李亚文
- 作品数：24 被引量：45H指数：4
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金深圳市科技计划项目湖北省卫生厅科研基金更多>>
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- 布比卡因致高糖培养SH-SY5Y细胞内质网应激增强与活性氧簇增多及凋亡增加被引量：3
- 2014年
- 目的将布比卡因作用于高糖培养的SH-SY5Y细胞，观测其对细胞内活性氧簇（reactiveoxygenspecies，ROS）及细胞凋亡的影响。方法不同浓度葡萄糖培养基培养SH-SY5Y细胞，经1mmol／L布比卡因作用6h。采用流式细胞仪检测细胞内ROS产量及细胞凋亡情况、MTT法检测细胞存活率、Westernblot技术检测细胞内GRP78相关蛋白的变化。结果葡萄糖浓度为5．6、6．1、7．0mmol／L的3组间ROS含量差异无统计学意义（P〉0．05）；葡萄糖浓度为7．8、11．1、13.3mmol／L时ROS产量分别高于5．6、6．1、7．0mmol／L组（P〈0．05）。各组细胞存活率（％）依次为（4．29±0．20）、（3．30±0．19）、（6．31±0．14）、（7．89±0．09）、（2．81±0．12、（1．01±0．11，组间差异均具有统计学意义（砌．05）。各组细胞凋亡率（％）依次为（1．80±0．09）、（2．82±0．11）、（3．30±0．21）、（4．31±0．18）、（6．28±0．13）、（7．89±0．08），组间差异均具有统计学意义（P〈0.05）。Grp78表达结果为5．6mmol／L组和6．1mmoUL组分别为（1．02±0．12）和（0．97±0．06），均高于7．0mmol／L组（0．39±0．04）；7．8mmol]L组（0．98±0．06）高于7．0mmol／L组（0．39±0．04）；11．1mmol／L与13．3mmo]／L组低于其他各组，差异均具有统计学意义（P〈0．05）；5．6mmol／L组、6．1mmol／L组和7．8mmo]／L组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论细胞内ROS增多及细胞凋亡增加可能与布比卡因增强高糖培养的SH-SY5Y细胞内质网应激有关，引起细胞内ROS爆发，从而导致细胞损伤和凋亡；而Grp78功能减弱进一步增强细胞内质网应激。
- 李亚文徐世元张庆国李乐赖露颖郑艇苏娇玲杨耐梅李元涛
- 关键词：SH-SY5Y细胞活性氧簇
- 椎管内麻醉无痛分娩对母婴近期和远期的影响分析被引量：12
- 2017年
- 目的探讨椎管内麻醉无痛分娩对母婴近期和远期的影响。方法本研究选取我院分娩的单胎头位足月的初产妇120例为研究对象,受试对象分为椎管内麻醉无痛分娩组和对照组,每组各60例;收集比较母亲产后出血、感染发生率、神经损伤发生率等为指标水平以及新生儿Apgar评分和随访的社会功能情况评分,并进行比较分析;采用SPSS 17.0统计学软件完成统计工作。结果两组产妇在产后出血的发生比例、感染以及产后尿潴留的发生比例均未见统计学差别;神经损伤的产妇在无痛分娩组见1例,发生率为1.67%;在对照组未见神经损伤者;此外,两组均未发现产后出现瘫痪情况。两组新生儿出生身长和体重未见差别,Apgar评分和脐血p H值水平也均表现正常,且未见差别;7岁时的AAMD-ABS总分在无痛分娩组为(192.34±13.45),对照组为(196.04±13.98),但未见统计学差别。结论椎管内麻醉用于无痛分娩,对母婴双方近期、远期均无不良影响,值得临床推广。
- 宋少良李亚文文亚杰李戈辉刘培辉张本军
- 关键词：母婴远期影响
- Grp78基因过表达慢病毒载体构建和包装及鉴定
- ＜正＞目的:探讨Grp78基因过表达慢病毒载体构建和包装及鉴定。方法:运用慢病毒载体GV261,采用基因工程技术,获取目的基因片段,构建重组质粒,制备感受态细胞,转化,对阳性克隆进行测序。最后对慢病毒包装和滴度检测。结果...
- 李亚文徐世元张庆国李乐赖露颖郑艇苏娇玲杨耐梅李元涛
- 关键词：慢病毒载体基因工程
- 文献传递
- RNAi慢病毒外源筛靶与内源验证
- ＜正＞目的:制备含目的基因（Grp78基因）过表达敲减的RNAi慢病毒载体重组质粒。方法:通过RNAi慢病毒载体制备和目的基因过表达载体构建、过表达质粒表达检测,最后行Western blot外源筛选有效RNAi载体。通...
- 李亚文徐世元张庆国李乐赖露颖郑艇苏娇玲杨耐梅李元涛
- 关键词：慢病毒载体基因工程
- 文献传递
- 依托咪酯对氯化钾和咖啡因诱发豚鼠耳蜗外毛细胞内钙离子移动的影响被引量：4
- 2010年
- 目的观察不同浓度依托咪酯对氯化钾和咖啡因诱发的豚鼠耳蜗外毛细胞内钙离子移动的影响,探讨其对听觉外周感受器(耳蜗)作用的可能机制。方法①30个活性良好的外毛细胞随机分为3组(n=10):对照组(C组)、低浓度依托咪酯组(E1组)、高浓度依托咪酯组(E2组),用Fluo-3AM荧光指示剂染色,分别给予Hanks液、50、100μmol/L依托咪酯预处理20 min。在激光共聚焦显微镜下动态观察各组预处理前、后以及40 mmol/L氯化钾诱发的细胞内钙荧光染色强度峰值的变化。②分组同①,观察各组预处理前、后以及20 mmol/L咖啡因诱发的细胞内钙荧光染色强度峰值的变化。结果①C组加入40 mmol/L氯化钾后细胞内钙荧光强度峰值从基础值105上升至221(P<0.01),E1组从基础值101上升至187(P<0.01),E2组从基础值103上升至150(P<0.01),E1组、E2组峰值分别较C组下降了近15.4%(P<0.05)和32.1%(P<0.01)。②C组加入20 mmol/L咖啡因后细胞内钙荧光强度峰值从基础值112上升至154(P<0.05),E1组从基础值103上升至148(P<0.05),E2组从基础值104上升至143(P<0.05)。但E1组和E2组细胞内钙荧光强度峰值较C组差异无显著性意义(P>0.05)。结论依托咪酯可浓度依赖性地抑制耳蜗外毛细胞电压依赖性Ca2+通道开放,减少胞外钙内流,降低耳蜗外毛细胞内钙离子浓度,而对内质网Ryanodine型钙库无明显影响。
- 李元涛黄穗萍黄晓雷吴铭广李亚文王芳周龙
- 关键词：依托咪酯细胞内钙离子外毛细胞耳蜗
- Grp78基因过表达慢病毒载体构建和包装及鉴定
- 2014年
- 目的探讨Grp78基因过表达慢病毒载体的构建、包装和滴度检测。方法采用慢病毒载体,运用基因工程技术,获取目的基因片段并构建重组质粒,然后制备感受态细胞并转化,将重组质粒导入感受态细胞;用PCR技术鉴定阳性克隆和进行DNA序列分析及对慢病毒包装和滴度检测。结果阳性克隆测序比对结果说明测通。熔解曲线中既没出现杂峰也没出现主峰的异常增宽,表明实验中未出现污染、引物二聚体和非特异性扩增。结论 Grp78基因过表达慢病毒载体构建和包装成功。
- 李亚文徐世元张庆国李乐赖露颖郑艇苏娇玲杨耐梅李元涛
- 关键词：慢病毒载体基因工程
- 神经病理性疼痛大鼠脊髓突触后致密物质-95 mRNA的表达被引量：6
- 2005年
- 目的研究神经病理性疼痛大鼠脊髓背角突触后致密物质-95(PSD95)mRNA的表达。方法雌性SD大鼠12只,体重150～200 g,随机分为2组(n=6),对照组和SNI组。SNI组于左肢制备坐骨神经保留性神经损伤模型(sNI),对照组实施假手术。分别于术前3 d、术后即刻、l、3、5、7、9、ll d测定机械刺激诱发的缩腿反应次数。术后Il d,每组取3只大鼠灌注固定,采用免疫组织化学方法检测脊髓N．甲基．D．天冬氨酸(NMDA)受体NR2B亚单位(NR2B)和神经型一氧化氮合酶(nNOS)的表达;每组余下3只大鼠断头处死后分离Ll一。脊髓,提取组织RNA,采用RT-PCR方法检测PSD95 mRNA 的表达。结果 SNI组术后3 d术侧缩腿反应次数高于对照组(尸0．05)。NR2B和nNOS主要表达于脊髓背角的Ⅰ或Ⅱ层,SNI组 nNOS和NR2B的表达高于对照组(P<0．05);SNI组PSD95 mRNA的表达低于对照组(P<0．05)。结论神经病理性疼痛大鼠脊髓背角NR2B和nNOS表达增加,但是脊髓中PSD95 mRNA转录水平降低,影响了突触后三者复合物的形成。
- 罗爱林金小高张广雄王金涛李亚文
- 关键词：神经组织蛋白质类神经痛脊髓
- PC12细胞转染nNOSα和nNOSβ对NF-kappa B转录活性和细胞凋亡的影响
- 2007年
- 目的:比较转染nNOSα和nNOSβ的PC12细胞NF-kappaB转录活性和细胞凋亡百分数,探讨nNOSα和nNOSβ在功能上的差异性.方法:将携带nNOSα和nNOSβ基因的pcDNA3.0表达质粒转化感受态细胞,在大肠杆菌中扩增后,提纯质粒酶切鉴定.nNOSα和nNOSβ基因的pcDNA3.0表达质粒通过脂质体转染PC12细胞,G418筛选,使用抗nNOS羧基端的抗体,通过免疫组织化学和WesternBlot方法检测nNOS的表达效率.提取经G418筛选PC12细胞核蛋白,采用凝胶电泳阻滞实验(EMSA)检测细胞核NF-kappa B转录活性.不同PC12细胞经PI染色后流式细胞仪分选,测定不同增殖周期的细胞数.结果:质粒酶切鉴定结果与携带nNOSα和nNOSβ基因的pcDNA3.0质粒结构相符;免疫组织化学和Western Blot方法检测转染nNOS基因后表达的nNOSα和nNOSβ均高于未转染的PC12细胞(P<0.05),PC12细胞转染nNOSα增加NF-kappa B转录活性(P<0.05),而nNOSβ降低NF-kappaB转录活性(P<0.05);转染nNOSα和nNOSβ及未转染的PC12细胞均不改变细胞凋亡百分数(P>0.05).结论:nNOSα增加PC12细胞NF-kappaB转录活性,nNOSβ降低C12细胞NF-kappa B转录活性,但均不改变细胞凋亡百分数,nNOSα和nNOSβ在功能上具有差异性.
- 金小高罗爱林王萍王金韬张广雄王贤裕李亚文
- 关键词：细胞凋亡
- 可乐定的临床研究进展被引量：3
- 2006年
- 可乐定是一种α2肾上腺素受体激动药,具有稳定围手术期血流动力学和心肌缺血保护作用;可用于防治术后寒战,术后镇痛;能用于痛敏治疗及戒断综合征的防治。
- 李亚文罗爱林
- 关键词：药理作用
- 术前应用可乐定对瑞芬太尼-丙泊酚麻醉效果的影响
- 2008年
- 目的探讨可乐定作为术前用药对瑞芬太尼-丙泊酚麻醉效果的影响。方法选择48例择期腹腔镜胆囊切除的患者,ASAⅠ或Ⅱ级,随机分为对照组和可乐定组,每组24例。可乐定组术前静脉注射可乐定3μg.kg-1。两组麻醉诱导时采用丙泊酚脑电双频指数(BIS)监护仪闭环反馈输注,靶控目标血药浓度2.5μg.mL-1。瑞芬太尼输注速度0.4μg.kg-1.min-1,持续5 min,插管后调至0.2μg.kg-1.min-1。记录麻醉药用量、血流动力学及BIS变化和苏醒时间。结果对照组麻醉药用量显著高于可乐定组(P<0.05)。可乐定组循环血流动力学更稳定。可乐定组BIS值与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。结论可乐定作为术前用药可有效抑制术中应激反应,使麻醉中血流动力学更稳定,同时也可减少麻醉药物用量,降低患者经济负担。
- 李亚文袁从顺张韵罗爱林
- 关键词：瑞芬太尼丙泊酚
