柯艳坤
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家高技术研究发展计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- H5亚型禽流感病毒多肽疫苗的初步研制被引量：1
- 2008年
- 本试验利用生物软件对H5亚型禽流感病毒A/CK/GD/178/04的血凝素进行抗原特性分析,结合关于禽流感病毒血凝素抗原位点的文献报道,选定97～212位氨基酸和369～529位氨基酸两个区域作为多肽表位候选区域。利用本实验室自主研发的原核表达载体pBT载体,串联表达HA的两个区域,经SDS-PAGE和Western Blotting分析,证明重组产物得到表达,Ni2+柱纯化重组蛋白后,对2周龄SPF鸡进行免疫,经HI试验检测该重组蛋白可以刺激机体产生HI抗体。本研究为H5亚型AIV多肽疫苗的进一步研制奠定了基础。
- 柯艳坤齐岩叶贺佳张贺楠陈晓春李小康袁润余亓文宝廖明
- 关键词：禽流感病毒H5亚型HA多肽疫苗
- 鹅IL-18基因的克隆和原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：2
- 2010年
- 参考GenBank中鸡、火鸡和鸭IL-18基因序列,设计了1对特异引物,以提取的鹅脾细胞总RNA为模板,应用RT-PCR扩增、克隆鹅IL-18基因中间的333bp序列。序列分析结果表明,其与鸭IL-18基因对应序列相似性最高,达99%。参考鸭IL-18全基因序列设计上、下游引物各3条,以梯度PCR探索扩增、克隆鹅IL-18全基因。以上述策略成功扩增、克隆了3个广东地方杂交品种鹅的IL-18基因。序列分析表明,这3个杂交品种鹅的IL-18基因序列一致,长642bp,含一个603bp的ORF,编码200个氨基酸,分子质量为23.2ku。ORFN端的30个氨基酸为前导序列,其余170个氨基酸为功能蛋白序列。在GenBank中注册了第一条鹅的IL-18基因序列,登录号为EF159728。随后,构建了鹅IL-18基因ORF的重组原核表达质粒pET-GIL-18,经诱导表达、纯化获得重组鹅IL-18融合蛋白,并以其制备了兔抗重组鹅IL-18多克隆抗体。
- 郑海华韩先干尹会方周蕾柯艳坤黄青云
- 关键词：IL-18基因克隆原核表达多克隆抗体
- H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白中和抗原表位的分析
- 禽流感病毒(AIV)属于正粘病毒科、A型流感病毒属的成员，主要引起禽类的全身性或呼吸道传染病。其中，H9N2亚型禽流感目前在很多国家的禽群中流行，对养禽业造成了严重的危害;而且该病毒已多次直接感染人类，对人类的健康造成了...
- 柯艳坤
- 关键词：禽流感病毒抗原表位融合蛋白免疫血清
- 禽流感病毒检测方法的研究进展被引量：5
- 2008年
- 禽流感病毒准确、快速检测已成为抗击禽流感的一个至关重要的环节,文章对最新的检测方法及其研究进展进行了综述。
- 柯艳坤陈晓春齐岩张煜坤廖明亓文宝
- 关键词：禽流感病毒检测血凝试验
- 禽流感病毒H5亚型HA抗原位点的表达及抗原性检测
- 本试验利用生物软件对H5亚型禽流感病毒A/CK/GD/178/04的血凝素进行抗原特性分析,结合文献关于禽流感病毒血凝素的报道,选定97～212位氨基酸和369～529位氨基酸两个区域作为多肽表位候选区域。利用本实验室自...
- 齐岩柯艳坤张贺楠亓文宝袁润余赵丽荣陈晓春李小康廖明
- 关键词：禽流感病毒H5亚型HA多肽疫苗
- 文献传递
- 鸭IL-18基因克隆与序列分析被引量：4
- 2008年
- [目的]为深入研究鸭IL-18的基因表达及其生物学活性和分子佐剂的应用奠定基础。[方法]依据GenBank中香港鸭IL-18基因的序列设计1对特异引物,以广东水鸭脾淋巴细胞总RNA为模板进行RT-PCR扩增,克隆广东水鸭IL-18基因并进行序列分析。[结果]测序结果表明,广东水鸭的IL-18基因开放阅读框为603 bp,编码201个氨基酸,分子量为23.2 kDa。序列分析表明,所获得的广东水鸭IL-18基因与GenBank中香港鸭的核苷酸同源性为98.2%,氨基酸同源性为100%。它与鸡和火鸡的核苷酸同源性分别为86.9%和87.1%,而氨基酸同源性分别为96.5%和97.0%。[结论]进化树分析结果表明,鸭IL-18基因与鸡和火鸡进化关系较近。
- 韩先干黄青云尹会方邓宪方柯艳坤
- 关键词：RT-PCR
