杨书玲
- 作品数：7 被引量：29H指数：3
- 供职机构：西北农林科技大学农学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 超声辅助提取高效液相色谱法检测小麦籽粒中杀雄嗪酸的残留
- 朱启迪张改生赵新亮张新钵杨书玲
- 关键词：WHEAT
- 文献传递
- 小麦TaPDK基因的克隆、原核表达及纯化
- 植物雄性不育与能量代谢正常与否密切相关，丙酮酸是能量代谢途径中极为重要的能源物质，而丙酮酸脱氢酶激酶(PDK)在高等生物的能量代谢调节中发挥着重要的作用。本研究首先选取小麦花药为试验材料测定了几种供试材料中的丙酮酸含量，...
- 杨书玲
- 关键词：小麦原核表达蛋白纯化WESTERNBLOT
- 文献传递
- 超声辅助提取高效液相色谱法检测小麦籽粒中杀雄嗪酸的残留被引量：4
- 2012年
- 建立了高效液相色谱法(HPLC)检测小麦籽粒中化学杂交剂SQ-1主成分杀雄嗪酸残留的方法。以75%乙醇为提取剂,正反萃取净化;采用Diamonsil C18不锈钢柱,以甲醇-0.5%(NH4)2HPO4溶液(60∶40,V/V,pH 2.5)为流动相,检测波长283 nm,流速1.0 mL/min。结果表明:化学杂交剂SQ-1主成分杀雄嗪酸在0.75～25.0 mg/L范围内线性关系良好,相关系数r=0.9999,在3个添加水平(1.0,5.0和10.0 mg/kg)范围内,平均加标回收率在84.2%～95.0%之间,相对标准偏差为1.0%～3.3%,检出限为0.075 mg/L。
- 朱启迪张改生赵新亮张新钵杨书玲
- 关键词：小麦高效液相色谱
- 三例小麦细胞质雄性不育系线粒体DNA的扩增片段长度多态性分析被引量：2
- 2013年
- 细胞质雄性不育是小麦杂种优势利用的重要途径,为了鉴定3例小麦雄性不育系的细胞质类型,对其线粒体DNA(mtDNA)进行扩增片段长度多态性(Amplified fragment length polymorphism,AFLP)分析。文中利用差速离心法和不连续蔗糖密度梯度超速离心法提取纯化小麦线粒体。结果表明:通过该提取方法获得的mtDNA,其质量和纯度能够满足PCR反应和遗传学分析。在64对选扩引物中,筛选到了4对特异性引物,其中引物E1/M7在ms(Kots)-90-110不育系扩增出3条特异条带;引物E4/M2在ms(Ven)-90-110不育系扩增出2条特异条带;引物E7/M6在ms(S)-90-110不育系中扩增出2条特异条带;引物E6/M4在ms(Kots)-90-110不育系中扩增出2条特异条带。这些特异引物可以用来作为鉴定具有粘果山羊草Aegilops kotschyi、偏凸山羊草Ae.ventricosa、斯卑尔脱小麦Triticum spelta 3类不育细胞质型小麦雄性不育系的细胞质分子标记,为研究小麦细胞质雄性不育机理奠定了分子基础。
- 朱启迪张新钵Ejaz M张改生车会学王书平宋齐鲁杨书玲张龙雨
- 关键词：小麦细胞质雄性不育线粒体DNA扩增片段长度多态性分子标记
- 小麦TaPDK基因的序列分析、原核表达及纯化被引量：7
- 2013年
- 为研究TaPDK蛋白在小麦生理型雄性不育过程能量代谢途径中的调控机制。本试验提取小麦花药总RNA并反转录为cDNA,根据GenBank报道的已知小麦PDK基因序列设计引物,扩增TaPDK基因的编码区,采用生物信息学方法对其进行序列分析与功能预测,得出TaPDK的ORF为1095bp,编码364个氨基酸,蛋白分子量为41kD。进一步构建原核表达载体PET23d-PDK,转化到大肠杆菌表达菌种E.coli BL21(DE3)中进行优化表达,融合蛋白经SDS-PAGE电泳和Western blot验证后利用亲和层析柱初步纯化,针对原核表达过程中出现的非特异蛋白,采用切胶处理的方法进行二次纯化。原核表达结果表明IPTG可诱导一个分子量约40kD的特异蛋白,且主要以包涵体的形式存在,优化表达条件为:28℃、0.8mmol.L-1IPTG、150r.min-1诱导表达4h,表达产物经两次纯化得到2mg的目的蛋白,为下一步制备多克隆抗体、寻找互作蛋白奠定基础。
- 杨书玲张龙雨张改生桑青刘红占朱启迪张新钵赵新亮
- 关键词：小麦原核表达蛋白纯化WESTERNBLOT
- 小麦雄性不育系中TaPDC-E1α及其调节酶基因的表达特征
- 张龙雨袁蕾杨书玲张改生王俊生宋瑜龙
- 关键词：WHEATPDPPHOSPHORYLATIONSITE
- 小麦雄性不育系中TaPDC-E1α及其调节酶基因的表达特征被引量：15
- 2011年
- 为进一步研究杀雄剂SQ-1诱导小麦雄性不育的机制,采用电子克隆的方法分离TaPDC-E1α基因,并利用半定量RT-PCR技术分析该基因及其调节酶基因PDK和PDP的表达特性。结果表明,TaPDC-E1α基因编码388个氨基酸,具有TPP保守结构域,可能存在2个丝氨酸磷酸化位点;与可育系相比,TaPDC-E1α基因在生理型不育系和遗传型不育系中表达下调;PDK基因在生理型不育系中表达下调,而在遗传型不育系中表达上调;PDP基因在可育系及不育系中的表达趋势无明显变化。表明经杀雄剂SQ-1诱导形成的生理型不育系在败育过程中其能量代谢途径更容易受到影响,推测对PDK基因进行调节的上游信号机制在小麦生理型不育系与遗传型不育系中可能不一致。
- 张龙雨袁蕾杨书玲张改生王俊生宋瑜龙赵卓军牛娜马守才
- 关键词：小麦PDP磷酸化位点
