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杨如燕
作品数:
4
被引量:46
H指数:3
供职机构:
中国科学院上海生命科学研究院
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相关领域:
生物学
化学工程
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合作作者
李民
中国科学院上海生命科学研究院
陈常庆
中国科学院上海生命科学研究院
徐皓
中国科学院上海生命科学研究院
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年份
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2001
1篇
2000
1篇
1999
1篇
1998
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重组大肠杆菌YK537/pSB┐TK高密度培养过程中有机酸的RP┐HPLC快速分析
2001年
采用高压液相色谱法(HPLC),利用C18反相柱快速检测重组大肠杆菌YK537/pSB-TK高密度发酵过程中细菌代谢产生的各种有机酸。分析表明,经乙醚和水两次萃取处理后能去除样品中大部分的干扰峰,可获得理想的分离效果,并能定量测出发酵过程中各种有机酸的积累。不同培养方式的结果表明用甘油代替葡萄糖作为细菌生长的碳源可减少乙酸的积累,降低其对细菌生长和外源蛋白表达的抑制作用,从而更易实现重组大肠杆菌的高表达、高密度培养。
杨如燕
李民
陈常庆
关键词:
RP-HPLC
高密度发酵
重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNFα)工程菌高密度发酵研究
被引量:7
2000年
报道了 rh TNFα重组菌发酵条件及高密度、高表达发酵的研究。首先研究了营养成份对其生长和表达的影响 ,确定了半合成发酵培养基 ;筛选出了 rh TNFα生长和表达的最适宿主菌 E.coli YK5 37;研究了影响高表达的几个关键因素 ,建立了该类型重组菌的诱导表达条件。结果表明限制发酵过程中乙酸积累、控制在指数生长期进行诱导、持续诱导时间不超过 5 h是实现高密度、高表达发酵的关键条件。采用半经验补料流加公式 ,在 NBS Bio Flo30 0 0型 5 L 发酵罐中利用恒溶氧 -补料培养批技术 ,限制甘油浓度在 5 g/ L,可使 E.coli YK5 37/ p SB- TR最终菌体密度和 rh TNFα的产量分别达到 A6 0 0 12 6和 8.4g/ L。
李民
徐皓
周逸明
杨如燕
陈常庆
关键词:
肿瘤坏死因子
高密度发酵
RHTNFΑ
工程菌
重组大肠杆菌YK537/pSB┐TK高密度培养过程中有机酸的RP┐HPLC快速分析
被引量:15
1998年
采用高压液相色谱法(HPLC),利用C18反相柱快速检测重组大肠杆菌YK537/pSB-TK高密度发酵过程中细菌代谢产生的各种有机酸。分析表明,经乙醚和水两次萃取处理后能去除样品中大部分的干扰峰,可获得理想的分离效果,并能定量测出发酵过程中各种有机酸的积累。不同培养方式的结果表明用甘油代替葡萄糖作为细菌生长的碳源可减少乙酸的积累,降低其对细菌生长和外源蛋白表达的抑制作用,从而更易实现重组大肠杆菌的高表达、高密度培养。
杨如燕
李民
陈常庆
关键词:
RP-HPLC
高密度发酵
基因工程菌高密度发酵液中碳源物质甘油的定量检测及其浓度的优化控制
被引量:26
1999年
比较了高碘酸氧化法、铜离子络合法、高压液相色谱法和甘油激酶法四种不同的方法定量测定重组工程菌YK537/pSB-TK高密度发酵液中甘油(作为细菌生长的碳源物质)的浓度,发现甘油激酶法可以排除发酵液中其他物质的干扰,精确测定甘油的含量。在此基础上对发酵培养基中甘油的浓度进行了优化,结果表明,甘油浓度控制在较低的水平有利于菌体密度的提高。在5L自动发酵罐中,控制甘油浓度在5g/L左右,经20h的培养,最终细菌密度达到120OD600(相当于48gDCW/L),重组蛋白rhTNFα的表达量占细菌总蛋白的30%左右。
杨如燕
李民
陈常庆
关键词:
重组大肠杆菌
高密度发酵
甘油
肿瘤坏死因子
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