朱峰
- 作品数：30 被引量：183H指数：8
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金高等学校骨干教师资助计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 维甲酸诱导多种肿瘤细胞凋亡相关基因克隆的研究(英文)被引量：9
- 2003年
- 目的应用基于聚合酶链式反应(PCR)技术的改良消减杂交方法克隆肿瘤凋亡相关基因,验证维甲酸调控生物细胞增殖、分化,诱导多种肿瘤细胞凋亡的作用。方法以全反式维甲酸(all-transretinoicacid)诱导前列腺癌DU-145细胞、早幼粒白血病HL-60细胞和乳腺腺癌MCF-7细胞产生凋亡,在此基础上,采用基于PCR技术的改良消减杂交方法克隆肿瘤细胞凋亡相关基因。结果在维甲酸诱导前列腺癌DU-145细胞、早幼粒白血病HL-60细胞和乳腺腺癌MCF-7细胞产生凋亡过程中,有TNF、泛素、热休克蛋白和C-erbB-2基因参与,并成功克隆出多条可能与凋亡密切相关的未知基因,均被GenBank收录,登录号为AF174394,AF144056,AF141882。结论这种基于PCR技术的改良消减杂交方法对于差异表达基因的克隆是十分有效的。
- 邵晨汪涌朱峰张磊晏伟
- 关键词：维甲酸细胞凋亡基因克隆聚合酶链式反应
- 维甲酸诱导前列腺癌细胞DU-145凋亡有关的基因克隆被引量：8
- 2000年
- 目的 克隆维甲酸诱导的前列腺癌细胞 DU- 145凋亡的未知相关基因 .方法 以全反式维甲酸 (all- trans retinoicacid)诱导前列腺癌细胞系 DU- 145细胞凋亡 ,在此基础上 ,采用基于 PCR技术的改良消减杂交方法克隆前列腺癌凋亡相关基因 .结果 成功克隆出一条与凋亡可能有密切关系的未知基因 pcar,已被 Gen Bank收录 ,登录号为 AF174394.结论 维甲酸诱导前列腺癌细胞 DU- 145凋亡的过程是一个多基因参与的复杂过程 。
- 邵晨朱峰晏伟赵忠良柴玉波王成济邵国兴
- 关键词：前列腺癌维甲酸克隆
- bcl-2核酶(Ribozyme)促进紫杉醇诱导的细胞凋亡被引量：7
- 2000年
- 用核酶技术阻断或降低抗凋亡蛋白 Bcl- 2的表达以促进化疗药物紫杉醇诱导的食管癌细胞凋亡 ,探索克服耐药、提高紫杉醇疗效的新途径 .将特异性切割 Bcl- 2 m RNA的核酶克隆至含MTII启动子并可为 Zn SO4 诱导表达的真核表达载体中 ,通过脂质体转入食管癌鳞状上皮细胞系Eca 1 0 9中 ,经 G41 8筛选得到稳定抗性细胞株 X1 0 9R,挑取单细胞株扩大培养 ,1 40μmol/L Zn SO4诱导 3d,用 Northern- blot、免疫荧光、流式细胞仪鉴定核酶及 Bcl- 2蛋白表达情况 ,用 TUNEL标记及流式细胞术检测凋亡细胞的比例 .bcl- 2核酶在不同单细胞株中有不同程度的表达 ,其中一株X1 0 9R1 4表达最高 .测定其中 Bcl- 2蛋白含量 ,发现 Bcl- 2蛋白表达大为降低 .加入紫杉醇后 ,TUNEL标记及凋亡峰测定结果都表明同一条件下凋亡率升高 .结果提示 ,转入特异性切割 bcl- 2m RNA的核酶可有效地阻断 Bcl- 2蛋白合成 .Bcl- 2蛋白表达降低可明显促进紫杉醇诱导的细胞凋亡 .说明 Bcl-
- 彭玮丹张杰赵永同惠宏襄朱峰杨安钢王成济
- 关键词：紫杉醇肿瘤抗药性细胞凋亡
- 切割bcl－2mRNA核酶诱导HL－60细胞凋亡的形态学研究被引量：4
- 1996年
- 切割ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ核酶诱导ＨＬ－６０细胞凋亡的形态学研究赵永同，朱峰，金明，王刚，王成济（第四军医大学生物化学教研室西安７１００３３）关键词核糖核酸，凋亡，ｂｃｌ－２中图号Ｑ５２２；Ｑ７８１核酶（ｒｉｂｏｚｙｍｅ，ＲＺ）是一类具有酶活性的ＲＮＡ分...
- 赵永同朱峰金明王刚王成济
- 关键词：细胞凋亡MRNA核酶
- 抗bcl－2核酶在HL－60细胞中的表达及促进其凋亡的研究被引量：2
- 1996年
- 为消除白血病细胞中ｂｃｌ－２基因对细胞凋亡的抑制作用，开辟白血病基因治疗的途径。将合成的针对ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的“锤头型”核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ，ＲＺ）基因定向克隆于真核表达载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ，构成ｐＤＯＲ－ＲＺ重组体。通过脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导的ＤＮＡ转染法，把ｐＤＯＲ－ＲＺ导入ＨＬ－６０细胞。用Ｓｏｕｔｈ－ｅｒｎ印迹，ＲＮＡ斑点杂交法观察ＲＺ基因在ＨＬ－６０细胞内表达，并通过电镜、流式细胞仪（ＦＣＭ），光镜和ＤＮＡ电泳观察ＲＺ对ＨＬ－６０细胞的影响。结果：①ＲＺ在转染ＨＬ－６０后７２小时得以表达，细胞内ｂｃｌ－２蛋白合成受到抑制。②在ＦＣＭ图谱上可见到明显的凋亡峰，形态观察ＲＺ处理的ＨＬ－６０细胞呈典型的凋亡形态。③足叶乙甙（促凋亡）敏感性试验表明，与未转染的细胞和转染空载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ的细胞相比，转染ｐＤＯＲ－ＲＺ的细胞ＤＮＡ电泳易出现梯状条带。结果说明ＲＺ基因通过逆转录病毒表达载体导入ＨＬ－６０细胞后可成功地表达并抑制ＨＬ－６０细胞ｂｃｌ－２蛋白的合成。
- 赵永同王剑波朱峰王成济
- 关键词：核酶白血病基因表达基因治疗
- 人牙髓细胞与牙龈成纤维细胞差异表达基因的克隆及特征分析被引量：1
- 2007年
- 目的批量克隆人牙髓细胞(HDPC)与人牙龈成纤维细胞(HGF)的差异表达基因并对其特征进行分析,研究HDPC的生物学特性。方法体外培养HDPC和HGF,应用基于PCR的改良消减杂交技术构建HDPC和HGF的cDNA消减文库,批量克隆HDPC和HGF的差异表达基因并测序,使用GenBank的BLAST对测序结果进行同源序列比较。结果经过序列测定,获得12个差异表达基因的序列,经BLAST分析有2个为未知基因。在已知基因中,含有4个与细胞信号转导机制相关的基因;2个与细胞转运机制相关的基因(包括细胞膜及细胞核膜转运);2个与细胞RNA剪接机制相关的基因。结论HDPC的生物学特性是由某些特定基因的差异表达所决定的,其生长、分化机制可能与相对旺盛的蛋白合成及分泌活性相关。
- 王忠东吴纪楠周琳凌均棨郭希民肖明振朱峰蒲勤柴玉波赵忠良
- 关键词：牙髓细胞牙龈成纤维细胞消减文库
- 针对bcl─2RNA核酶体外切割反应的琼脂糖凝胶电泳被引量：6
- 1996年
- 目的：用琼脂糖凝胶电泳检测体外ｂｃｌ┐２ｃＤＮＡ和ＲＺＤＮＡ转录物与鉴定核酸的体外切割活性．方法：琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳．结果：琼脂糖凝胶电泳可见核酶和ｂｃｌ－２ＲＮＡ转录物及其切割ｂｃｌ－２ＲＮＡ后的产物．
- 赵永同金明王刚朱峰惠宏襄王成济
- 关键词：癌基因BCL-2核酶凝胶电泳
- 反义bcl─2RNA促进HL─60细胞的凋亡被引量：7
- 1996年
- 目的：分析反义ｂｃｌ－２对ＨＬ－６０细胞凋亡的作用，为进一步研究凋亡机制打基础．方法：我们用ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将插有反义ｂｃｌ－２基因片段的重组逆转病毒载体ｐＤＯＲ－ＡＢ转染ＨＬ－６０细胞，用核酸打点杂交方法检测转染效果和载体表达效果，用流式细胞仪检测ｂｃｌ－２的改变及细胞周期的变化，用光镜和电镜观察转染细胞的形态学改变，并用转染的细胞对足叶乙甙敏感性的变化间接证明反义ｂｃｌ－２的作用．结果：ｐＤＯＲ－ＡＢ转入ＨＬ－６０细胞并表达ｂｃｌ－２反义ＲＮＡ；细胞内Ｂｃｌ－２蛋白含量明显下降；细胞周期分析可见凋亡峰；电镜下可见凋亡细胞；ＤＮＡ凝胶电泳出现梯状电泳带．结论：反义ｂｃｌ－２瞬时表达可促进ＨＬ－６０细胞的凋亡。
- 朱峰王成济惠宏襄赵永同金明
- 关键词：白血病反义核糖核酸BCL-2
- 改良消减杂交法克隆人乳腺癌MCF-7细胞凋亡相关基因
- 细胞的凋亡是多细胞生物籍以存活所必须的一种生命形式,其分子学机制的研究表明,凋亡是一个有着遗传背景的自身编码死亡方式,受许多基因的调控。当细胞内凋亡相关基因发生突变或表达异常时,会导致凋亡的异常,而这与许多疾病的发病机理...
- 晏伟李青朱峰柴玉波王成济路凡赵忠良岳文邵晨
- 关键词：MCF-7凋亡消减杂交维甲酸
- 文献传递
- 妊高征发病相关基因的克隆、序列测定及初步分析被引量：3
- 2001年
- 目的 :克隆妊高征胎盘特异表达基因并阐述它在该病发病中的意义。方法 :以正常胎盘和妊高征胎盘为模型 ,利用基于PCR的改良消减杂交技术 ,建立与妊高征相关的cDNA消减文库。随机筛选出 2 0个含有差异表达片段的克隆备用。结果 :2 0个含有差异片段的克隆经过反向点杂交 ,弃掉 6个假阳性克隆 ,确定 14个克隆为妊高征发病相关基因。经过序列测定和局部相似性检索 (BLAST) ,发现 11个为已知基因 ,其中 1号基因为NECDIN家族基因 ;3个为新基因。这 3个新基因已完成了全部插入片段的序列测定 ,并已登录GeneBank ,登录号为AF2 32 2 16、AF2 32 2 17及AF2 33648。结论 :本研究首次报道了这些基因 (尤其是Necdin表达基因 )在妊高征中高表达 ,这有助于进一步探讨妊高征的病因。
- 师娟子姚元庆晏伟朱峰赵忠良刘彦仿
- 关键词：妊娠高血压综合征胎盘基因克隆聚合酶链反应
