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含蛋白质转导域的Ngb融合蛋白的原核表达、纯化及其生物学活性的初步研究被引量：2: 2007年; 以SD大鼠脑组织RNA为模板,利用RT-PCR技术,将HIV-1反式激活蛋白(TAT)中具有蛋白质转导功能的9个氨基酸序列,即蛋白质转导域(PTD)基因与脑红蛋白(Ngb)基因融合,应用T-A克隆技术将融合基因与pMD19-Tsimple载体连接,经测序正确后克隆至表达载体pET28b中,转化感受态E.coli BL21(DE3)plysS,得到的转化子经IPTG诱导后获得可溶性表达,并经蛋白质印迹检测进一步鉴定.表达产物经Ni2+亲和纯化层析、脱盐后在原代培养的大鼠皮质神经元进行生物学活性检测,结果显示,TATPTD-Ngb融合蛋白可以转运入皮质神经元内,在48h内可检测到其存在,并能提高缺氧条件下皮质神经元存活率、减少缺氧诱导的皮质神经元的凋亡.这一结果为进一步研究TATPTD-Ngb的神经保护机制提供了线索,并可能为神经系统疾病尤其是脑血管疾病、神经系统退行性疾病提供一个新的治疗策略.; 周国钰周盛年楼之茵朱灿胜胡学强; 关键词：蛋白质转导脑红蛋白

可逆性后部脑病综合征一例被引量：12: 2007年; 　　1病例简介　　患者,男性,58岁.因'头痛、视物不清、抽搐伴意识障碍1 d'于2005年3月30日入院.患者1 d前无明显诱因出现后枕部剧烈疼痛,伴视物不清,后突然意识丧失,伴双眼上视、口吐白沫、四肢抽搐,持续约2 min,抽搐自行缓解,发作时伴尿失禁.此后意识障碍进行性加重.……; 邱伟楼之茵胡学强; 关键词：可逆性后部脑病综合征基底动脉尖综合征

大麻素1型受体过表达在实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中的作用: 2017年; 目的探讨大麻素1型受体(cannabinoid 1receptor,CB1R)过表达对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠神经功能的影响及其作用机制。方法选取24只C57B/L6小鼠,采用MOG_(35-55)免疫诱导构建EAE小鼠模型,随机分为2组,一组采用质粒转染技术使小鼠脊髓组织CB1R过表达,另一组给予溶剂作为对照。观察对照组和CB1R过表达组EAE小鼠的神经功能缺损症状,采用蛋白质印迹法检测小鼠脊髓组织中CB1R蛋白的表达,采用酶联免疫吸附试验检测小鼠脊髓组织中细胞因子白介素(IL)-10、IL-17、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度。结果免疫后第14、28天时CB1R过表达组EAE小鼠发生神经功能缺损的程度低于对照组(P<0.05)。与对照组相比,CB1R过表达组EAE小鼠脊髓组织中CB1R蛋白的表达水平升高(P<0.01),IL-10的浓度升高(P<0.05),而IL-17、IL-6、TNF-α的浓度降低(P<0.05,P<0.01)。结论中枢神经细胞中CB1R的过表达能够延缓EAE的发生和发展,这种作用可能是通过免疫调节实现的。; 程洁李琳楼之茵赵忠新; 关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎肿瘤坏死因子Α

长新冠下,脑血管病患者如何睡好: 2023年; 随着较多人逐渐“阳过”,部分患友却总觉得自己“没好透”,没有彻底“阳康”,因此诞生了新名词——“长新冠”。世界卫生组织(WHO)将“长新冠”定义为新型冠状病毒感染确诊后出现的一种或多种症状,持续或复发/缓解超过12周,且无法用其他原因来解释。“长新冠”症状可累及多个人体系统。; 楼之茵; 关键词：脑血管病患者冠状病毒感染新名词症状

大麻素1型受体在实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中的动态表达及其作用被引量：2: 2014年; 【目的】观察大麻素1型受体(CB1R)在C57B/L6小鼠神经元和胶质细胞的表达及其在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠中枢神经系统(CNS)和外周免疫器官的动态变化及其作用。【方法】取C57B/L6胎鼠的海马培养神经元及新生C57B/L6新生小鼠的皮层培养星形胶质细胞和小胶质细胞,观察CB1R蛋白的表达;观察正常对照、完全弗氏佐剂、EAE和特异性CB1R抑制剂(SR141716A,SR1)干预组小鼠的神经功能缺损症状和体质量变化;用real time PCR检测CB1R m RNA表达;Western blot和荧光免疫组织化学法检测CB1R蛋白表达;用ELISA法检测细胞因子IL-1β、IL-4、IL-10、IL-17、IL-6、TNF-α、IFN-γ浓度的变化。【结果】1C57B/L6小鼠神经元和小胶质细胞表达CB1R,星形胶质细胞不表达CB1R。2EAE小鼠神经元CB1R的表达显著低于CFA小鼠(P<0.01),小胶质细胞CB1R的表达显著高于CFA小鼠(P<0.01)。EAE小鼠脾脏中CB1R的表达与相同时点CFA小鼠无显著性差异(P>0.05)。3SR1干预促进EAE早发,上调EAE小鼠CNS和脾脏抗原特异性T细胞IL-17,TNF-α,IL-1β和IL-6的表达(P<0.05)。【结论】1神经元和小胶质细胞表达CB1R。2EAE小鼠脾脏中CB1R显著升高没有疾病特异性,可能与非特异性免疫激活有关。3中枢神经细胞上的CB1R可能兼有神经保护和免疫调节双重作用,参与EAE的发生和发展。; 楼之茵程洁李琳陈伟王晓蓉浦政刘振国肖保国; 关键词：神经元星形胶质细胞小胶质细胞实验性自身免疫性脑脊髓炎免疫调节

CB1R在EAE发生发展中的机制研究: 目的使用慢病毒载体沉默或上调C57B/L6小鼠第5—6腰髓节段CB1R的表达,观察EAE小鼠的神经系统功能缺损评分变化,探讨CB1R在EAE发生和发展中的机制。方法将C57B/L6小鼠随机分为正常对照组、RNA干扰沉默C...; 楼之茵程洁李琳刘振国肖保国; 文献传递

大麻素1型受体拮抗剂对激活态小胶质细胞的免疫调节功能研究: 2017年; 目的观察大麻素1型受体拮抗剂SR141716A(SR1)对BV2小胶质细胞免疫调节功能的影响。方法使用致炎因子干扰素-γ(IFN-γ)刺激激活BV2小胶质细胞,建立模拟EAE炎性环境的细胞模型,比较静息态BV2细胞组、激活态BV2细胞组和SR1干预组CB1R mRNA和蛋白的表达情况,用ELISA方法检测细胞因子和趋化因子的浓度,Griess试剂法检测一氧化氮(NO)浓度,MTT法检测细胞增殖率。结果激活态的BV2小胶质细胞CB1R mRNA和蛋白的表达均高于静息态BV2细胞组(P<0.05);大麻素1型受体拮抗剂SR1可降低激活态的BV2细胞CB1R mRNA和蛋白的表达(P<0.05);SR1可显著上调IFN-γ、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,增加BV2小胶质细胞NO的释放(P<0.05),而显著下调IL-4、IL-17和MCP-1的浓度,对IL-10、IL-1β和CX3CL1无调节作用。SR1对IFN-γ活化的BV2小胶质细胞增殖无影响(P>0.05)。结论 CB1R参与了小胶质细胞介导的炎症反应,CB1R在调节细胞因子网络平衡和NO分泌中发挥了一定的作用。; 李琳程洁楼之茵赵忠新; 关键词：大麻素

记性越来越差,怎么办: 2023年; 预计到2035年,我国老龄人群痴呆患者将超过1000万人,痴呆已成为继心脏病、脑血管疾病和肿瘤之后,导致死亡的第四大疾病。阿尔茨海默病是最常见的老年期痴呆类型,早期表现为记忆力轻度受损,学习新技能、新知识的能力下降,中晚期则表现为精神异常。; 楼之茵; 关键词：老年期痴呆老龄人群脑血管疾病痴呆患者

基底动脉尖综合征研究进展被引量：24: 2005年; 基底动脉尖综合征系基底动脉尖血液循环障碍所致,是以中脑、小脑、丘脑、枕颞叶不同程度损害为特征的一组临床综合征。基底动脉尖综合征病因复杂,病情较重,临床表现多样,预后不良,故掌握基底动脉尖解剖结构、早期诊断和治疗至关重要。头颅MR/检查和脑血管造影对早期诊断有重大意义。; 楼之茵胡学强; 关键词：基底动脉尖综合征病理解剖磁共振技术血液循环障碍临床综合征脑血管造影

可溶性TAT PTD-Ngb融合蛋白的原核表达、鉴定与纯化及其对皮质神经元的跨膜转导被引量：2: 2007年; 【目的】构建含蛋白转导域(protein transduction domain,PTD)与脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)融合基因的表达质粒,原核表达可溶性TATPTD-Ngb,并鉴定、纯化,检测TATPTD-Ngb对皮质神经元的跨膜转导功能。【方法】提取SD大鼠脑组织总RNA,通过RT-PCR法构建编码TATPTD-Ngb的融合基因,克隆入pET28b原核表达载体,转化入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE、Western-blot分析及可溶性鉴定,利用所表达的目的蛋白上的6个组蛋白用Ni-NTA琼脂进行亲和层析纯化,将不同浓度纯化的融合蛋白与原代培养皮质神经元共孵育2h,用Western-blot分析融合蛋白的跨膜转导。【结果】成功构建了含有TATPTD-Ngb的原核表达载体,插入片段500bp,成功表达并纯化了可溶性TATPTD-Ngb融合蛋白,相对分子质量约为20k,Westernblot鉴定显示表达蛋白具有抗原性,并具有转导入原代培养皮质神经元的功能,随给予蛋白浓度的增高进入神经元内的融合蛋白量增高。【结论】可溶性融合蛋白TATPTD-Ngb可转导入皮质神经元,对进一步研究Ngb的功能及蛋白转导技术的应用奠定了基础。; 周国钰胡学强胡骏陆正齐楼之茵朱灿胜熊洁萍; 关键词：蛋白转导域脑红蛋白

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楼之茵

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