李士坤
- 作品数：7 被引量：29H指数：4
- 供职机构：郑州大学第二附属医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 8-Br-cAMP与顺铂对Eca-109细胞DNA polβ,wtp53基因表达及多药耐受蛋白的影响被引量：4
- 2003年
- 目的 :比较分化诱导剂 8 Br cAMP与基因毒性药物顺铂对Eca 10 9细胞DNApolβ及wtp5 3基因表达和多药耐受蛋白的影响。方法 :分别制备生物素和地高辛标记的polβ探针和生物素标记的野生型p5 3(wtp5 3)探针 ,并检测各探针灵敏度。将培养的人食管癌Eca 10 9细胞分组如下 :① 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②不加 8 Br cAMP的对照组 (C1组 ) ,①②组同时培养 4 8h ;③顺铂组 (Pt组 ) ;④不加Pt的对照组 (C2组 ) ,③④组同时培养 2 4h。应用原位杂交技术显示各组细胞polβ基因的表达。对①②及③组细胞进行polβ及wtp5 3双信号原位杂交 ,并应用多药耐受蛋白 (MRP)的免疫组化方法检测耐药性。结果 :生物素标记的polβ探针的杂交信号呈兰紫色细颗粒 ,分布于胞质 ;Br组信号弱于C1组 ,P <0 .0 5。Pt组的信号比C2组强 ,P <0 .0 5。Br组的MRP IR弱于C1组 ,P <0 .0 5 ;Pt组的多药耐受蛋白免疫反应性 (MRP IR)强于C2组 ,P <0 .0 5。地高辛标记的polβ探针的杂交信号呈橙色细颗粒 ,生物素标记的wtp5 3探针的杂交信号呈蓝紫色细颗粒 ,均分布于胞质。在双杂交信号细胞内C1组的橙色强于蓝紫色信号 ;而Br组的蓝紫色信号较明显 ,Pt组的橙色信号较C1组更显著 ,3组相比P皆 <0 .0 5。结论 :8 Br cAMP可下调polβ基因表达及耐药性 ,上?
- 郑乃刚李士坤吴景兰董子明
- 关键词：DNA聚合酶Β8-BR-CAMP顺铂WTP53ECA-109细胞
- 转化生长因子β1基因和细胞外信号调节激酶在胃癌中的表达和意义被引量：6
- 2002年
- 目的 研究胃癌组织中TGF β1、ERK 1及ERK 2的表达特点和意义。 方法 选取 6 7例胃癌标本 ,常规石蜡包埋行TGF β1、ERK 1及ERK 2免疫组织化学染色。 结果 TGF β1、ERK 1、ERK 2在胃腺癌、粘液癌和印戒细胞癌中过表达率无明显差异 ;Ⅲ /Ⅳ期、低分化、癌细胞浸润至深肌层或浆膜层和淋巴结转移的组织TGF β1、ERK 1、ERK 2过表达率明显高于Ⅰ /Ⅱ期、高分化、癌细胞未浸润至深肌层和淋巴结未转移组织 ,差异均有显著性意义。TGF β1、ERK 1、ERK 2在胃癌中的表达密切相关。 结论 TGF β1、ERK 1和ERK 2三者的表达与胃癌发生发展的生物学行为和预后可能有关 ,可作为重要的生物学标记物。
- 许春进刘华陈玉龙刘全忠李士坤
- 关键词：转化生长因子Β1细胞外信号调节激酶胃癌免疫组织化学基因表达
- 分化诱导剂对Eca-109细胞DNA聚合酶β及其相关基因表达的影响
- 目的：DNA聚合酶β在DNA的损伤修复中起重要作用，主要参与DNA碱基切除修复，一般不参与DNA的复制。有研究表明正常细胞中的DNA聚合酶β在整个细胞周期中都是低表达的，高表达的DNA聚合酶β可能在DNA合成中与其它DN...
- 李士坤
- 关键词：基因DNA聚合酶Β碱基切除修复ECA-109细胞分化
- 文献传递
- 人食管癌组织DNA聚合酶β基因表达水平及定位被引量：4
- 2003年
- 目的 :探讨人食管癌组织中DNA聚合酶 β基因 (polβ)表达水平及定位。 方法 :取 17例食管癌患者的癌组织、癌旁组织及其距癌灶 4～ 5cm处的正常组织。每块组织分 2等份 ,其中 1份常规石蜡包埋切片进行原位杂交 ,另 1份提取总RNA进行RNA斑点印迹 ,并以TLC扫描数值。结果 :蓝紫色杂交信号颗粒定位于胞质。弱信号见于正常组织的上皮基底细胞 ;癌旁组织的增殖细胞信号增强 ;癌组织分化较高的癌巢信号较弱 ;浸润的癌细胞信号强。原位杂交信号积分值与TLC扫描数值在癌、癌旁及正常组织中依次降低 (P <0 .0 5或P <0 .0 0 1)分别为 :癌组织 (32 .1± 7.8)和 (35 .8± 8.7) ,癌旁组织 (2 2 .1± 5 .3)和 (2 8.1± 6 .8) ,正常组织 (11.2± 2 .4 )和 (11.2± 2 .7)。结论 :人食管癌组织polβ基因呈高表达 ,DNA聚合酶 β较高表达可能是癌变早期事件。
- 郑乃刚李士坤吴景兰董子明
- 关键词：食管癌DNA聚合酶Β基因表达癌组织
- 人食管癌组织中DNA聚合酶β与XRCC1表达的相关性被引量：3
- 2003年
- 目的 :观察XRCC1及DNA聚合酶 β(POLB)在人食管癌、癌旁及相邻的正常组织内的表达。方法 :应用免疫组化方法对 17例食管癌患者的癌组织、癌旁组织及相邻的正常组织中POLB和XRCC1的免疫反应性 (IR)进行定位及表达水平的比较。结果 :POLB IR和XRCC1 IR在癌组织、癌旁组织及正常组织中依次减弱 (P <0 .0 1或P <0 .0 0 1) ,2者在上述组织中定位相似 ,且表达呈显著正相关 (P <0 .0 1)。结论 :POLB和XRCC1在癌旁组织表达的相对提高可能为癌变的早期事件 ;2者表达的定位近似 ,提示 2者在形态和功能上密切相关。
- 郑乃刚李士坤吴景兰董子明
- 关键词：食管癌DNA聚合酶Β癌组织
- 同一细胞非放射性双原位杂交信号显示技术被引量：4
- 2003年
- 目的 :探讨同一细胞内双原位杂交信号的显示技术。方法 :以地高辛标记的polβ探针加生物素标记的表皮生长因子受体 (EGFR)探针或生物素标记的wtp5 3探针对人食管癌Eca 10 9细胞同时进行原位杂交后 ,以anti Dig AP孵育 ,以AP Red为底物显色 ,杂交信号呈桔红色或桔黄色细颗粒。继之以SA AP孵育后以NBT/BCIP底物显色 ,杂交信号呈蓝紫色颗粒。结果 :在同一细胞内可见桔黄色和蓝紫色颗粒双杂交信号。结论 :应用非放射性双杂交信号的原位杂交技术可观察单个细胞内
- 郑乃刚王峰吴景兰李士坤张莹董子明
- 关键词：原位杂交技术非放射性地高辛标记食管癌
- 8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响被引量：9
- 2003年
- 目的 :探讨 8 Br cAMP及槲皮素等分化诱导剂对Eca 10 9细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响。 方法 :将培养的Eca 10 9细胞分为 3组 :①加 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②加槲皮素组 (Q组 ) ;③不加任何药物对照组 (C组 )。同时培养 4 8h ,将野生型DNApolβ的cDNA ,EGFRcDNA ,野生型 (wt)p5 3cDNA及c myccDNA分别制备了生物素 /地高辛标记的探针进行原位杂交和RNA斑点印迹阵列。另进行POLB ,XRCC1,VEGF及PCNA的免疫组化染色及免疫斑点印迹阵列。结果 :Br组和Q组的DNApolβ ,EGFR ,c myc基因表达下调而wtp5 3基因表达上调。POLB ,XRCC1,PCNA及VEGF免疫斑点印迹减弱。 8 Br cAMP及槲皮素显著下调Eca 10 9细胞的DNApolβ基因表达及相关癌基因表达 ,同时上调抑癌基因的表达。作为POLB的异二聚体XRCC1及恶性细胞生物标志的PCNA及VEGF表达下调。结论 :分化诱导剂下调Eca 10 9细胞DNApolβ基因表达 ,提示Eca 10 9细胞的polβ基因是高表达的 ;功能调整后的polβ通过相关基因表达的改变尤其是wtp5
- 李士坤郑乃刚吴景兰白经修董子明
- 关键词：DNA聚合酶ΒECA-109细胞8-BR-CAMP槲皮素食管鳞状上皮癌
