施冬艳
- 作品数：14 被引量：11H指数：2
- 供职机构：南京大学医学院附属鼓楼医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省“科教兴卫工程”医学重点人才基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 系统性红斑狼疮女性患者骨髓间充质干细胞衰老与细胞内活性氧的相关性研究被引量：2
- 2011年
- 目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者骨髓间充质干细胞（BMSCs）的衰老与细胞内活性氧（ROS）水平的相关性。方法采用密度梯度离心和贴壁分离法分离培养8例SLE患者及8名健康者BMSCs；免疫荧光法检测细胞核大小；通过检测衰老相关B-半乳糖苷酶（SA β-gal）活性观察BMSCs体外培养过程中的衰老现象；流式细胞术检测BMSCs细胞内活性氧ROS表达水平；实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）技术检测基因P13K、NRas、KRas和FoxO3的表达水平；Western blot法检测Fox03、磷酸化－FoxO3、AKT和磷酸化－AKT的表达水平；采用t检验或Mann—Whitney秩和检验。结果①在体外培养过程中，SLE患者和健康人BMSCs的形态和细胞核大小差异无统计学意义[（31±4）与（28±5）μm，P=0．628]；②SLE患者BMSCsSAβ-gal活性显著高于健康人[（31．8±9．0）％与（12．4±0．7）％，P〈0．05]；⑧SLE患者BMSCs细胞内ROS水平高于健康人（34600±9600与17958±5400，P〈0．05）；④SLE患者BMSCs基因P13K、NRas、KRas和FoxO3在mRNA表达水平与健康人比较差异无统计学意义（P均〉0．05）；⑤SLE患者BMSCs磷酸化-FoxO3以及磷酸化-AKT表达水平较健康人有所升高。结论SLE患者BMSCs在体外培养过程中，较健康人容易衰老，细胞内ROS表达水平升高，其机制可能与P13K／AKT信号通路活化，进而促进FoxO3磷酸化使其活性降低有关。
- 孟德芳刘蕾汤郁施冬艳张继云王丹丹孙凌云
- 关键词：衰老间质干细胞活性氧
- 系统性红斑狼疮患者骨髓间充质干细胞细胞骨架异常的机制研究
- 目的研究系统性红斑狼疮患者(SLE)骨髓间充质干细胞(MSCs)细胞骨架排列的改变及其对迁移能力的影响,并探讨其可能机制。方法收集9例SLE患者和9例正常对照组骨髓MSCs,培养至3代后用于实验。采用免疫荧光染色法观察M...
- 施冬艳李霞张继云孟德芳刘蕾汤郁孙凌云
- 文献传递
- 口服NAC治疗MRL/lpr鼠有一定疗效
- <正>目的:观察NAC治疗MRL/lpr鼠的疗效。方法:将NAC加入到8周龄的MRL/lpr鼠的饮用水中每日饮用,8周后处死小鼠,作为NAC治疗组,以16周龄的C57BL/6鼠及MRL/lpr鼠为对照组。ELISA法检测...
- 施冬艳孙凌云
- 文献传递
- 原发性干燥综合征患者外周血B细胞FcγRⅡb表达的临床意义
- 目的探讨原发性干燥综合征(pSS)患者外周血B细胞FcγRIIb的表达及大剂量激素冲击治疗对FcγRIIb表达的影响。方法流式细胞术检测24例pSS患者、15例正常人外周血B细胞FcγRIIb的表达。5例有严重脏器损害,...
- 周士亮王丹丹车楠陆智敏陈海凤施冬艳陈京京李霞孙凌云
- 文献传递
- N-乙酰半胱氨酸治疗系统性红斑狼疮动物模型的疗效分析被引量：2
- 2014年
- 观察N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)治疗系统性红斑狼疮模型小鼠MRL/lpr小鼠的疗效以及对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)的修复作用。将NAC加入到8周龄MRL/lpr雌性小鼠的饮用水中,8周后处死小鼠,作为NAC治疗组;以16周龄的C57BL/6小鼠及MRL/lpr小鼠为对照组。ELISA法检测外周血抗ds-DNA抗体及抗核抗体(Antinuclear antibody,ANA)水平,BCA法检测小鼠尿蛋白浓度,HE染色观察肾脏病理。取这3组小鼠的骨髓MSC体外分离培养,免疫荧光染色观察F-actin的排列,流式细胞术观察胞内ROS水平。NAC治疗组小鼠较未治疗MRL/lpr小鼠体重显著下降(P<0.01);脾脏显著减小(P<0.01);外周血抗ds-DNA抗体水平显著下降(P<0.05),而ANA水平有下降趋势(P>0.05);肾脏病理变化有所缓解,但尿蛋白浓度无显著减少(P>0.05)。NAC治疗组小鼠骨髓MSC细胞骨架F-actin的排列较MRL/lpr组整齐有序,胞内ROS水平降低(P<0.01)。结果表明,NAC对MRL/lpr小鼠有一定的治疗作用,且对其骨髓MSC异常有一定修复功能。
- 施冬艳李霞车楠周士亮孙凌云
- 关键词：N-乙酰半胱氨酸自身抗体肾炎
- 系统性红斑狼疮患者骨髓间充质干细胞的衰老与细胞内活性氧水平的相关性研究
- 孟德芳刘蕾汤郁施冬艳张继云王丹丹李霞孙凌云
- IκB激酶对系统性红斑狼疮患者骨髓间充质干细胞迁移及增殖的作用
- 张继云刘蕾孟德芳汤郁施冬艳王丹丹刘慧青李霞孙凌云
- 系统性红斑狼疮患者骨髓间充质干细胞凋亡的相关研究
- 刘蕾孟德芳汤郁张继云施冬艳王丹丹孙凌云
- 原发性干燥综合征患者外周血B细胞FcγRIIb的表达及临床意义被引量：4
- 2012年
- 目的探讨原发性干燥综合征（pSS）患者外周血B细胞FcγRⅡb的表达及其临床意义。方法流式细胞术检测19例pSS患者、15名健康对照外周血B细胞FcγRIIb的平均荧光强度（MFI）；酶联免疫吸附试验（ELISA）方法测定19例pss患者血清抗SSA、SSB抗体水平，统计学分析采用t检验、单因素方差分析、SNK—q检验及Pearson相关分析。结果pSS患者CD19＋CD27＋忆性B细胞亚群的百分率[（20．8±2．7）％，19例]显著低于健康对照组[（37．8±2．2）％，15名]（t=-4．002，P〈0．01）；活动期pSS患者外周血CD19＋CD27＋记忆性B细胞Fcγ／RⅡb的MFI[（74±8），13例]低于非活动期组[（132±11），6例]及健康对照组[（139±12），15名]（F=10．699，P〈0．01）；pSS患者外周血CD19＋CD27＋记忆性B细胞FcγRIIb的MFI与pSS疾病活动指数（SSDAI）呈负相关（r=-0．744，P=0．0003）；抗SSA、SSB抗体阳性组pSS患者CD19＋CD27记忆性B细胞FcγRⅡb的MFI[分别为（75±3），12例；（48±7），5例]显著低于抗SSA、SSB抗体阴性组[分别为（122±11），7例；（108±9），14例]（t分别为-4．336和-3．776，P均〈0．01）；抗SSA抗体阳性组Dss患者CD19＋CD27＋记忆性B细胞FcγRⅡb的MFI与抗SSA抗体滴度呈负相关（r=-0．685，P=0．014）。结论pSS患者活动期外周血记忆性B细胞FcγRIIb表达与SSDAI呈负相关，并与抗SSA抗体呈负相关。FcγRIIb表达异常可能在pSS免疫发病机制中起重要作用。
- 周士亮车楠陆智敏吴倩施冬艳陈京京李霞孙凌云
- 关键词：干燥综合征B淋巴细胞IGG
- ROS对系统性红斑狼疮患者骨髓MSC细胞骨架F-actin的影响被引量：2
- 2014年
- 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者骨髓间充质干细胞(MSC)内ROS水平对其细胞骨架F-actin的影响及相关机制。采用免疫荧光染色法观察SLE患者MSC细胞骨架F-actin的排列;RT-PCR检测RhoA、Cdc42、Rac1的mRNA水平;western blot检测F-actin及Cdc42蛋白表达水平;流式细胞术检测胞内ROS水平;ELISA检测血清SOD水平;用20μmol/L H2O2刺激正常对照组骨髓MSC 1h,10mmol/L N-乙酰半胱氨酸(NAC)刺激SLE患者骨髓MSC 6h,观察MSC的改变。结果发现SLE患者骨髓MSC F-actin排列紊乱,其蛋白表达水平显著高于正常对照组;在基因及蛋白水平上,Cdc42表达显著高于正常对照组;SLE患者骨髓MSC胞内ROS水平显著高于正常对照组,而外周血SOD水平显著降低;外源性氧化剂H2O2使正常MSC胞内ROS水平升高,导致F-actin排列紊乱,Cdc42水平表达上升,而外源性抗氧化剂NAC使SLE MSC胞内ROS水平降低,导致F-actin排列有所恢复,并且Cdc42表达下调。以上结果表明,SLE患者清除超氧化物能力减弱,骨髓MSC胞内ROS水平升高,可能通过上调Cdc42表达水平使MSC F-actin排列紊乱,在SLE患者骨髓MSC异常的机制中可能起了重要作用。
- 施冬艳李霞陈海凤陆智敏孙凌云
- 关键词：系统性红斑狼疮间充质干细胞F-ACTIN活性氧簇
