林芳昭
- 作品数:6 被引量:2H指数:1
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院输血研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程更多>>
- 大容量人源核糖体展示单链抗体文库的构建被引量:1
- 2012年
- 目的构建大容量、多样性的人源核糖体展示(Ribosome display,RD)单链抗体(Singe chain Fv segment,scFv)库。方法收集20名健康献血者的新鲜外周血,分离淋巴细胞,提取细胞总RNA;设计兼并引物,利用RT-PCR分别扩增人抗体的VH-linker、Vκ、Vλ及Cκ基因;采用重叠PCR(SOE-PCR)技术,构建VH-linker-Vκ和VH-linker-Vλ-Cκ单链抗体库;将VH-linker-Vκ和VH-linker-Vλ-Cκ等量混合后,与pMD19-T载体连接,并转化感受态E.coli DH5α,对所构建的scFv库进行菌落PCR和测序分析。结果构建的核糖体展示单链抗体库重组率较高,转化产物经菌落PCR鉴定,均可见约1 000 bp的scFv基因片段,库容量为2.06×1013。经分析该抗体库单链抗体序列均完整,内部无终止密码子,可变区序列无一重复,多样性良好,均具有完整的体外核糖体展示框架。结论已成功构建了大容量、多样性好的人源核糖体展示单链抗体库,为进一步筛选高特异性、高亲和力的人源抗体奠定了基础。
- 刘彬李长青林芳昭肖薇赵睿肖小璞
- 关键词:核糖体展示单链抗体文库
- 测定凝血因子Ⅷ促凝活性的实验条件优化
- 1999年
- 凝血因子Ⅷ(FⅧ)促凝活性(FⅧ∶C)测定是确诊甲型血友病的主要方法,也是FⅧ制品(如冷沉淀、中纯FⅧ等)研制、开发和质控不可缺少的手段之一。但FⅧ∶C测定是一个受多种因素影响的实验。笔者参考文献[1,2]的测定方法,并以凝血实验的温育曲线稳定性为指...
- 肖小璞杨显福林芳昭白文光闻欣周宇
- 关键词:正交试验
- 人胎儿胸腺细胞株8810的建立及其生物学特性研究
- 1995年
- 采用剖腹取胎的5月龄胎儿,分离其胸腺细胞,经过筛选培养,获得能传代培养的细胞株,在体外连续培养已2年多,共传200余代,命名为人胎儿胸腺细胞株8810(简称HFT8810)。该细胞生长繁殖旺盛、迅速,经多次液氮冻存复苏后,细胞仍生长良好。经长期传代培养,该细胞仍保持分泌胸腺素的功能。
- 寸珩邓聪林芳昭卢林
- 关键词:胸腺细胞细胞株建立
- 血友病A、B诊断试剂盒的研制
- 2000年
- 肖小璞杨显富林芳昭周宇闻欣赵青蓉孙小成王憬惺
- 关键词:血友病诊断试剂盒
- 凝血活酶试剂国际敏感度指数值估测方法应用可行性探讨
- 2002年
- 目的 对凝血活酶的国际敏感度指数 (ISI)估测方法应用可行性探讨。方法 参照国际血液学标准化委员会 1985年公布的暂定参考方法[1 ] ,分别用接受口服抗凝剂治疗患者 (心脏换瓣手术 )血浆和人工缺乏维生素K(VitK)依赖性凝血因子的血浆 ,对凝血活酶试剂进行ISI值标定的比较。结果 3批凝血活酶试剂用口服抗凝剂治疗患者血浆 ,标定的ISI结果为 :2 .0 9、2 .0 2、2 .0 4 ;人工缺乏VitK依赖性凝血因子血浆估测的ISI值相应为 :2 .2 8、2 .34、2 .2 0。结论 应用估测方法估测的结果可用于凝血活酶试剂ISI值高低的初步判定。
- 赵青蓉肖小璞杨显福林芳昭孙小成黄淑肖玲
- 关键词:凝血酶原时间凝血活酶国际敏感指数血液学检验
- 经S/D灭活病毒处理的高纯度凝血因子Ⅸ研制初探被引量:1
- 1998年
- 凝血因子Ⅸ(FⅨ)制品是治疗乙型血友病的主要制剂,但一般方法制备的FⅨ浓缩物,如凝血酶原复合物(PCC),因含有较多的其他凝血因子(凝血因子Ⅱ、Ⅶ、X以及蛋白C等),易导致血栓的形成。若制品未经有效病毒灭活,还可造成患者输用后感染病毒。这两种情况又因...
- 肖小璞闻欣周余蓉赵青蓉林芳昭王海龄
- 关键词:凝血因子纯度