杜溪乔 作品数:14 被引量:35 H指数:4 供职机构: 哈尔滨市疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 黑龙江省卫生厅科研项目 哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目 哈尔滨市科技攻关计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
有效分离甲型流感病毒方法的探讨 2014年 目的有效分离甲型流感病毒,提高病毒分离率。方法选择在2012年10月-2014月5月期间,经实时定量荧光PCR(real-time PCR)检测为甲型流感病毒阳性的咽拭样品,并采用MDCK细胞进行病毒分离;对血凝素(HA)滴度<8的一代培养物分别进行原倍、2倍、5倍、10倍稀释后进行传代培养,比较不同稀释度传代培养物血凝实验效果。结果 2倍稀释培养物传代培养后,血凝实验效果分别与其他3种进行比较,差异有统计学意义。结论甲型流感病毒分离中,对培养物进行2倍稀释后病毒分离效果最好。 杜溪乔 任莉娜 范荣军 王宇 怀清洁 梁爽关键词:流感病毒分离 一种便携式恒温细胞转运箱 一种便携式恒温细胞转运箱,它涉及一种细胞转运箱。本实用新型的目的是为了解决现有细胞转运箱的温度不易控制,细胞易受污染,不便携的问题。本实用新型包括箱体、电源装置、控温装置、加热装置和制冷装置,并通过设置在箱体内的照明灯提... 任莉娜 杜溪乔 张炳丽文献传递 2012年哈尔滨市手足口病实验室检测结果分析 2015年 目的了解哈尔滨市2012年手足口病病原特点。方法采用Real time RT-PCR对2012年采集的粪便、咽拭子、肛拭子等标本检测肠道病毒、CoxA16、EV71。结果共检测手足口标本1046份,肠道病毒阳性676份(64.6%),EV71阳性83份(7.9%),CoxA16阳性489份(46.7%),其他肠道病毒104份(15.3%);阳性标本中,男性阳性382份(56.5%),女性阳性294份(43.5%);全年6~7月份为高峰,肠道病毒感染主要集中于5岁以下儿童,占阳性标本的89.9%。结论 5岁以下儿童是手足口病感染的主要人群,2012年哈尔滨市手足口主要流行株为CoxA16,而EV71和其他HEV也同时存在。 张炳丽 宋晓琳 怀清杰 唐道洲 梁爽 王宇 杜溪乔关键词:手足口病 肠道病毒 COXA16 EV71 A组轮状病毒G3型哈尔滨地方株VP7基因序列分析 被引量:4 2010年 目的:了解我国A组轮状病毒G3型哈尔滨地方株与标准株及国内外部分地区G3型地方株VP7蛋白基因序列的差异,为轮状病毒疫苗在我国东北地区的研发与应用提供资料。方法:通过一步法RT-PCR获得了6株轮状病毒哈尔滨地方株VP7蛋白的cDNA片段,,对其进行扩增、克隆、测序,用DNASTAR生物软件进行序列分析。结果:6株哈尔滨地方株VP7蛋白推导氨基酸序列同源性99.4%~100%;与G3标准株Crw-8的同源性为94.2%;与G1、G2、G4标准株比对变异较大(75.2%~82.2%);哈尔滨地方株氨基酸序列在aa108、aa266、aa268、aa278位点的变异完全相同。结论:6株轮状病毒G3型哈尔滨地方株来源于相同的一支G3型轮状病毒毒株。 任莉娜 李萍 张崇华 梁英 怀清杰 杜溪乔 刘晓慧关键词:A组轮状病毒 G3 VP7蛋白 哈尔滨市G9型A组轮状病毒VP7基因序列分析与探讨 被引量:1 2013年 目的了解哈尔滨市G9型A组轮状病毒与国内外部分地区G9型毒株VP7基因序列遗传与变异的差异,丰富我国G9型A组轮状病毒VP7基因序列的基础资料。方法通过一步法RT-PCR获得了1株G9型A组轮状病毒VP7蛋白的cDNA片段,对其进行扩增、克隆、测序,用DNASTAR生物软件对其进行序列分析,同时采用参比毒株分组的方法进行序列比对。结果该G9型哈尔滨地方株VP7基因为1 061个碱基,推导326个氨基酸;与中国北京株BJ-CR531进行氨基酸序列比对,一处变异位点在aa221[丝氨酸(Ser)→甘氨酸(Gly)],发生在C区;在分组比对中,哈尔滨G9型毒株所在组的标志性位点在aa8和aa65,均是由丙氨酸(Ala)替代苏氨酸(Thr)。结论哈尔滨G9型毒株所在组的aa8和aa65位点可能成为中国地区A组轮状病毒G9型这一进化分支的关键变异位点。 任莉娜 杜溪乔 王建 张炳丽 李晓鹏关键词:A组轮状病毒 VP7基因 MDCK细胞生长液优化配方的研究 被引量:4 2013年 目的:比较三种不同配方的细胞生长液培养MDCK细胞效果。方法:使用不同配方的细胞生长液,在其他培养条件相同的情况下培养细胞并比较培养效果。结果:使用优化配方的细胞生长液培养MD-CK细胞,在细胞贴壁情况和细胞形态方面优于其它两种配方,有统计学意义。结论:优化后细胞生长液更适合本实验室流感病毒分离的实际工作需要。 杜溪乔 任莉娜 王宇 刘晓慧 梁爽 怀清杰关键词:MDCK细胞 一种MDCK细胞改良传代方法 一种MDCK细胞改良传代方法。它是在MDCK细胞(培养瓶规格:T-75)传代消化过程中,通过3次更换消化液(EDTA-胰酶),前2次消化液作用时间为1min,第3次消化液作用时间因细胞消化状态而定,每次加入1mL消化液,... 任莉娜 张崇华 杜溪乔文献传递 哈尔滨市新甲型H1N1流感病原学及基因特性研究 被引量:3 2014年 目的研究哈尔滨市新甲型H1N1流感病原学和基因特征,为流感防控提供实验室依据。方法收集哈尔滨市流感样病例标本,进行病毒分离和型别鉴定,选取新甲型H1N1流感流行株进行血凝素基因片断的核苷酸序列测定,构建系统进化树。结果 2009年-2012年哈尔滨市流感流行株分别为新甲型H1N1、季H3、季H1和乙型,2009年-2011年新甲型H1N1流感病毒HA基因核苷酸序列的同源性为97.7%~99.9%,与国际疫苗株的同源性为98.0%~99.4%。结论自2009年以来,哈尔滨市新甲型H1N1与季节性流感病毒交替成为流感优势流行株,其基因序列同源性较高,但随时间推移也在发生变化。序列同源性和进化关系表明疫苗可以给人群提供一定程度的保护。 怀清杰 王宇 梁爽 范荣军 任莉娜 杜溪乔关键词:流感病毒 甲型H1N1 2007-2012年哈尔滨地区G1型A组轮状病毒VP7基因变异分析 被引量:5 2014年 目的 了解哈尔滨地区G1型A组轮状病毒VP7基因变异特点.方法 选取2007-2012年哈尔滨地区33株G1型A组轮状病毒标本,采用半巢氏PCR进行G1型鉴定,并对VP7基因进行克隆测序.采用DNASTAR软件对序列进行分析及进化树的绘制.结果 33株哈尔滨地方株VP7基因均为1062个碱基,推导氨基酸序列同源性95.7%~100%;33株哈尔滨地方株根据进化树分为四簇,其中Ⅰ簇17株,Ⅱ簇12株,Ⅲ簇、Ⅳ簇各2株.在氨基酸水平上,Ⅰ簇与其他三簇的整体差异位点为aa75(V→I),Ⅱ簇哈尔滨地方株变异比较活跃,Ⅱ簇、Ⅲ簇哈尔滨地方株具有一定的中国地方性,Ⅳ簇参考株均来自东南亚地区;2007年的哈尔滨地方株VP7蛋白变异位点最多,2008年次之,2010年-2012年哈尔滨地方株主要集中在Ⅰ簇.结论 33株轮状病毒G1型哈尔滨地方株可分为四个分支,Ⅰ簇是优势分支,且随着监测年份的变化Ⅰ簇所占构成比逐渐增加. 任莉娜 杜溪乔 王建 王宇 张炳丽 宋晓琳关键词:A组轮状病毒 VP7基因 2012年-2016年秋冬季节哈尔滨地区儿童呼吸道病毒感染病原谱分析 被引量:6 2017年 目的初步了解哈尔滨市秋冬季节儿童呼吸道病毒感染病原情况,探讨哈尔滨市儿童常见呼吸道病毒病原谱的构成。方法采用real-time PCR,对2012年-2016年每年10月-次年3月采集的900份儿童流感阴性样品进行呼吸道合胞病毒(RSV)、人偏肺病毒(h MPV)、副流感病毒3型(PIV-Ⅲ)、人呼吸道腺病毒(Ad V)、人博卡病毒(h Bo V)及鼻病毒(HRV)6种病毒的检测。结果被检测的900份咽拭子样本中,检出病毒感染阳性总数为196份,总阳性率为21.78%,其中各项单种病毒感染检出率由高到低依次为Ad V(6.66%)、PIV-Ⅲ(6.00%)、RSV(4.89%)、h MPV(4.11%)以及h Bo V(0.33%),其中HRV未检出。2种病毒混合感染阳性为5份,即1份PIV-Ⅲ与RSV混合感染,1份PIV-Ⅲ与h Bo V混合感染,3份RSV与Ad V混合感染。结论哈尔滨地区2012年-2016年秋冬季节,上述病毒总检出率低于南方地区;儿童感染呼吸道病毒每年10月、次年3月以Ad V为主;11月以PIV-Ⅲ为主;12月-次年1月以流感为主,2月呼吸道病毒感染呈多样性;总体阳性患儿无性别差异。 杜溪乔 任莉娜 王宇 张崇华 梁爽 王建关键词:儿童 呼吸道感染