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流感病毒感染星型胶质细胞条件上清对正常胶质细胞的免疫生物学影响: 本研究从新生小鼠大脑皮质分离培养神经胶质细胞，并进一步纯化星形胶质细胞和小胶质细胞，经纯度鉴定后，用感染复数为2的流感病毒H1N1和H3N2进行体外感染星型胶质细胞，分别于感染后6小时和24小时收获感染的条件培养上清，并...; 周健祥王革非蒋治武曾俊苏芸李康生; 关键词：流感病毒胶质细胞免疫生物学; 文献传递

不同亚型流感病毒NS1蛋白在酵母菌细胞中转录激活功能的差异: 2009年; 非结构蛋白1(nonstructural protein 1,NS1)是甲型流感病毒一种重要的调控蛋白,与病毒的毒力密切相关.本文检测了不同亚型流感病毒NS1蛋白在酵母菌细胞中的基因转录激活能力.将携带NS1基因的诱饵载体与空的猎物载体共转化AH109和Y187酵母菌细胞,观察AH109在QDO培养基上的生长情况,以X-α-gal为底物检测其分泌α-半乳糖苷酶的能力;通过ONPG实验定量分析Y187酵母菌细胞β-半乳糖苷酶活性的强弱.结果发现转化H1N1,H5N1和H9N2亚型流感病毒NS1基因的AH109酵母菌细胞能够在QDO培养基上生长,并分泌高水平的α-半乳糖苷酶.同时这些基因转化的Y187酵母菌细胞具有很强的β-半乳糖苷酶活性.与此相反,H3N2亚型流感病毒NS1基因转化AH109和Y187后,上述实验结果均为阴性.这说明H1N1,H5N1和H9N2亚型的NS1蛋白具有刺激酵母菌细胞基因转录的功能,而H3N2亚型的NS1蛋白缺乏这种能力,表明NS1蛋白型别的不同可造成其生物学活性的差异.; 李卫中王革非曾俊张丹桂张衡陈小璇陈幼莹李康生; 关键词：流感病毒 NS1蛋白酵母双杂交转录激活

广东紫菜对环境因子适应性研究及其Hsp70基因的克隆与表达分析: 广东省地处热带、亚热带地区，年平均水温较高。粤东海区又是我国紫菜养殖的最南部地区，每年11月份常出现水温回升期，导致紫菜年产量低，制约了广东沿海紫菜养殖生产发展。因此开发能够适应高水温环境的紫菜栽培品种，是推动广东沿海紫...; 曾俊; 关键词：广东紫菜环境因子 HSP70基因分子克隆耐热机制

流感病毒诱导小鼠胶质细胞的细胞因子级联反应: 目的:探讨流感病毒感染星形胶质细胞后释放的细胞因子是否会诱导正常胶质细胞趋化因子及促炎细胞因子转录水平的变化,从而产生细胞因子级联效应。方法:从新生小鼠大脑皮质分离培养神经胶质细胞,并进一步纯化星形胶质细胞,经纯度鉴定后...; 周健祥王革非蒋治武曾俊苏芸李康生; 关键词：星形胶质细胞小胶质细胞流感病毒; 文献传递

禽流感病毒H5N1全基因组克隆与分析被引量：2: 2010年; 为明确广东地区分离的一株禽流感病毒H5N1的遗传背景,建立流感病毒反向遗传的平台。对该株禽流感病毒进行了空斑纯化与组织细胞培养,检测其在MDCK细胞中的增殖特性;利用H5N1病毒通用引物,通过RT-PCR对该病毒全基因组的8条片段进行全长克隆及测序分析;将H5N1的8条全长基因组片段分别插入反向遗传通用载体中,构建禽流感病毒H5N1的感染性克隆。结果表明,该H5N1毒株在MDCK细胞中可不依赖胰酶进行有效增殖与复制,可使MDCK细胞出现典型细胞病变,具有高致病性禽流感病毒的细胞增殖特征。RT-PCR克隆得到该H5N1毒株的PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS八条全长片段,经测序分析确认该毒株的基因序列,其内部编码序列出现多处突变,其中HA连接肽为多个连续碱性氨基酸,表明该毒株可不依赖胰酶进行有效复制,与细胞培养结果一致,未出现抗药性的遗传突变。PCR与测序证明,插入H5N1八个全长基因组片段的载体序列完全正确,表明成功构建了该毒株的感染性克隆。为明确病毒遗传信息,建立流感病毒反向遗传的平台,为进一步研究禽流感病毒相关疫苗提供了研究基础。; 王革非李卫中张衡曾俊陈幼莹陈小璇李康生; 关键词：流感病毒 H5N1 克隆

一种抗病毒蛋白质及其应用: 一种抗病毒蛋白质，其特征在于它是融合蛋白质，包含穿膜肽结构域和至少二个来源于APOBEC家族的胞嘧啶脱氨酶结构域，穿膜肽结构域和各胞嘧啶脱氨酶结构域形成串联体。本发明抗病毒蛋白质中，穿膜肽结构域使抗病毒蛋白质具有穿膜能力...; 李卫中李康生王革非辛岗苏芸陈小璇陈幼莹张衡张丹桂曾俊; 文献传递

基于柯萨奇B3反向遗传系统的病毒示踪及CXCL10重组疫苗的研究: 柯萨奇B3(Coxsackievirus B3,CVB3)属于小核糖核酸病毒科(Picornavirus),肠道病毒属(Enterovirus)B型,为无包膜的单股正链小RNA病毒。CVB3主要通过粪-口途径传播,是引起...; 曾俊; 关键词：柯萨奇B3 反向遗传技术; 文献传递

人甲型H1N1流行性感冒病毒全基因组分析与反向遗传载体的克隆被引量：2: 2009年; 目的明确一株人甲型H1N1流行性感冒（流感）病毒的遗传背景，建立流感病毒反向遗传的平台。方法对分离自汕头市儿童的一株人甲型H1N1流感病毒进行空斑纯化；利用甲型流感病毒通用引物，对该病毒全基因组的8条片段（PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS）进行RT-PCR全长克隆、DNA测序及初步生物信息学分析；将其8条全长基因组片段分别插入反向遗传通用载体，构建人甲型H1N1流感病毒的反向遗传系统。结果RT-PCR克隆得到该H1N1毒株的8条全长片段，经测序分析确认该毒株的基因序列，该毒株与2006年至2008年分离的人甲型H1N1流感病毒具有很高的同源性，未出现奥司他韦或金刚乙胺抗药性的遗传突变。PCR与测序证实，插入该菌株8个全长基因组片段的载体序列完全正确。结论成功构建了该毒株的感染性克隆。获得了该毒株全基因组序列，为明确病毒遗传信息、提供流行病学监测数据、建立流感病毒反向遗传平台奠定了研究基础。; 王革非张衡李卫中曾俊张丹桂陈幼莹陈小璇李康生; 关键词：流感病毒A型 H1N1亚型克隆遗传学技术基因组病毒

柯萨奇病毒感染星形胶质细胞及细胞因子变化研究: 研究目的和意义柯萨奇病毒(Coxsackievirus)是引起人类感染的最常见的致病原之一,其感染可以导致许多疾病和症状,如呼吸道感染疾病,典型症状为疱疹性咽峡炎,手足口病,严重的心肌炎、心包炎及神经系统疾病。近年来在...; 曾俊; 关键词：柯萨奇病毒星形胶质细胞细胞因子 IP-10; 文献传递

流感病毒H1N1和H5N1感染小鼠小胶质细胞与星形胶质细胞诱导趋化因子转录水平上调被引量：6: 2010年; 目的:探讨胶质细胞感染流感病毒后的天然免疫反应,检测流感病毒H1N1和H5N1体外感染小鼠小胶质细胞和星形胶质细胞,是否会诱导胶质细胞趋化因子转录水平的变化及其规律。方法:从新生小鼠大脑皮质分离培养神经胶质细胞,并进一步纯化小胶质细胞和星形胶质细胞,经纯度鉴定后,用感染复数为2的流感病毒H1N1和H5N1进行体外感染,8小时后用免疫荧光检测流感病毒核蛋白(NP)的表达,以确认感染细胞比例。在感染早期(6小时)和感染中期(24小时)分别提取细胞RNA,检测趋化因子转录水平的变化。结果:分离得到小鼠的小胶质细胞和星形胶质细胞,病毒感染后超过95%的细胞可以被感染,感染后的小胶质细胞与星形胶质细胞的CCL-3、CCL-5、CXCL-2、CXCL-9和CXCL-10的转录水平发生不同程度的上调,其中CXCL-10的上调幅度最为明显,禽流感病毒H5N1感染能诱导更强烈的上调反应。结论:流感病毒H1N1和H5N1感染小鼠小胶质细胞与星形胶质细胞,可诱导趋化因子转录水平上调。; 王革非李卫中张衡曾俊张丹桂陈幼莹陈小璇李康生; 关键词：小胶质细胞星形胶质细胞趋化因子

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曾俊

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