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骨髓间充质干细胞对重症急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡的保护作用: 目的：　　1.建立重症急性胰腺炎胰腺腺泡损伤的动物模型。　　2.建立一种分离、纯化、扩增，CM-Dil标记骨髓间充质干细胞方法。　　3.通过骨髓间充质干细胞移植治疗胰腺腺泡损伤的大鼠，评价其对重症急性胰腺炎大鼠胰腺功能的...; 李文生; 关键词：急性重症胰腺炎骨髓间充质干细胞胰腺腺泡功能保护作用; 文献传递

胱硫醚-β-合酶启动子区CpG岛超甲基化导致基因表达及功能的下调: 2012年; 目的探讨胱硫醚-β-合酶（CBS）启动子区的超甲基化与基因表达及功能的相关性。方法通过结合重亚硫酸盐处理的直接测序、实时定量聚合酶链反应（PCR）、荧光偏振免疫法及免疫组织化学等技术对不同叶酸浓度（25、150nmol／L）下培养的人正常结肠黏膜上皮细胞株（NCM460）细胞和患者组织样本（包括肿瘤组织及相应的正常组织95例）中CBS基因启动子区CpG岛超甲基化与基因表达及功能进行研究。结果低叶酸浓度培养下NCM460细胞中CBS基因的表达下调，检测高甲基化组（H—M组：〉41．7％，83例）和低甲基化组（L．M组：≤41．7％，107例）组织样本中CBS基因表达水平，两组差异有统计学意义（P〈0．01）。在NCM460细胞内，CBS基因的下调能够导致同型半胱氨酸积聚，检测H-mRNA组（〉3．19，45例）和L-mRNA组（≤3．19，40例）患者的血清中同型半胱氨酸的水平，L-mRNA组患者血清中同型半胱氨酸的水平显著高于H-mRNA组。结论CBS启动子区的超甲基化极有可能导致CBS基因表达水平的下调，影响细胞内的甲基代谢，进而参与结直肠癌的发生、发展等一系列病程。; 黄少雄涂小煌李文生宋京翔; 关键词：超甲基化基因表达

MEK5基因siRNA重组腺病毒表达载体的构建及其对MEK5的表达抑制被引量：1: 2011年; 目的构建人MEK5基因的小干扰RNA（siRNA）重组腺病毒表达载体,观察其在胃腺癌SGC7901细胞中对MEK5的表达抑制.方法设计并合成针对人MEK5基因3个不同部位siRNA靶点的模板DNA序列,以MluⅠ及XhoⅠ克隆入pRNAT-H1.1/Adeno穿梭载体中,将得到的重组穿梭质粒用PmeⅠ线性化后在大肠埃希菌BJ5183中与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1进行同源重组.将PacⅠ酶切鉴定正确的重组腺病毒质粒经乙醇沉淀后转染293A细胞,包装得到具有感染能力的pAd-MEK5-siRNA重组腺病毒.病毒体外转导人胃腺癌SGC7901细胞,Western印迹法检测其对MEK5表达的抑制.结果经酶切和测序鉴定均证实pAd-MEK5-siRNA重组腺病毒载体构建成功,其插入序列正确无误.Western印迹检测结果显示pAd-MEK5-siRNA2可抑制MEK5基因的表达,其有效抑制率达75.5 %.结论本研究成功地构建了针对人MEK5基因的siRNA重组腺病毒载体,为进一步深入研究MEK5基因在人胃腺癌细胞中的作用和功能奠定了基础.; 解燕川李文生黄俏佳; 关键词：腺病毒载体基因表达与调控

叶酸缺乏导致人正常结肠黏膜上皮细胞DNA甲基化状态的改变与结直肠癌的检测关系被引量：3: 2012年; 目的通过甲基化芯片对叶酸缺乏导致人正常结肠黏膜上皮细胞（NCM460）的DNA甲基化状态变化进行筛查，探讨相关位点与散发性结直肠癌发生的关系。方法借助NimbleGen公司的甲基化芯片，检测不同叶酸浓度（高叶酸浓度为150nmol／L，低叶酸浓度为25nmol／L）培养的NCM460细胞中基因启动子区CpG岛的甲基化状态，并通过结合重亚硫酸盐的测序方法在细胞和15例（男：8，女：7）结直肠癌患者的组织样本中对芯片的结果进行验证。结果从高叶酸浓度培养的NCM460细胞中筛选到了2680个发生了甲基化的CpG岛，从低叶酸组筛选到了3073个。在21号染色体上，17个基因启动子区CpG岛发生了超甲基化或去甲基化的改变，其中8个基因甲基化状态的改变可能与结直肠癌的发生相关。结论叶酸缺乏导致人NCM460的DNA甲基化状态改变可能与结直肠癌的发生相关。; 李文生涂小煌黄少雄解燕川宋京翔; 关键词：结直肠癌叶酸 DNA甲基化

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李文生