李明谦
- 作品数：15 被引量：52H指数：4
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- 红松松子壳多糖对HepG2细胞增殖的影响
- 2012年
- 红松松子壳中的酸性多糖具有抗病毒,提高机体免疫力等功效,是红松松子壳的主要活性成分。本实验旨在探讨红松松子壳多糖(Pinus koraiensis Pinon Shell Polysaccharides,PPSP)在体外对人肝癌细胞HepG2增殖的影响。
- 李明谦张鹏官员房希碧马强郝林琳刘松财
- 关键词：壳多糖人肝癌细胞细胞增殖酸性多糖抑制率离子交换层析
- 猪干扰素α1与胸腺肽α1融合蛋白连接肽的初步筛选被引量：1
- 2012年
- 猪α干扰素具有广谱抗病毒活性,且具有毒副作用小、速效多能的特点。胸腺肽是28个氨基酸的多肽,无种属特异性,能够增强NK细胞功能,连续诱导T细胞分化、发育和成熟,提高机体免疫力。医学临床表明,干扰素与胸腺肽具有协调和互补作用,联合应用优于单独使用,且具有更低的毒副作用。本研究拟利用基因工程方法将猪干扰素α1(poIFN-α1)
- 张鹏李明谦郝林琳官员房希碧马强刘松财
- 关键词：胸腺肽干扰素Α融合蛋白连接肽基因工程方法种属特异性
- 靶向S基因siRNA抑制猪血凝性脑脊髓炎病毒在N2a细胞中的复制被引量：3
- 2011年
- 以猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)的S糖蛋白基因作为靶基因,设计并体外转录合成2对小干扰RNA(siRNA),分别为SS1和SS2。将SS1和SS2分别转染小鼠成神经瘤细胞(N2a)并在转染后接种HEV,48h后通过间接免疫荧光、血凝试验、TCID_(50)测定以及荧光定量PCR等方法对SS1和SS2抑制HEV在N2a细胞中增殖的效果进行了研究。结果显示,转染细胞感染HEV48 h后,SS1和SS2干扰组细胞出现的绿色荧光明显少于对照组,血凝效价分别是对照组的1/18和1/32,病毒感染滴度分别是对照组的1/28和1/103,两干扰组的HEV基因组的拷贝数分别是对照组的76%和84%。以上结果表明,SS1和SS2均对HEV在N2a细胞中的复制具有不同程度的抑制作用,其中以SS2的抑制作用最为显著。该项试验研究结果不仅为HEV致病机制的研究奠定基础,同时可为抗HEV新型药物及抗病育种新靶点的设计奠定分子生物学基础。
- 兰云刚赵魁王改丽李明谦贺文琦陆慧君陈克研岳占碰高丰
- 关键词：S基因SIRNA
- 一种抗原特异性Treg及其制备方法和应用
- 本发明适用于生物技术领域，提供了一种抗原特异性Treg的制备方法和应用，该制备方法包括以下步骤：制备受体tolDC；制备含有供体MHC‑I分子mRNA的全部CDS区序列的带有T7启动子的质粒，然后应用体外转录技术制备供体...
- 李明谦吕国悦张鹏
- GH基因敲减小鼠模型的建立与研究
- 2012年
- RNA干扰(RNAi)技术是利用一些19~23 nt的小双链RNA来高效、特异地阻断体内特定基因的表达,并促使mRNA降解,使其无法翻译出目的蛋白,从而使细胞或个体表现出特定基因缺失的表型,RNA干涉是一种典型的转录后基因沉默。目前,RNA干扰技术是一种最有效的鉴定哺乳类基因功能的工具,并被当作确认靶基因的标准方法,在基因功能研究中。
- 房希碧官员马强李明谦陈傲第郝林琳刘松财张永亮
- 关键词：转录后基因沉默GH基因基因功能研究转基因动物目的蛋白
- 部分小型猪与大型猪IGF-1基因的SNP分析被引量：11
- 2011年
- 利用PCR-SSCP技术对版纳微型猪、西藏小型猪、军牧猪和大白猪4个品种的IGF-1基因进行了多态性分析。结果表明,在外显子3上存在1个SNP(G201A),在外显子4上存在2个SNPs(A440G和T455C)。各SNP位点基因及基因型频率统计结果显示,在G201A位点,A为大型猪的优势等位基因;在A440G和T455C位点,AT为大型猪的优势等位基因,小型猪的上述2个位点均没有共同的总体特征;2个等位基因型分布差异极为显著(P<0.01),西藏小型猪的多态信息含量最低,而军牧猪的杂合程度最高。
- 郎松邓景致郝林琳曾养志王佳李明谦程美玲刘松财
- 关键词：IGF-1基因PCR-SSCPSNP
- 乳铁蛋白基因启动子元件调控效应分析被引量：1
- 2012年
- 本试验先后进行2轮载体构建及转染试验,对牛乳铁蛋白基因启动子元件调控效应进行了分析。首先进行第1轮载体构建及转染试验:采用PCR方法,利用4对引物从牛乳铁蛋白基因5′调控区-1 799向3′端依次缺失500bp进行调控序列扩增,将获得的扩增片段替换pEGFP-N1的CMV启动子,构建了4个重组载体,将重组载体转染牛乳腺上皮细胞(BMEC),经筛选获得稳定的单克隆细胞,测定并比较各组细胞的荧光强度。在以上试验基础上,为进一步精确确定牛乳铁蛋白基因启动子顺式调控元件序列,进行第2轮载体构建及转染试验,方法同第1轮。结果表明,牛乳铁蛋白基因上游调控序列-1 323～-1 372存在负调控元件,-1 372～-1 560存在正调控元件。
- 金晶许无恨李明谦张鹏马强房希碧官员张英于浩郝琳琳刘松财
- 关键词：乳铁蛋白稳定转染调控元件
- 温敏型缓释剂的合成及其对GHRP-6在小鼠体内缓释性能的研究
- 2012年
- 近年来温敏型缓释材料以其独特的温度敏感性受到国内外的关注国。这种缓释材料针对一些每天都需注射或一天需多次注射的多肽和蛋白类药物显示出其独特的优势,大大降低了病人的经济成本,同时也减少了持续给药的痛苦,具有广阔的应用前景。本实验采用开环聚合法自行合成PLGA-PEG-PLGA,在温度低于体温时。
- 官员房希碧马强李明谦张鹏郝林琳刘松财
- 关键词：温敏型缓释材料蛋白类药物缓释性能缓释剂生长激素释放肽
- 猪干扰素α1与胸腺肽α1融合蛋白原核表达系统的建立被引量：2
- 2012年
- 依据GenBank已发表的猪干扰素α1（poIFN-α1）成熟肽基因序列,胸腺肽α1（THY-α1）蛋白序列及Escherichia coliB密码子使用频率表,优化并人工合成poIFN-α1和THY-α1基因,利用SOE-PCR法在poIFN-α1和THY-α1之间设计1个13肽Linker。将融合基因克隆至pRSFDue-t 1表达载体,转化BL21（DE3）感受态,37℃培养至菌液OD600为0.6~0.8,IPTG（0.5 mmol/L）诱导,20℃培养12h,SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果表明：目的蛋白为菌体内可溶性表达,经强阴离子交换层析和疏水层析纯化获得高纯度poIFNα1-THYα1融合蛋白。
- 张鹏李明谦郝林琳马强张英刘松财
- 关键词：胸腺肽Α1融合蛋白
- 热应激对西门塔尔牛精液品质及顶体反应相关酶活力的影响被引量：7
- 2011年
- 为探讨夏季高温环境对西门塔尔种公牛精液品质和顶体反应相关酶活力的影响,选取年龄和健康状况相近,采精正常的西门塔尔成年种公牛30头,对其精液品质和顶体反应相关酶活力等指标按照春(3月-5月),夏(6月-8月),秋(9月-11月),冬(12月-2月)4个季节进行分组实验,并进行统计分析。结果表明:(1)夏季热应激可造成西门塔尔种公牛精液品质显著下降。采精量略有增加但随季节变化不明显(p>0.05);精子活力在夏季显著低于秋季(p<0.05),极显著低于春季和冬季(p<0.01);精液的密度夏季与秋、冬两季差异显著,极显著低于春季(p<0.01);夏季精子的顶体完整率和畸形率与春季、秋季和冬季存在显著差异,说明季节温度变化对西门塔尔种公牛精子顶体完整性和精子畸形有明显的影响。(2)夏季热应激可以使西门塔尔种公牛的几种重要顶体反应相关酶的活力降低。
- 张莹郝林琳李明谦张嘉宝刘松财
- 关键词：西门塔尔种公牛热应激精液品质酶活力
