杨春
- 作品数：137 被引量：379H指数：9
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市教育委员会科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学哲学宗教更多>>
- 结核分枝杆菌ClpP1重组蛋白的特性探讨及初步应用被引量：1
- 2014年
- 目的用纯化结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)ClpP1重组蛋白免疫新西兰白兔制备ClpP1多克隆抗体并检测其效价,间接ELISA法分析重组蛋白的抗原性,以初步评价其应用价值。方法通过SDS-PAGE确定ClpP1重组蛋白的主要表达形式,利用纯化包涵体方式对重组蛋白进行纯化;将纯化蛋白免疫新西兰白兔制备ClpP1多克隆抗体并检测其效价;再分别以纯化蛋白为抗原,制备抗体为一抗,间接ELISA法检测临床诊断结核病患者血清中抗M.tb抗体和M.tb抗原。结果 SDSPAGE显示ClpP1重组蛋白主要以包涵体表达形式存在,将纯化蛋白免疫新西兰白兔4次,取血测抗体效价为1∶64 000;Western blot结果显示制备抗体可较好的与ClpP1蛋白特异性结合;间接ELISA法结果表明,以重组蛋白为抗原测患者血清中抗M.tb抗体和以制备抗体为一抗测血清中的M.tb抗原的2实验组分别与对照组相比均具有显著性差异。结论制备了具有免疫原性的M.tb ClpP1重组蛋白及效价较高的多克隆抗体,并得出ClpP1多克隆抗体具有较好的免疫反应性,为进一步研究ClpP1重组蛋白的特性及其应用奠定了基础。
- 张春燕杨春李岱容穆柳青樊宇何永林
- 关键词：结核分枝杆菌多克隆抗体
- 颗粒溶素活性肽与增强型绿色荧光蛋白融合基因真核表达质粒的构建及其在小鼠黑色素瘤细胞中的表达被引量：2
- 2008年
- 目的构建人颗粒溶素(GLS)活性肽(9ku-GLS)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合基因的真核表达载体,并检测其在小鼠黑色素瘤细胞B16中的表达。方法经PCR扩增9ku-GLS基因,插入质粒pBudCE4.1中,经酶切及测序鉴定正确后,亚克隆至质粒pEGFP-C1中,将融合基因真核表达质粒pEGFP-C1/S9K转染B16细胞,采用荧光显微镜及RT-PCR法检测融合蛋白的表达。结果融合基因真核表达质粒pEGFP-C1/S9K经双酶切鉴定证明构建正确,转染B16细胞24h后,荧光显微镜下可观察到绿色荧光,且经RT-PCR可扩增出267bp的目的基因片段。结论已成功构建9ku-GLS与EGFP融合基因的真核表达质粒,且在B16细胞中表达了融合蛋白。
- 何永林朱道银伊正君杨春徐蕾王瑜伟
- 关键词：颗粒溶素增强型绿色荧光蛋白融合基因真核表达黑色素瘤细胞
- B和C基因型乙型肝炎病毒对阿德福韦酯治疗的病毒学应答比较被引量：10
- 2008年
- 目的阐明不同基因型HBV对阿德福韦酯治疗反应是否存在差异。方法首先利用型特异引物PCR法结合型特异核苷酸分析法检测HBV基因型，然后根据基因型对阿德福韦酯Ⅲ期临床资料进行分析及统计学处理（计量资料用t检验，计数资料用卡方检验）。结果177例临床标本检出B基因型HBV感染者102例，C基因型感染者65例，B＋C混合型感染者6例，B＋D混合型感染者4例。治疗第12、24周时，B基因型组和C基因型组血清HBVDNA下降均值分别为2.2log10拷贝／ml、2.1log10拷贝／ml和2.7log10拷贝／ml、2．4log10拷贝／ml，两组差异均无统计学意义（P〉0．05），第48周时两组HBVDNA分别下降3.6log10拷贝／ml和3．1log10拷贝／ml，差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗结束时（48周）B基因型组和C基因型组分别有43例（42．2％）和22例（33．8％）出现血清HBVDNA转阴，差异有统计学意义（P〈0．05）；两组患者HBeAg阴转率和抗-HBe血清转换率分别为30．4％、29．2％和21．6％、20．0％，差异无统计学意义（P〉0．05）。两组患者血清ALT复常率在治疗第12、24、36周和48周时分别为35．3％、33．9％，51．0％、53．9％，63．4％、61．5％和83．3％、81．5％，各时间段两组ALT复常率差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎48周时，部分病毒学指标（如血清HBVDNA下降均值和HBVDNA阴转率）B基因型优于C基因型HBV感染者。但由于阿德福韦酯起效较慢，抑制病毒作用相对较弱，有必要延长治疗时间进一步证实这一现象。
- 曾爱中邓惠彭凤英辛小娟杨春李青岭郭进军张祯祯赫美君袁喆黄文祥黄爱龙
- 关键词：肝炎乙型肝炎病毒基因型阿德福韦酯
- 饮酒对慢性乙型病毒性肝炎进展为肝硬化的影响被引量：3
- 2021年
- 目的探索饮酒量对慢性乙型病毒性肝炎(以下简称慢性乙肝)进展为肝硬化的影响,以及酒精与乙型肝炎病毒(HBV)对肝硬化进展的相互作用。方法回顾性分析该院就诊的90例乙型肝炎肝硬化患者的临床资料,根据既往饮酒史分为不饮酒组、适量饮酒组和过量饮酒组。记录患者开始治疗时、治疗第3、6个月的肝纤谱[Ⅲ型胶原蛋白(PⅢNP)、Ⅳ型胶原蛋白(CⅣ)、层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)],HBV DNA载量,转氨酶[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)],乙型肝炎表面抗原(HBsAg)定量,Child评分分级情况及并发症发生情况。结果3组各时间点肝纤谱指标、HBV DNA载量、转氨酶水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05),且过量饮酒组水平最高;而适量饮酒组和不饮酒组上述指标水平在部分时间点无明显差异(P>0.05)。3组各时间点Child评分分级构成比较,差异均有统计学意义(P<0.001),其中过量饮酒组中Child C级患者比例高于其余两组,不饮酒组中Child A级患者比例高于其余两组。治疗第3、6个月时,过量饮酒组Child C级患者比例较入组时无明显差异(P>0.05)。3组各时间点HBsAg水平无明显差异(P>0.05)。结论患有慢性乙肝并过量饮酒的患者可能通过激活HBV DNA增加肝脏炎症,加速肝硬化的进展,适量饮酒对慢性乙肝进展为肝硬化的影响可能不大。
- 周恩豪杨春
- 关键词：乙型病毒性肝炎饮酒过度饮酒肝硬化
- 尿毒症性脑病脑功能网络拓扑属性的改变
- 目的 探讨尿毒症性脑病患者（UE）脑功能网络的拓扑属性变化。 方法 纳入18例UE患者和18例正常人，进行静息态功能磁共振成像扫描，构建每个患者的脑功能网络，并使用图论方法对脑功能网络全局的、节点的及边的拓扑属性进行分...
- 杨春
- 关键词：静息态功能磁共振成像尿毒症性脑病
- 重组CFP10-PPE68融合蛋白检测结核分枝杆菌感染的初步应用被引量：2
- 2013年
- 目的以结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)RD1区特异性培养滤液蛋白10(culture filtrate pro-tein10,CFP10)与戊糖-5-磷酸-3-差异构象酶68(pentose-5-phosphate-3-epimerase68,PPE68)的融合蛋白CFP10-PPE68作为包被抗原,建立检测结核病患者血清中MTB抗体的间接ELISA法。方法采用亲和层析法纯化重组CFP10-PPE68、CFP10和PPE68蛋白;分别以3种蛋白作为包被抗原,建立检测结核病患者血清中MTB特异性抗体的间接ELISA法;采用方阵滴定法对建立的间接ELISA法的条件进行优化;并以临床诊断为金标准,对间接ELISA法的特异性、敏感性和准确性进行验证。结果纯化的重组CFP10-PPE68融合蛋白纯度约为70%。分别以重组CFP10-PPE68、CFP10和PPE68蛋白作为包被抗原的最佳包被浓度分别为2、4、4μg/ml,血清最佳稀释度均为1∶1 000,酶标二抗最佳稀释度均为1∶5 000。3种蛋白对肺外结核的诊断效果均优于肺结核,且重组CFP10-PPE68融合蛋白检测肺外结核的特异性、敏感性及准确性均最佳;3种蛋白诊断结核病的特异性较高,而敏感性相对较低。结论以重组CFP10-PPE68融合蛋白作为包被抗原建立的间接ELISA法诊断MTB感染具有较高的敏感性和特异性,特别是对难以诊断的肺外结核病的诊断有一定的参考价值。
- 董志玲杨春徐蕾何永林冯鑫王静娴张壮苗杨晓燕
- 关键词：结核分枝杆菌酶联免疫吸附测定
- 结核分枝杆菌二线抗结核药物耐药分子机制研究进展被引量：5
- 2017年
- 耐药尤其是耐多药结核病(multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB)的出现,在许多国家已成为重大的公共卫生问题。我国是全球27个耐多药结核病高负担国家之一,耐多药结核病和广泛耐药结核病(extensively drug-resistant tuberculosis,XDR-TB)已经成为我国结核病疫情控制的主要障碍。二线抗结核药物是治疗耐多药结核病的主要药物,充分了解二线抗结核药物的耐药分子机制可以为建立简便、快速的二线抗结核药物耐药性检测方法及研发新的抗结核药物提供分子生物学依据,对阻止耐多药结核病的进一步传播有重大意义。近年来,二线抗结核药物耐药分子机制研究取得了很大进展,本文就此进行了综述。
- 胡彦胡彦杨春
- 关键词：结核分枝杆菌耐药机制分子机制基因突变
- 结核分枝杆菌PPE68蛋白的表达、鉴定及抗血清的制备被引量：2
- 2011年
- 目的在大肠杆菌中表达结核分枝杆菌PPE68蛋白,鉴定并纯化重组rPPE68蛋白后免疫新西兰大白兔,制备兔抗PPE68多克隆抗体。方法将已经过鉴定的重组原核表达质粒pET32a(+)-PPE68转化至大肠杆菌BL21中,IPTG诱导大量表达PPE68蛋白。对表达蛋白进行鉴定后利用亲和层析法进行纯化。以纯化后重组rPPE68为免疫抗原,与弗氏不完全佐剂等体积混合,采用皮下多点注射法免疫新西兰大白兔,于第3次免疫后的第7天采血。用凝集实验与Western-blot检测抗血清的特异性,并用双向免疫扩散法测定抗血清效价。结果在大肠杆菌中表达的目的产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量57 000处可见特异性条带,免疫印迹分析证实表达的目的蛋白可与结核分枝杆菌H37Rv株感染小鼠的血清发生反应。纯化的rPPE68蛋白免疫新西兰大白兔后,凝集反应与Western-blot证实了抗血清的特异性,双向免疫扩散法测得血清效价为1∶16。结论已成功表达结核分枝杆菌PPE68蛋白,制备了特异性兔抗PPE68多克隆抗体,对结核病的早期诊断提供了一种新的思路。
- 佘茜徐蕾何永林靳志栋张丹杨春
- 关键词：结核分枝杆菌PPE68原核表达抗血清
- 酒精协同乙肝病毒促进肝硬化的研究进展被引量：6
- 2020年
- 慢性乙型肝炎病毒患者合并饮酒正逐年增多,对于酒精是否增加慢性乙肝患者进展至肝硬化的风险,以及乙肝病毒和酒精之间的相互作用机制都值得去探索。酒精增加HBV的复制、增加机体氧化应激、减弱机体对病毒的免疫反应,促进肝星状细胞激活产生过量的细胞外基质从而促进肝硬化的进展。临床研究表明不同的饮酒量会对慢性乙肝患者疾病进展产生不同的影响,轻度到中度饮酒不会增加慢性乙肝患者进展为肝硬化的风险,而重度饮酒会促进慢性乙肝患者进展为肝硬化,且会降低机体对干扰素的反应导致病毒难以被清除。故通过酒精协同乙肝病毒促进肝硬化的研究有助于公众加强酒精对慢性乙型病毒性肝炎疾病进展的认识,并为慢性乙肝患者戒酒等生活方式的干预提供更多的研究证据支持。
- 周恩豪(综述)杨春
- 关键词：乙肝饮酒相互作用肝硬化
- 盐酸安妥沙星片剂与盐酸左氧氟沙星片剂随机、双盲、双模拟治疗急性呼吸道感染的Ⅲ期临床研究被引量：10
- 2009年
- 目的评价盐酸安妥沙星片剂治疗急性呼吸道感染的安全性和有效性。方法采用随机对照、双盲双模拟、平行对照的试验设计。选用40例急性呼吸道感染病人,随机分为2组,每组20例,试验组予盐酸安妥沙星片剂和安慰剂,对照组予左氧氟沙星片剂和安慰剂,每日服药2次,每次间隔12h,疗程均为7～14d。结果盐酸安妥沙星片剂与盐酸左氧氟沙星片剂相比,具有相似的临床疗效、细菌学疗效和不良反应发生率,经统计学比较两组间无显著差别。结论盐酸安妥沙星片剂治疗呼吸道感染疗效确切,安全性好。
- 杨春袁哲黄文祥刘成伟
- 关键词：急性呼吸道感染随机对照试验双盲法
