施鲁笛
- 作品数：17 被引量：7H指数：2
- 供职机构：泰山医学院更多>>
- 发文基金：山东省高等学校科技计划项目山东省优秀中青年科学家科研奖励基金山东省科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学文化科学电子电信更多>>
- 改良菌落PCR法筛选、鉴定DHBV部分核衣壳蛋白基因的重组克隆被引量：1
- 2012年
- 目的优化并验证改良菌落PCR程序的有效性。方法经常规PCR扩增DHBV编码核衣壳蛋白与DNA多聚酶重叠区的部分核苷酸片段(DHBc-dp),纯化特异性扩增产物并连入pMD 18-T载体,转化DH5α感受态细胞后涂布于Amp加倍的LB平板,记为亲代样品(PS),37℃培养12h,室温放置4h～8h。无菌操作挑取细菌转入优化的PCR反应液扩增、鉴定;余菌体室温放置完成二次生长。PS剩余PCR鉴定产物继代转化并涂布LB平板,记为继1代样品(F1S),同样进行菌落PCR鉴定。选取PS和F1S中PCR强阳性样品进行扩增及菌液PCR、质粒PCR、质粒酶切和测序鉴定。结果挑菌后的菌落二次生长成面积扩大的菌苔;优化菌落PCR反应体系保持、甚或提高了原有方法的高度特应性和稳定性;携外源目的片段的重组质粒在菌落PCR反应过程中能保持结构完整,并能在继代转化宿主细胞中忠实复制与扩增。结论改进的菌落PCR程序,继承了既有菌落PCR程序鉴定重组克隆的特异性和高效性,并能有效预防阳性转化子的丢失;同时,在增加优势抗性菌落生长量的前提下有效地抑制了卫星菌落的生长。
- 王玉于爱莲姜世金施鲁笛陈国敏高鹏
- 关键词：DHBV核蛋白基因菌落PCR
- 抗酸染色和芽胞染色的改良型滤纸覆盖加热法被引量：3
- 2009年
- 目的改进结核分枝杆菌抗酸染色及芽胞染色中传统的加热方式,提高染色效果。方法在现有结核分枝杆菌抗酸染色和芽胞特殊染色的基础上,以1～2层方形中性滤纸片覆盖卡介苗或地衣芽胞杆菌常规涂成的菌膜上,将初染液逐滴滴加在滤纸表面,至浸透、饱和并贴附玻片,水平移至酒精灯上方均匀温和地加热媒染,适时补充染液,维持1～2 min;将玻片放冷,弃去剩余染液,揭除滤纸后用水漂洗,再经脱色或复染、水洗后晾干,镜检。结果稍暗视野中可见卡介苗、芽胞与繁殖体、背景及杂质相互间形态轮廓清晰,着色反差大而易辨。结论改良型滤纸覆盖加热法可提高结核分枝杆菌抗酸染色和芽胞特殊染色效果。
- 胡洪杰王玉施鲁笛于爱莲
- 关键词：抗酸染色
- 同向串联共表达双色荧光蛋白报告基因载体
- 本发明涉及同向串联共表达双色荧光蛋白报告基因载体pDsRed2-MCS-EGFP。它是在载体pIRES2-EGFP的基础上，经PCR反应获得缺失IRES和EGFP序列的载体骨架pΔSG，构建其T载体克隆psT-ΔSG，酶...
- 王玉于爱莲姜世金施鲁笛
- 文献传递
- 一种电力电缆切割方法
- 本发明公开一种电力电缆切割方法，一种电力电缆切割方法，包括内环(3)和外环(1)，所述内环(3)和所述外环(1)之间通过一组滚珠配合，其特征是：所述内圈上连接电缆固定机构，所述外圈上设置有连接轴(18)，所述连接轴(18...
- 孙增武张易施鲁笛李坤宋吾力马华韩忠东
- 文献传递
- 面向节能的无线体域网MAC层算法设计及实现被引量：1
- 2015年
- 通过对无线体域网的低能耗特点进行分析,主要设计了面向节能的MAC层协议。此协议主要采用星形网络结构,应用以超帧作为基础的时分复用(TDMA)的接入控制方案,同时提出动态的时隙分配体系。可以在确保时延与缓存限制状况下,有效应用时隙,在一定程度上减小信息交互次数,进而满足低能耗需求。
- 鹿秀霞施鲁笛李远伟宋颜云
- 基因转运载体中甲基化XbaⅠ位点的体外克隆与应用
- 2012年
- 目的探讨基因转运载体中甲基化XbaⅠ位点在基因克隆中的效用。方法以pIRES2-EGFP为母本,PCR扩增获得携附加XhoⅠ位点和满足甲基化序列组成的XbaⅠ位点、同时缺失IRES和EGFP区段的载体骨架pΔSG,其PCR产物与携带对等酶切位点的EGFP PCR产物经酶切、连接后,构建重组质粒rpΔSG-EGFPV-Xho、rpΔSG-EGFPV-Xba。另将pΔSG和EGFP的PCR产物分别与pMD 18-T Simple T载体连接,构建重组质粒psT-ΔSG和psT-EGFP,并亚克隆获得重组质粒rpΔSG-sT-EGFPV-Xho。以DsRed2基因置换rpΔSG-sT-EGFPV-Xho中的EGFP基因,获得重组质粒rpΔSG-sT-DsRed2V-Xho。各重组质粒经脂质体介导转染CHO细胞。结果各重组质粒转染的细胞中明显可见EGFP或DsRed2的高效表达。结论 PCR产物中满足甲基化序列组成的XbaⅠ位点,在体外酶切与连接的克隆效果良好;该序列经体外重组并导入Dam+和/或Dcm+宿主菌中扩增时被重新甲基化而受保护,且对重组质粒在宿主细胞内的稳定性和生物活性没有明显影响。
- 王玉于爱莲姜世金郭慧君赵英会于广福施鲁笛
- 关键词：重组克隆稳定性生物活性
- 一种加药自动控制器
- 本发明涉及一种加药自动控制器，包括单片机控制模块、检测模块、显示模块、时钟模块、输入模块，所述的检测模块、显示模块、时钟模块和输入模块由单片机控制模块控制连接。本发明加药自动控制器控制准确、通用性好，实现了良好的人机交互...
- 鹿秀霞程哲孙晓娟贾世胜李远伟宋颜云施鲁笛
- 文献传递
- 区域农业多媒体英语教学系统的设计与实现
- 2011年
- 提出了具有区域特色的农业多媒体英语教学系统,并对系统的结构与功能进行了详细设计,通过对系统的数据分类以及网络形式的分类实现了教学与学生自主学习农业知识的目的,对满足农业信息专门人才的实际需求具有重要意义。
- 许晓晨张兰华张易施鲁笛
- 关键词：信息系统区域农业多媒体教学系统
- 微孔栅板隔离式多组织培养皿
- 本实用新型涉及一种微孔栅板隔离式多组织培养皿，包括组织培养皿、微孔筛网嵌合型分叶状栅板、皿盖，经符合USP VI级标准的高纯度原生聚苯乙烯，一次成形制备。微孔栅板隔离式多组织培养皿不同分割区可以分装接种不同组织细胞，微孔...
- 王玉姜世金鹿秀霞于爱莲施鲁笛
- 文献传递
- 微孔栅板隔离式多组织培养板
- 本发明涉及一种微孔栅板隔离式多组织培养板，包括组织培养孔、微孔滤网嵌合型分叶状栅板、板盖，经符合USP VI级标准的高纯度原生聚苯乙烯，一次成形制备。在微孔栅板隔离式多组织培养板的培养孔内不同分割区可以分装接种不同组织细...
- 王玉姜世金于爱莲施鲁笛
- 文献传递
