李容
- 作品数:5 被引量:2H指数:1
- 供职机构:湖南师范大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖南省自然科学杰出青年基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 斑马鱼ISL1蛋白多克隆抗体的制备被引量:1
- 2013年
- 目的为了进一步研究ISL1作为第二生心区心脏前体细胞的分子标志在心脏发育中的功能,需要获得ISL1蛋白并制备其抗体。方法根据已报道的ISL1基因序列,以斑马鱼mRNA为模板进行PCR扩增得到ISL1部分编码区序列,然后将其连接到pET-28a载体上获得原核表达载体。将重组质粒进行酶切测序鉴定,然后利用大肠杆菌E.coli BL21对该重组质粒进行表达。经过IPTG诱导,采用Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,将纯化的his-ISL1融合蛋白免疫新西兰大白兔制备ISL1多克隆抗体,并用Western Blot检测抗体效价。结果获得了ISL1原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗ISL1多克隆抗体。结论本实验为ISL1在斑马鱼心脏发育中的新功能的进一步研究奠定了基础。
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- 关键词:斑马鱼融合蛋白多克隆抗体
- H1N1流感病毒感染心肌细胞对Wnt信号途径的影响
- 为了揭示流感病毒H1N1通过Wnt信号调控心肌炎发生的致病机制,我们建立了A/PuertoRico/8/34(H1N1)流感病毒感染H9C2细胞模型,采用灭活的病毒感染H9C2细胞系作为对照组,通过细胞组织学形态和RT-...
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- 流感病毒致心脏发育异常的表观遗传分子机制研究
- 先天性心脏病(先心病)是一类严重危害人类健康的疾病,在新生儿中的发生率为4.05~12.3‰。环境因素与遗传因素是先天性心脏病发生的主要原因。其中,孕早期宫内病毒感染是最为重要的环境因素之一。临床流行病学调查表明,有15...
- 李容
- 关键词:先天性心脏病流感病毒表观遗传学分子机制胚胎发育
- 果蝇Domeless蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备研究
- 2013年
- 在果蝇(Drosophila melanogaster)的研究中发现Domeless接受器参与发育期间的JAK/STAT信号调节,在心脏疾病的发生机制中发挥重要作用.为了克隆Domeless,我们利用生物信息学选择果蝇Domeless基因抗原亲水区,将扩增出的PCR片段克隆到原核表达pET-28a载体中,转入E.coli(Escherichia coli)中后通过IPTG(Isopropylβ-D-thiogalactoside)诱导融合蛋白表达,Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,纯化后的His-Domeless融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.用Western blot检测抗体的效价和特异性.获得了Domeless原核表达重组融合蛋白以及高效价的、特异性兔抗Domeless多克隆抗体,为后续Domeless功能研究奠定了基础.
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- 关键词:果蝇原核表达多克隆抗体
- 利用切片免疫荧光技术研究Tbx5在小鼠胚胎心脏中的表达
- 2014年
- Tbx5参与转录因子的调控,对上肢及心脏发育起关键作用.通过对小鼠胚胎心脏组织切片厚度的选择、加入抗原修复液等试验条件的优化,建立了利用切片免疫荧光技术检测小鼠胚胎心脏中Tbx5的方法.结果显示,在胚胎发育的第11.5 d,Tbx5在整个心脏中都有表达,尤其在心房以及左心室中高表达.但在胚胎发育的第13.5 d,Tbx5只在心房和左心室中表达,在右心室中并不表达.揭示Tbx5的这种动态表达模式对于心脏的发育以及腔室分化是十分重要的.
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- 关键词:胚胎心脏