朱芸
- 作品数：10 被引量：14H指数：1
- 供职机构：南京工业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 大肠杆菌BL21(DE3)膜组分相关基因的敲除及其对重组蛋白胞外分泌的影响
- 本研究利用Red重组系统和Xer重组系统相结合的技术对常用表达宿主菌大肠杆菌BL21(DE3)进行了改造:通过敲除大肠杆菌BL21(DE3)染色体上的膜组分相关基因waaF或msbB，成功构建了细胞外膜渗漏突变菌株大肠杆...
- 朱芸
- 关键词：大肠杆菌
- 融合标签在蛋白质可溶性表达中的应用进展被引量：14
- 2014年
- 融合标签是大规模生产可溶性蛋白质的有效工具,因此融合标签在蛋白质可溶性表达中的应用已成为外源蛋白表达的研究热点。本文重点介绍了常用融合标签及其提高重组蛋白质可溶性表达的机理,主要用5种模型从不同的角度阐述融合标签在蛋白折叠中的作用,其中大多数功能较强的融合标签(如MBP和NusA)作为分子伴侣帮助重组蛋白正确折叠从而提高蛋白质可溶性。此外,阐述了实际应用中常用的组合标签和标签的去除。最后提出了融合标签在大规模生产可溶性蛋白质中的应用前景、面临的挑战,以及今后研究的方向。
- 吴珊珊朱芸陈珊珊何冰芳
- 关键词：生物技术溶解性融合标签重组蛋白质可溶性表达纯化
- 强分泌性信号肽增强小肽模序及其应用
- 本发明属于蛋白质工程和基因工程领域，涉及一类强分泌性信号肽增强小肽模序及其应用。本发明的强分泌性信号肽增强小肽模序，其具有如下通式的氨基酸序列：M（αXβYγ/αYβXγ）n，其中X代表酸性氨基酸；Y代表碱性氨基酸；α为...
- 何冰芳陈文华米兰吴珊珊朱芸陈珊珊
- 文献传递
- 新型耐有机溶剂果糖苷酶酶学性质及高效表达研究
- 中药有效活性成分葛根素、芒果苷具有降血脂、抗肿瘤、抗氧化、抗病毒等多种生理活性,但葛根素、芒果苷水溶性差,生物利用度低,限制了其在临床上的实际应用.利用耐有机溶剂糖苷酶结构修饰葛根素、芒果苷可显著改善其生物活性、溶解度、...
- 周有治朱芸陈珊珊何冰芳
- 关键词：酶学性质克隆表达
- 强分泌性信号肽增强小肽模序及其应用
- 本发明属于蛋白质工程和基因工程领域，涉及一类强分泌性信号肽增强小肽模序及其应用。本发明的强分泌性信号肽增强小肽模序，其具有如下通式的氨基酸序列：M(αXβYγ/αYβXγ)<Sub>n</Sub>，其中X代表酸性氨基酸；...
- 何冰芳陈文华米兰吴珊珊朱芸陈珊珊
- 文献传递
- 一种有利于重组蛋白胞外分泌的基因敲除大肠杆菌及其应用
- 本发明提供一种有利于重组蛋白胞外分泌的基因敲除大肠杆菌及其应用，涉及改造大肠杆菌遗传组基因领域。本发明有利于重组蛋白胞外分泌的基因敲除大肠杆菌，是通过敲除大肠杆菌中脂多糖合成的相关基因后获得。本发明还提供所述基因敲除大肠...
- 何冰芳朱芸储建林周有治吴斌柏中中钦松姜天玥
- 强分泌性信号肽增强小肽模序及其应用
- 本发明属于蛋白质工程和基因工程领域，涉及一类强分泌性信号肽增强小肽模序及其应用。本发明的强分泌性信号肽增强小肽模序，其具有如下通式的氨基酸序列：M(αXβYγ/αYβXγ)<Sub>n</Sub>，其中X代表酸性氨基酸；...
- 何冰芳陈文华米兰吴珊珊朱芸陈珊珊
- 文献传递
- 一种有利于重组蛋白胞外分泌的基因敲除大肠杆菌及其应用
- 本发明提供一种有利于重组蛋白胞外分泌的基因敲除大肠杆菌及其应用，涉及改造大肠杆菌遗传组基因领域。本发明有利于重组蛋白胞外分泌的基因敲除大肠杆菌，是通过敲除大肠杆菌中脂多糖合成的相关基因后获得。本发明还提供所述基因敲除大肠...
- 何冰芳朱芸储建林周有治吴斌柏中中钦松姜天玥
- 文献传递
- 强分泌性信号肽增强小肽模序及其应用
- 本发明属于蛋白质工程和基因工程领域，涉及一类强分泌性信号肽增强小肽模序及其应用。本发明的强分泌性信号肽增强小肽模序，其具有如下通式的氨基酸序列：M（αXβYγ/αYβXγ）n，其中X代表酸性氨基酸；Y代表碱性氨基酸；α为...
- 何冰芳陈文华米兰吴珊珊朱芸陈珊珊
- 文献传递
- 大肠杆菌BL21(DE3)膜组分相关基因的敲除对重组蛋白胞外分泌的影响
- 2015年
- 【目的】探究Escherichia coli BL21(DE3)中膜组分相关的脂多糖合成基因waa F或msb B的敲除对重组蛋白胞外分泌的影响。【方法】运用Red重组技术将E.coli BL21(DE3)染色体上的基因waa F或msb B敲除,构建敲除菌株E.coli BL21(Δwaa F)、E.coli BL21(Δmsb B)。将本实验室保存的带有β-呋喃果糖苷酶(β-fructofuranosidase,β-FFase)、青霉素G酰化酶(penicillin G acylase,PGA)基因的重组质粒p ET-ffase、p ET-pga分别转入敲除菌株及出发菌株中,构建工程菌株E.coli BL21(Δmsb B)/p ET-ffase、E.coli BL21(Δwaa F)/p ET-ffase、E.coli BL21(DE3)/p ET-ffase、E.coli BL21(Δmsb B)/p ET-pga、E.coli BL21(Δwaa F)/p ET-pga、E.coli BL21(DE3)/p ET-pga。最后通过摇瓶发酵研究敲除菌株对β-FFase、PGA胞外分泌的影响。【结果】当诱导表达4 h,以出发菌株E.coli BL21(DE3)为宿主时,β-呋喃果糖苷酶β-FFase的胞外分泌量占总表达量的2.6%,以敲除菌株Δmsb B为宿主时,胞外分泌量达到19.7%,而以敲除菌株Δwaa F为宿主时,胞外分泌量达到50.9%。另外,当诱导表达24 h,以敲除菌株Δwaa F为宿主时,青霉素G酰化酶PGA的胞外酶活是出发菌株中的4.1倍,达到1708 U/L。【结论】本研究成功构建了敲除菌株Δmsb B和Δwaa F,Δmsb B能明显增强β-FFase的胞外分泌,而Δwaa F对β-FFase和PGA的胞外分泌均有显著的强化作用。
- 朱芸周有治储建林何冰芳
- 关键词：大肠杆菌BL21(DE3)膜脂基因敲除
