戴祯
- 作品数：13 被引量：4H指数：1
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- 发文基金：转基因生物新品种培育专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪MSTN基因敲除载体的构建及细胞筛选被引量：3
- 2013年
- 构建猪肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因的打靶载体并获得敲除MSTN基因的猪胎儿成纤维细胞。以Puro为正筛选基因,白喉毒素-A(DT-A)为负筛选基因。将同源长臂和同源短臂分别插入Puro基因的两侧。同源长短臂分别为4 294bp和1 015bp,定点敲除MSTN基因的部分内含子2和部分外显子3。采用FugeneHD转染法将打靶载体转入37d的猪胎儿成纤维细胞中,转染后的细胞采用嘌呤霉素筛选。结果显示,成功构建了对猪MSTN基因部分区域进行敲除的打靶载体,共得到48个具有药物抗性的细胞克隆,经PCR检测,获得2个正确同源重组的细胞克隆。
- 高飞唐成程全龙泉戴祯苏佰通赖良学逄大欣欧阳红生
- 关键词：MSTN基因基因敲除打靶载体
- RNAi的毒性研究进展
- 2012年
- RNAi是由内源或人为转染进入细胞的小干扰双链RNA诱导产生的一种转录水平的基因沉默(TGS)或转录后水平的基因沉默(PTGS)现象。在随后线虫发育调控基因的研究中,人们又发现一种新的内源性小RNA分子——microRNA(miRNA),与siRNA大小相似,并且它们的产生和功能依赖于相似的细胞机制。
- 戴祯武蓉高飞姚潮刚韩杨唐成程赵致阳逄大欣
- 关键词：PTGS细胞机制发育调控基因芯片技术转基因小鼠
- 牛MSTN基因敲除载体的构建
- 2012年
- 提高动物胴体瘦肉率一直是动物遗传育种学家、动物繁殖学家和动物营养学家最关注的问题之一。肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)是近年来发现的一种生长分化因子,主要在动物骨骼肌中表达,它对动物肌肉的发生和发育以及再生都有重要调控作用。该基因缺失会导致动物骨骼肌肌纤维数量增多或肌细胞肥大等现象并且引起肉用动物的"双肌"表型。
- 全龙泉唐成程高飞武蓉戴祯逄大欣欧阳红生赖良学
- 关键词：肉用动物胴体瘦肉率肌肉生长抑制素MSTN基因基因敲除生长分化因子
- PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre重组酶的转基因猪的构建
- 2012年
- Cre-LoxP重组酶系统是条件性基因打靶、诱导性基因打靶、时空特异性基因打靶策略的主要技术。本实验建立睾丸特异性表达Cre重组酶的转基因猪,为制备人类生殖系统疾病模型猪奠定基础。利用PCR法扩增出猪PIWIL1启动子序列2822 bp,替换本实验室保存的猪源Cre重组酶的表达载体pET28a-MHC-Cre-BGHpo1yA-FRT2neor的MHC启动子。
- 段新平高飞全龙泉唐成程武蓉戴祯欧阳红生逄大欣
- 关键词：CRE重组酶转基因猪基因打靶启动子调控生殖系统疾病
- 高效抗猪瘟病毒shRNA的筛选被引量：1
- 2014年
- 为降低RNAi技术的毒副作用,筛选高效抑制猪瘟病毒复制的shRNA序列,根据有关报道构建了荧光报告系统shRNA筛选平台。该平台以9种抑制效率分别为强、中、弱的shRNA筛选载体作为参照,结合荧光报告系统进一步量化shRNA的抑制效率。根据2种已知体外有效抑制猪瘟病毒复制的siRNA-N2、siRNA-NS5B,分别设计得到shRNA-N2、shRNA-NS5B表达载体,继而采用高效、高灵敏度的shRNA筛选平台对这2种shRNA进行了检测,结果显示单拷贝情况下,shRNA-N2抑制靶序列效率较强,shRNA-NS5B抑制效率弱。本试验通过新策略大大提高了shRNA干扰效率检测的灵敏度,为采用shRNA转基因克隆动物进行抗病育种的研究提供了保障。
- 戴祯王铁东王侃侃欧阳红生涂长春逄大欣
- 关键词：猪瘟病毒
- 新生长白仔猪尾尖成纤维细胞的分离培养及其对猪瘟病毒的易感性分析
- 2013年
- 以出生2日龄的正常长白仔猪尾尖组织为材料,通过组织消化法培养获得原代尾尖成纤维细胞。并通过间接免疫荧光法,梯度10倍倍比稀释猪瘟病毒石门株(105.2 TCID50/mL)感染在猪尾尖成纤维细胞,确定尾尖成纤维细胞最佳病毒感染滴度。结果显示,运用组织块消化法能够获得生长状态的原代猪尾尖成纤维细胞,并且细胞对10-3稀释倍数的猪瘟病毒石门株具有适中的感染力。
- 武蓉戴祯赵致阳高飞全龙泉逄大欣王铁东涂长春欧阳红生
- 关键词：细胞培养转基因动物
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid对猪孤雌胚胎体外发育能力的影响
- Scriptajd是一种人工合成的组蛋白去乙酰化酶抑制剂,可使组蛋白处于松弛状态,从而有利于转录因子的结合。与其他的组蛋白去乙酰化酶抑制剂如TSA相比,其细胞毒性较低。在小鼠、牛和猪的体细胞核移植胚胎研究中,Script...
- 姚潮刚戴祯韩杨韩晓蕾逄大欣李占军
- 文献传递
- RNAi的毒性研究进展
- 文章对RNAi的概念做了简单的介绍，重点阐述了RNAi引起的毒副作用-干扰素反应、脱靶效应、miRNA通路饱和及其它毒性作用等的介绍。最后针对RNAi引起的潜在毒副作用，提出了可以采取多种措施来降低甚至避免它的发生。
- 戴祯武蓉高飞姚潮刚韩杨唐成程赵致阳逢大欣
- 关键词：基因工程RNAI毒副作用
- 应用CRISPR/Cas9系统在鼠源、猪源和鲤鱼细胞系中对编码及非编码基因的特异性抑制的研究
- CRISPR/Cas9是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御,可用来对抗入侵的病毒及外源DNA.crRNA通过碱基配对与tracrRNA (trans-activating RNA)结合形成tracrRN...
- 赵翊丞戴祯于泽欧阳红生滕春波
- 关键词：鲤鱼MIRNA
- 猪MSTN基因敲除载体的构建
- 2012年
- MSTN基因是TGF-B超家族的一员,又被成为GDF-8,该基因通过调控肌卫星细胞的活化和自我更新来调控肌肉生长发育,该基因失活时表现出双肌症状。MSTN基因共含有3个外显子和2个内含子,外显子3序列及其编码的氨基酸变异程度小,MSTN基因表达产物的功能区主要由109个氨基酸组成,编码这一段氨基酸的核苷酸主要集中在外显子3上。
- 高飞唐成程全龙泉武蓉戴祯欧阳红生逄大欣
- 关键词：基因敲除MSTN基因肌卫星细胞基因表达产物超家族
