为98％和96％。系统发生树分析显示，Guizhou株与国内野毒株GP和LP，及日本的5个野毒株应属同一类，其中和GP株基因型最近，推测这些毒株间有更近的共同祖先。因此怀疑该病毒较适应于野生动物，且在我国某些地区的野生动物中可能存在自然疫源性传播。
- 朱军莉余旭平张登祥沈琴芳徐在平李永明周碧君吴彤
- 关键词：犬瘟热病毒H基因同源性
- 禽流感病毒亚型多重RT-PCR检测方法的建立
- 禽流感是一种主要感染禽类的烈性传染病,能引起巨大的经济损失,该病也能传染人.基于禽流感病毒高致病性、强变异的特点,本文拟通过特异性的扩增核蛋白基因,鉴定A型流感病毒的存在,在此基础上,进行HA全基因序列的RT-PCR扩增...
- 余旭平沈琴芳张雷何世成 王秀荣
- 关键词：禽流感病毒RT-PCR
- 文献传递网络资源链接
- 多杀性巴氏杆菌跨膜输出蛋白基因选择克隆载体的构建和应用
- 在己构建pMBL载体的基础上，参照Lac启动子序列设计引物，从质粒puC18上扩增出260bp大小的片段，定向克隆入pMBL载体，获得含可调控启动子(Plac)的跨膜输出蛋白基因选择克隆载体pMB-Lac，大小为3.72...
- 沈琴芳
- 关键词：多杀性巴氏杆菌
- 文献传递
- 鹅圆环病毒浙江永康株全基因组的克隆及遗传分析
- 为研究水禽流感大规模爆发的机理,我们开展了水禽流感病例中并发病原的研究.根据已发表的鹅圆环病毒(GoCV)序列,设计了一对检测引物,对永康发病鹅病例样品进行PCR扩增,扩增出552bp的特异片段,经测序确证GoCV的存在...
- 余旭平郑新添何世成朱军莉沈琴芳张秀亮
- 关键词：圆环病毒全基因组序列禽流感免疫抑制
- 文献传递
- 家禽H5亚型禽流感(Re-6株)疫苗免疫抗体消长规律研究被引量：4
- 2015年
- 为了解H5亚型重组禽流感Re-6株灭活疫苗在鸡、鸭免疫后的抗体消长规律,本实验分别选择一个鸡场和鸭场开展了临床免疫实验.实验鸡群于14日龄首免单价疫苗（Re-6株）和H5亚型二价疫苗（Re-6株＋Re-4株）后,在30日龄～200日龄不同时间点采血检测Re-6抗体,结果表明,二价疫苗比单价疫苗免疫后的Re-6免疫抗体产生早、效价高、抗体整齐度好;40日龄二免后20 d,二价疫苗和单价疫苗的Re-6免疫抗体消长规律趋于一致.实验鸭群于17日龄分别采用禽流感（H5＋H9）双价灭活疫苗和单价灭活疫苗（HSN1亚型,Re-6株）进行免疫,免后45日龄～205日龄不同时间点检测Re-6抗体,结果表明,双价疫苗与单价疫苗均可以诱导免疫鸭产生高水平抗体,而且两种疫苗的消长规律相似.此外,45日龄二免Re-6株疫苗的免疫程序要优于70日龄二免的免疫程序.本研究评估Re-6疫苗的防控效果,为家禽H5亚型禽流感免疫防制提供了实验依据.
- 吴贇竑赵灵燕张东华吴雪军张红丽沈琴芳高雪群陈星宇张传亮徐辉
- 关键词：H5亚型禽流感免疫抗体
- 冬季常见猪呼吸道疾病及其防治措施被引量：10
- 2010年
- 章明忠沈琴芳高雪琴
- 关键词：猪呼吸道疾病综合征COMPLEX相互作用环境应激
- 番鸭呼肠孤病毒ZJ99株σC蛋白基因的克隆与序列分析被引量：2
- 2005年
- 参考已发表的番鸭呼肠孤病毒(mDRV)的S4序列设计了1对扩增σC蛋白基因的引物,对mDRVZJ99株的RNA抽提物进行RTPCR扩增,获得了特异性的扩增片段。将PCR产物克隆测序,序列经同源性比较,发现mDRVZJ99株σC蛋白基因序列与福建MW9710株对应基因的同源性为99.5%,与法国89026株对应基因的同源性为94.2%,与法国89330株对应基因的同源性为95.0%;相应的氨基酸序列同源性分别为98.9%、94.1%、93.7%。基于σC基因及其推导氨基酸序列的蛋白质结构及物理化学性质预测结果,与国外学者对mDRVσC蛋白的报道相似。
- 何世成朱军莉金俊杰郑新添沈琴芳张秀亮余旭平
- 关键词：番鸭呼肠孤病毒克隆
- 杭州市余杭区“果园养羊”种养模式的主要做法和体会
- 2014年
- 杭州市余杭区三水果业有限公司位于杭州余杭鸬鸟镇前庄村,创建于2001年,配套种植果园500亩（1亩=667 m^2）,其中蜜梨383亩,桃85亩,其余为山楂等.果园内建有3个湖羊养殖区,羊舍面积1500 m^2,存栏湖羊2000只.经过几年的实践,实现了果优质、羊良种的良性循环,走出了一条果园养羊的农业生态循环之路.
- 沈琴芳陈梅生
- 关键词：果园种养模式养羊生态循环水果业养殖区
