徐峰
- 作品数：9 被引量：8H指数：1
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
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- 血管周围干细胞在大鼠脂肪组织中的含量及其体外扩增后比例的变化被引量：1
- 2015年
- 目的探索大鼠脂肪组织中血管周围干细胞(PSCs)在脂肪组织细胞中所占的比例,以及体外培养扩增后的大鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs)中PSCs比例的变化,为组织工程自体细胞移植修复骨和软骨损伤的实验研究提供可能的新型种子细胞。方法取大鼠的脂肪组织用II型胶原酶消化得到血管基质成分(SVF)并且体外培养扩增大鼠ADSCs至P3代,用细胞计数仪及流式细胞仪检测SVF细胞密度、活细胞比例、PSCs含量,检测ADSCs中PSCs的含量并与CD45–SVF细胞中PSCs含量进行比较。结果经细胞计数仪分析,每只大鼠约3 ml脂肪组织消化所得SVF中活细胞比例为(69.31±6.57)%,可收获活细胞(40.69±6.81)×106个。经流式细胞仪检测,每只SD大鼠3 ml脂肪组织中平均可以得到PSCs活细胞为(1.60±0.59)×106个,血管外周细胞为(0.18±0.04)×106个,血管外膜细胞为(1.42±0.57)×106个。而体外平面培养扩增的P3代ADSCs中,PSCs及各细胞亚群的比例并没有随着细胞的扩增而改变(P>0.05)。结论大鼠脂肪组织中含有PSCs,可以直接通过流式分选获取大量PSCs,不进行体外扩增即可望满足骨和软骨组织工程种子细胞的需要。
- 徐峰刘舒云彭江卢世璧孙逊尹合勇孙振余晓明肖波张金鑫袁玫许文静郭全义
- 关键词：脂肪间充质干细胞流式细胞术
- 脂肪来源间充质干细胞诱导分化类雪旺细胞的记忆功能
- 目的 雪旺细胞(Schwann cells,SCs)是组织工程周围神经的理想种子细胞,但由于自体来源的SCs获取困难,体外增殖能力有限,异体来源的SCs又存在免疫原性问题等诸多限制,因此间充质干细胞诱导而来的类雪旺细胞成...
- 孙逊朱昀王玉徐峰郭志远尹合勇李润欣卢世璧彭江
- 关键词：雪旺细胞间充质干细胞种子细胞组织工程神经
- 关节软骨源性微载体生物相容性及异位成软骨特性观察
- 2013年
- 目的 观察改良后软骨源性微载体的微观结构及主要成分,其对软骨细胞增殖的影响及体内异位成软骨特性.方法 将新鲜猪软骨片粉碎后,梯度筛滤后得到直径大200～400 μm的软骨源性微载体,经1%十二烷基硫酸钠（SDS）脱细胞处理后,Hoechst 33258荧光染色观察其DNA残留,采用扫描电镜对其微结构进行观察,通过甲苯胺蓝、番红花O组织学染色和Ⅱ型胶原免疫荧光染色观察微载体的主要成分;体外复合软骨细胞后,通过MTT观察软骨源性微载体对软骨细胞增殖的影响;将复合有软骨细胞的软骨源性微载体包埋于裸鼠皮下观察其异位成软骨能力.结果 改良后的微载体形态近似椭圆形,直径200～400 μm,微丝覆盖其表面,微丝长度40～90 nm;脱细胞处理后Hoechst 33258荧光染色阴性;甲苯胺蓝和番红花O组织学染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性;在MTT检测细胞增殖中,第1天以后软骨源性微载体组及条件培养基组的OD值均高于完全培养基组（P〈0.05）;复合有软骨细胞的软骨源性微载体具有异位成软骨能力.结论 本实验成功制备的软骨源性微载体,可作为天然微载体高效扩增软骨细胞,可为组织工程提供优质种子细胞;其具有异位成软骨能力,有望成为软骨组织工程的新型支架.
- 李丙岩彭江王鑫王玉苟文隆袁雪凌徐峰黄靖香陈继营卢世璧
- 关键词：细胞外基质软骨细胞细胞增殖
- 脂肪来源间充质干细胞诱导分化类雪旺细胞的记忆功能
- 目的 雪旺细胞(Schwann cells,SCs)是组织工程周围神经的理想种子细胞,但由于自体来源的SCs获取困难,体外增殖能力有限,异体来源的SCs又存在免疫原性问题等诸多限制,因此间充质干细胞诱导而来的类雪旺细胞成...
- 孙逊朱昀王玉徐峰郭志远尹合勇李润欣卢世璧彭江
- 关键词：雪旺细胞间充质干细胞种子细胞
- 软骨源性微载体复合大鼠骺软骨细胞修复大鼠骺板软骨缺损的实验研究
- 目的：建立周围型大鼠骺板损伤模型，以此模型为基础研究软骨源性微载体复合大鼠骺板软骨细胞对大鼠骺板软骨缺损的修复作用。
- 徐峰朱云峰彭江郭全义王鑫孙逊孙振尹合勇余晓明肖波王玉刘舒云许文静孟浩业卢世璧
- 关键词：微载体生长板骨桥
- 软骨源性微载体复合大鼠骺软骨细胞修复大鼠骺板软骨缺损的实验研究
- 实验目的:建立周围型大鼠骺板损伤模型，以此模型为基础研究软骨源性微载体复合大鼠骺板软骨细胞对大鼠骺板软骨缺损的修复作用。 实验方法: 将定位器插入大鼠右侧胫骨近端骺板，刮除大鼠胫骨内侧骺板，建立大鼠骺板损伤模型。同时...
- 徐峰
- 关键词：细胞修复
- 利用电转染技术对大鼠原代系膜细胞进行Septin2质粒和siRNA转染的研究
- 2011年
- 目的:利用电转染技术,对大鼠原代系膜细胞进行Septin2质粒和siRNA转染,制备出Septin2过表达和低表达的细胞模型。方法:培养原代系膜细胞,利用电转染方法,转染pEGFP-C1、pRK5和pRK5-Septin2质粒,以及Septin2的siRNA。结果:通过荧光显微镜观察,pEGFP-C1转染的阳性率可达40%,pRK5-Septin2质粒转染组Septin2表达显著升高,而Septin2siRNA转染组Septin2表达显著下降。结论:利用电转染方法转染Septin2质粒和siRNA,成功的建立了Septin2过表达和低表达的细胞模型,为日后研究Septin2的功能建立基础。
- 吕杨李晓帆徐峰谢院生陈香美
- 关键词：转染系膜细胞
- 小孔径扇形钻孔减压术治疗早期股骨头坏死的10年随访观察被引量：7
- 2019年
- 目的探讨小孔径、多孔道、低钻速扇形钻孔减压术治疗早期股骨头缺血坏死的长期疗效。方法选择解放军总医院第一医学中心骨科2001年2月-2006年4月在C形臂监视下采用3.5 mm克氏针进行小孔径、多孔道、低钻速钻孔减压治疗的早期股骨头缺血性坏死226例(383髋)。对所有患者在手术后进行持续临床随访,评估术后1年和术后10年的改良Harris髋关节评分(mHHS评分)变化和影像学结果。结果 226例(383髋)中完成术后10年随访164例(285髋),其中男性128例(221髋),女性36例(64髋);平均年龄14~64(36.5±8.3)岁;随访时间130~204(186±9.7)个月;术前mHHS评分56~78(66.5±5.7)分,术后约1年时随访评分增加到61~93(81.3±5.4)分,最后1次随访时评分为59~90(80.4±5.9)分。最后1次随访时197髋(69.1%)疗效优良(m HHS评分>80),患者无疼痛或轻微疼痛,能胜任日常工作,X线片显示股骨头无明显塌陷;61髋(21.4%)疗效为中(mHHS评分70~79分),患者轻度或中度疼痛,可以生活自理,股骨头塌陷<2 mm;27髋(9.5%)疗效差(mHHS评分<69分),严重疼痛,生活不能自理,股骨头塌陷,其中23髋已经施行髋关节置换。结论小孔径、多孔道、扇形低钻速钻孔减压术能够有效治疗早期股骨头坏死,减少对股骨头的骨质破坏,有助于延迟股骨头塌陷,可推迟或避免髋关节置换。
- 徐峰李春宝李春宝刘洋魏民李众利刘玉杰
- 关键词：股骨头坏死钻孔减压
- 流式分析人脂肪组织中血管周围干细胞含量的方法探究
- 2015年
- 目的建立人脂肪组织中分离血管周围干细胞(PSCs)的方法,并研究其在脂肪组织细胞中所占的比例,为血管周围干细胞作为骨和软骨组织工程新的种子细胞奠定基础。方法取人的脂肪组织分别用Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶消化得到血管基质成分(SVF),用细胞计数仪及流式细胞仪检测SVF中细胞密度、活细胞比例和PSCs细胞所占的比例。结果用细胞计数仪分析得出用Ⅱ型胶原酶消化脂肪组织所得到的SVF中活细胞比例更高,且差异具有统计学意义(P<0.01),而细胞密度有增高趋势(P=0.18)。用流式细胞仪检测得出使用Ⅱ型胶原酶消化脂肪组织所得SVF中PSCs比例更高,且差异具有统计学意义(P<0.01)。使用Ⅰ型胶原酶消化每10 ml脂肪组织中可以分离得到PSCs活细胞为(7.98±2.38)×105个,使用Ⅱ型胶原酶消化则每10 ml脂肪组织中可以分离得到PSCs活细胞为(16.68±4.56)×105个。结论使用Ⅱ型胶原酶消化脂肪组织可以得到更多的血管周围干细胞PSCs,其在脂肪组织中的含量可以满足骨和软骨损伤后自体细胞移植修复的需要。
- 徐峰刘舒云王鑫彭江卢世璧袁玫许文静郭全义
- 关键词：流式细胞术种子细胞
