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肝癌细胞株中动力素kinectin基因mRNA的表达及临床意义探讨被引量：2: 2009年; 赵飞兰晁耐霞李日伦罗彬陈芳谢小薰罗国容; 关键词：N基因细胞株血清学鉴定肝癌重组克隆

GCF2基因片段原核表达载体的构建及其表达: 目的构建肝癌相关抗原GCF2基因片断(323～1234 bp)原核表达重组质粒,并在大肠杆菌中表达。方法提取人肝癌组织总RNA,通过逆转录酶合成cDNA；根据GenBank公布的GCF2基因cDNA序列设计引物,利用...; 肖飞晁耐霞曾庆堂李日伦蒋日婷罗国容; 关键词：原核表达

动力素kinectin基因mRNA在7404肝癌细胞株的表达及意义: 2012年; 目的研究动力素作为肝癌相关抗原其在肝癌细胞株中的表达情况,评价其作为分子肿瘤标记以及肿瘤免疫治疗特异性靶位的可能性。方法运用RT-PCR技术检测国内建株的肝癌细胞株BEL-7404 kinectin基因(D2剪接区)mR-NA的表达,并与肝癌组织、相应癌旁肝组织、正常肝组织比较。结果肝癌细胞株BEL-7404中kinectin基因(D2选择剪接区)呈强阳性表达,肝癌组织中也呈较强的阳性表达,癌旁肝组织则表达呈弱阳性。结论 kinectin基因可作为肝癌诊断的辅助分子标记,并具有作为肝癌免疫治疗特异性靶位的潜在价值。; 赵飞兰晁耐霞李日伦黄天明罗国容; 关键词：RT-PCR技术

瑶药小钻乙酸乙酯提取物抗类风湿关节炎作用及相关机制探讨被引量：15: 2017年; 目的探讨瑶药小钻乙酸乙酯提取物抗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)作用及相关机制。方法取雄性SD大鼠70只,随机分为正常对照组、模型对照组、雷公藤组、地塞米松组、小钻乙酸乙酯提取物低、中、高剂量组。建立胶原性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠模型,连续灌胃给药28 d,观察大鼠状态、体重、足肿胀度、关节炎指数、踝关节病变;采用ELISA法测定血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;采用实时荧光定量PCR法检测关节滑膜组织NF-κB p65 mRNA表达。结果小钻乙酸乙酯提取物能显著抑制CIA大鼠足肿胀,降低血清IL-1β、IL-6、TNF-α及滑膜组织NF-κB p65 mRNA水平,作用强于雷公藤,弱于地塞米松,与剂量相关。结论小钻有一定抗RA作用,其机制可能与NF-κB p65转录有关。; 覃朗程娅莫单丹李日伦周小雷唐炳兰; 关键词：长梗南五味子类风湿关节炎核转录因子-ΚB 瑶药

Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏的树突状细胞瘤苗对肝细胞癌瘤内CD25^+Foxp3^+Treg细胞的影响: 2014年; 目的:观察注射Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏的骨髓来源树突状细胞(bone marrowderived dendritic cells,BMDCs)瘤苗对小鼠肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)瘤内CD25+叉头盒转录因子P3(forkhead box p3,Foxp3)+调节T淋巴细胞(regulatory T cells,Tregs)浸润的影响.方法:在粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulatingfactor,GM-CSF)和白介素-4(interleukin-4,IL-4)诱导下体外扩增BMDCs,使用Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白体外致敏BMDCs制备瘤苗,荧光免疫化学染色和FACS检测致敏前后BMDCs CD11c、CCR7、CD80和CD86的表达变化.使用Hepal-6细胞皮下注射的方法制备小鼠(C57BL/6J)HCC模型,成瘤小鼠分组注射Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏的BMDCs瘤苗(足垫部和瘤内,每7 d注射1次,共2次),并另设对照(空白对照组、BMDCs组和Hepal-6细胞裂解蛋白组).在治疗结束后9 d获取组织标本,免疫荧光组织化学染色和FACS检测瘤苗注射后肿瘤内CD8+T细胞和CD25+Foxp3+Tregs细胞的浸润情况.结果:光镜和扫描电镜显示:GM-CSF和IL-4在体外诱导扩增的BMDCs具有树突状细胞特征性的形态特征,且免疫细胞化学染色显示:该细胞表达CD11c,CCR7,CD80和CD86.使用Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏的BMDCs组,与对照组(BMDCs组和Hepal-6细胞裂解蛋白组)相比该组细胞CD11c(67.2±4.49 vs 52.4±5.20,58.4±4.43,P<0.01),CCR7(65.4±5.34 vs 45.9±5.04,57.0±3.46,P<0.01),CD80(62.9±4.69 vs 46.9±4.75,54.4±3.47,P<0.01)和CD86(73.3±3.58 vs 60.1±2.98,63.7±3.10,P<0.01)的表达均明显增高.使用Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏的BMDCs瘤苗为HCC荷瘤小鼠进行注射治疗,治疗后的检测结果显示:该组小鼠瘤内CD8+T细胞的浸润明显高于对照组(空白对照组、BMDCs组和Hepal-6细胞裂解蛋白组)(55.0±4.11 vs 38.2±3.34,44.6±4.29,45.6±4.92,P<0.01),而同时瘤内CD25+Foxp3+Tregs细胞的浸润则明显低于相应对照组(0.37±0.028 vs 1.31±0.020,0.77±0.0; 李日伦周爽秦杰梁春敏罗国容; 关键词：骨髓来源树突状细胞肝细胞癌

人体解剖学教学中学生存在的问题及对策: 2008年; 因教学改革需要对我院2007级护理专业233名学生进行了人体解剖学教学问卷调查，结果显示：为将来打基础学习者占82．83％；对学习感兴趣者占77．68％；主动预习者占24．89％，及时复习、归纳者占5．58％；实验课学生出现心理障碍者占24．89％。结论：（1）大部分学生对人体解剖学学习动机明确，兴趣较高；（2）部分学生没有掌握带着问题学习的方法，学习尚缺乏足够的自觉性；（3）部分学生没有很好地掌握记忆规律及科学的复习方法；（4）部分学生在上人体解剖学实验课时出现心理障碍，需要疏导。; 阙玉玲李日伦; 关键词：人体解剖学学习动力自主学习能力心理反应

肝癌相关抗原Kinectin蛋白致敏树突状细胞诱导的CTL对肝癌细胞株杀伤作用的检测被引量：2: 2011年; 目的探讨肝癌相关抗原Kinectin基因重组蛋白Kinectin-MBP(MBP,麦芽糖结合蛋白)致敏树突状细胞(DCs)体外诱导特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)对肝癌细胞株的杀伤作用。方法体外基因工程的方法表达、纯化Kinectin-MBP。从正常人外周血中分离单个核细胞(PBMC),重组人粒细胞-巨噬细胞集落因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素4(rhIL-4)联合培养,诱导扩增DCs,并通过形态学、流式细胞术鉴定DCs。DCs经Kinectin-MBP致敏后,ELISA检测细胞上清液中IL-12和IFN-γ的含量;将致敏DCs与自体T淋巴细胞混合培养后,MTT法检测T细胞增殖的能力;同时诱导T细胞增殖转化为CTL,以此CTL为效应细胞,Kinectin表达阳性的肝癌细胞株bel-7404为靶细胞,LDH 4 h释放法检测CTL对肝癌细胞株的杀伤作用。结果体外重组蛋白技术成功表达、纯化出Kinectin-MBP。PBMC经rhGM-CSF和rhIL-4联合诱导,可成功培养出DCs。DCs经Kinectin-MBP致敏后上清液中IL-12和IFN-γ的分泌量明显增高,且刺激自体T细胞增殖的能力也显著增强;同时Kinectin-MBP致敏的DCs能明显诱导CTL的增殖,此CTL对Kinectin阳性的7404肝癌细胞株有较明显的杀伤作用,其杀伤率在效靶比为25∶1时达最高峰[为(65.00±1.47)%],显著高于其他对照组(均P<0.001)。结论体外诱导扩增的DCs经肝癌相关抗原Kinectin-MBP致敏后具有较强的刺激自体T细胞增殖的能力,且在体外可诱导同种CTL产生和增殖,后者对Kinectin阳性的7404肝癌细胞株具有较强的杀伤效应。该实验为将Kinectin蛋白运用于以DCs为基础的肝癌临床免疫治疗奠定了基础。; 赵飞兰晁耐霞李日伦莫发荣黄天明肖飞谢小薰罗国容; 关键词：CTL

Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏骨髓来源树突状细胞瘤苗的抗肿瘤免疫学效应: 2014年; 目的：研究Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏的骨髓来源树突状细胞（BMDCs）的抗肿瘤免疫生物学效应.方法：用Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏BMDCs制成瘤苗,瘤苗的效应通过C57BL/6J小鼠肝细胞癌模型验证.皮下接种Hepal-6细胞8d后,成瘤小鼠随机分实验组,足垫部皮下注射Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏BMDCs;无血清RPMI-1640注射组、BMDCs注射组和单纯Hepal-6细胞裂解蛋白致敏BMDCs注射组.取肿瘤组织分离成细胞悬液,FACS检测CD11c＋细胞、CCR7＋细胞、CD80＋细胞和CD86＋细胞;取淋巴结、脾、肿瘤冷冻切片并采用免疫组织化学检测淋巴结、脾、肿瘤内Foxp3＋细胞浸润的改变;ELISA检测瘤内转化生长因子-p1（TGF-β1）、白细胞介素-10（IL-10）、γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）的表达.结果：实验组肿瘤组织比各对照组有更多的CD11c＋细胞、CCR7＋细胞、CD80＋细胞和CD86＋细胞浸润;与各组对照相比较,实验组Foxp3＋细胞在淋巴结、脾、肿瘤内浸润明显减少;实验组细胞因子TGF-β1、IL-10低于各对照组,IFN-γ、IL-2则高于各对照组.结论：Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏的BMDCs瘤苗能促进DCs在瘤内浸润和成熟,减少Foxp3＋细胞在肿瘤内的浸润,下调免疫抑制细胞因子TGF-β1、IL-10和上调免疫促进因子IFN-γ、IL-2分泌,有较强的抗肿瘤免疫生物学效应.; 李日伦周爽秦杰张浩如梁春敏罗国容; 关键词：骨髓来源树突状细胞免疫调节性T细胞

医学高职高专组织学和病理学显微实训课程整合的研究与实践被引量：6: 2010年; 实验课程是培养医学各专业学生综合应用能力和创新能力的实践课程，但在当前，很多医学高职高专院校仍在采用“以课程为基础建立实验室，以教研室管理实验室”的模式。其显著的弊端在于，一是使在内容上原本有紧密联系、在实验手段和方法上有极大共性的实验课程存在严重的脱节和各自独立；; 李日伦王密赖燕燕蒋韵靓苫君玲王桂秋; 关键词：课程整合高职高专病理学组织学实训实践课程

Kinectin-麦芽糖结合蛋白融合蛋白致敏树突状细胞对T细胞分化格局的改变: 2011年; 背景:Kinectin作为树突状细胞瘤苗可运用于肝癌临床免疫治疗。目的:检测kinectin-麦芽糖结合蛋白融合蛋白致敏的树突状细胞刺激T细胞亚群的分化情况。方法:运用免疫组化法检测kinectin-麦芽糖结合蛋白孵育的树突状细胞刺激增殖的T细胞中CD4+、CD8+T细胞亚群活化情况,同时设立麦芽糖结合蛋白组、非致敏树突状细胞组及普通培养T细胞组作为比较。结果与结论:Kinectin-麦芽糖结合蛋白致敏树突状细胞刺激的T细胞组CD8+T细胞明显高于麦芽糖结合蛋白孵育树突状细胞刺激的T细胞组、非致敏树突状细胞刺激组及普通培养T细胞组(P<0.05);各组CD4值之间、CD4/CD8值之间比较,差异无显著性意义(P>0.05)。经Kinectin-麦芽糖结合蛋白融合蛋白致敏的树突状细胞能有效刺激自体CD8+T淋巴细胞的增殖,Kinectin-麦芽糖结合蛋白作为肝癌相关抗原可通过致敏树突状细胞发挥较明显的抗肿瘤功能。; 赵飞兰晁耐霞李日伦曾庆堂黄天明莫发荣肖飞罗国容; 关键词：树突状细胞 T细胞亚群 CD8

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