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阔叶猕猴桃遗传转化技术参数的优化被引量：6: 2007年; 为了提高阔叶猕猴桃的遗传转化效率,以阔叶猕猴桃叶柄为试材,通过根癌农杆菌介导法进行了遗传转化技术参数的研究。结果表明,叶柄预培养3～4d、用农杆菌悬浮液(D600nm值0.5)感染10min、共培养48h、共培养时在培养基中加入200μmol/L乙酰丁香酮处理可以获得较高的gus基因表达率。在供试的1200个叶柄中获得了49个抗性芽,转化频率为4.1%。对转基因抗性材料进行PCR检测和gus基因组织化学染色,证实了外源基因已整合到阔叶猕猴桃的基因组中,并得到稳定表达。; 高月毕静华刘永立; 关键词：根癌农杆菌 GUS基因

葛枣猕猴桃组织培养中的器官形成与植株再生被引量：21: 2005年; 以葛枣猕猴桃(Actinidiapolygama)的叶柄为外植体,通过愈伤组织的形成产生不定芽从而建立了高效的再生系统。在附加蔗糖(30g/L),琼脂(8g/L)和植物生长调节物质IBA(0、0.01、1、10μmol/L)与CPPU(0、0.1、1μmol/L)的全组合培养基中,IBA和CPPU对愈伤组织的形成有促进作用。不定芽从叶柄形成的愈伤组织表层分化出来,CPPU对不定芽的分化有良好的促进效果,而高浓度的IBA对不定芽的分化有抑制作用。将分化的枝芽转移至含有1μmol/LNAA的BW培养基上,40d后发根率为100%,并长成健康植株。; 刘永立兰大伟毕静华陈超Takashi Harada; 关键词：不定芽 CPPU IBA

阔叶猕猴桃叶片离体再生体系的初步研究: 本文研究了不同激素组合和浓度对愈伤组织和不定芽形成及不定芽生根的影响。以阔叶猕猴桃叶片为外植体，通过愈伤组织发生途径诱导形成不定芽，建立了高效的再生体系。结果发现在愈伤组织和不定芽诱导过程中，Zeatin的效果要远远好于...; 毕静华刘永立; 关键词：不定芽再生生长调节剂; 文献传递

冻结保存液对软枣猕猴桃腋芽冻结保存的影响(英文)被引量：3: 2003年; 于12月取材的软枣猕猴桃侧芽通过酒精和次氯酸钠灭菌以后,以此为试材探讨了冻结保存液的组成、温度和浸泡时间对其冻结保存的影响。结果表明:最适的DMSO的浓度为15％,最适的浸泡温度为0℃。在侧芽预冷到-30℃后,再投入到液氮中,解冻后的生存率在含有甘油8 mol/L和11.5 mol/L区最高。用甘油预处理的实验结果表明:在处理浓度较高时可以获得较高的生存率。然而,在甘油预浸后,再用冻结保存液处理的最佳时间为小于1h。; 刘永立毕静华陈力耕原田隆; 关键词：软枣猕猴桃甘油

阔叶猕猴桃抗生素敏感性及遗传转化的研究被引量：7: 2006年; 以阔叶猕猴桃(Actinidia latifolia)叶片为外植体,研究了各种抗生素对形态分化和器官形成的影响,并以叶盘为受体,通过根癌农杆菌介导法获得了抗性愈伤组织和抗性芽,组织化学染色表明gus基因已在植物组织中表达。研究结果表明,对不定芽分化来说,头孢霉素(Cef)效果明显好于羧苄青霉素(Carb)。Cef浓度为300mg.L-1时效果最好,再生频率达100%,平均再生芽数达最大为9.76个芽/外植体。生根过程中高浓度的Cef(≥200mg.L-1)明显抑制生根,而Carb对生根没有显著影响。在卡那霉素(Kan)和Carb组合处理中,Carb对生根没有显著影响,但Kan明显抑制生根。随着Kan浓度的升高,生根率和平均根数迅速减少,当浓度升高到50mg.L-1时,生根完全被抑制。因此,农杆菌介导的阔叶猕猴桃遗传转化中愈伤组织和不定芽诱导过程宜选用300mg.L-1Cef来抑制农杆菌生长,Kan筛选的临界浓度为20mg.L-1。在抗性芽生根过程中Kan浓度应该控制在50mg.L-1以内,并改用Carb作为杀菌剂,生根效果会更好。该研究确定了农杆菌介导的阔叶猕猴桃叶片遗传转化中使用抗生素的种类和用量,为通过基因工程对阔叶猕猴桃进行遗传改良奠定了基础。; 毕静华高月刘永立叶庆富; 关键词：根癌农杆菌抗生素 GUS 叶片

阔叶猕猴桃叶片离体器官发生和植株再生(英文)被引量：22: 2005年; 以阔叶猕猴桃(A ctinidia latifolia M err.)叶片为外植体,通过器官发生途径诱导形成不定芽,探讨了不同激素组合、暗培养时间以及不同浓度的蔗糖对叶片器官发生和植株再生的影响。结果表明,BW +0.1μm ol/L N AA +5μm ol/L Zeatin 附加20g/L 蔗糖,先进行21d 暗培养然后转到光下培养效果最好,6周后不定芽再生频率达91.67%,平均每个外植体再生芽数6.87个。再生芽生根良好,生根率可达100%。首次报道了阔叶猕猴桃的器官发生和植株再生,建立了叶片的高效再生体系,为今后的遗传转化研究奠定了基础。; 毕静华刘永立Syed Asghar; 关键词：愈伤组织叶片不定芽再生

阔叶猕猴桃高效再生体系的建立及遗传转化的研究: 本文以阔叶猕猴桃叶片和叶柄为材料，建立了高效可重复的再生体系，并在此基础上通过根癌农杆菌介导法对阔叶猕猴桃叶柄进行基因转化研究。经过抗生素筛选培养和植株再生，获得了转基因抗性芽，并通过GUS组织化学染色、PCR等技术对转...; 毕静华; 关键词：根癌农杆菌抗生素愈伤组织暗处理外植体不定芽再生; 文献传递

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毕静华