公共文化服务平台

共 4 条记录，以下是 1-4

全选清除导出

排序方式：

人Nanog基因重组腺病毒载体的构建及其在人脐带间充质干细胞中的表达: 2011年; 目的构建重组人Nanog基因腺病毒载体(Ad-Nanog),转染人脐带间充质干细胞(hucMSCs),用于后续研究。方法设计含有KpnⅠ及XhoⅠ酶切位点的引物,PCR扩增Nanog基因,将扩增产物亚克隆到pAdTrack-CMV穿梭质粒上,经双酶切和基因测序鉴定,重组穿梭质粒经PmeⅠ线性化后,在含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183中同源重组,筛选获得Ad-Nanog重组腺病毒质粒。经PacⅠ酶切线性化,脂质体转染293A细胞,包装和扩增病毒,并感染hucMSCs。结果重组腺病毒质粒经PCR和双酶切鉴定正确,测序结果和设计片段的序列一致。荧光显微镜下观察在感染的hucMSCs中绿色荧光蛋白高效表达。结论成功构建了Nanog腺病毒表达载体,能高效转染hucMSCs,可用于后续转基因的研究。; 孙靖徐哲钱茜严家来陈圆张徐高硕钱晖许文荣; 关键词：NANOG 脐带间充质干细胞腺病毒载体

脐带间质干细胞心肌样分化中干细胞标志物的表达: 2011年; 目的:探讨人脐带间质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hucMSCs)在体外特定条件下是否可以定向分化为心肌样细胞及干细胞标志物的表达变化。方法:采用脐带组织块贴壁培养方法分离人脐带间质干细胞,用第2代hucMSC进行体外心肌细胞诱导分化;采用RT-PCR、透射电镜等鉴定心肌细胞,流式细胞术、实时荧光定量PCR及蛋白质印迹分析干细胞相关基因及蛋白表达。结果:RT-PCR显示诱导组细胞转录心肌钙蛋白T、β-肌球蛋白重链、心房利钠多肽水平增加;在透射电镜下,诱导后细胞具有条索状肌丝结构;流式细胞仪检测未见细胞表面标志改变;而实时荧光定量PCR及蛋白质印迹显示干细胞相关基因及蛋白Nanog、Oct4、Sox2、Sall4在5-氮胞苷(5-azacytidine,5-Aza)诱导后的hucMSCs中表达显著下降。结论:人脐带间质干细胞体外经5-氮胞苷诱导可定向分化为心肌样细胞,其分化可能与干细胞相关基因及蛋白表达下调有关,为深入研究hucMSCs心肌分化机制奠定了实验基础。; 钱茜徐哲史云燕沈俐孙靖张徐毛飞朱伟钱晖许文荣; 关键词：人脐带间质干细胞心肌样细胞分化干细胞标志物

海洋生物活性药物BA-TPQ和FBA-TPQ对胃癌细胞的作用: 2011年; 目的:观察两种海洋生物活性药物BA-TPQ和FBA-TPQ对人胃癌细胞株BGC-823的作用与机制。方法:采用四唑氮蓝(MTT)法测定不同浓度BA-TPQ和FBA-TPQ对BGC-823细胞的生长作用,应用流式细胞术检测BA-TPQ和FBA-TPQ对BGC-823细胞增殖和细胞周期的影响,应用蛋白质印迹法检测BA-TPQ和FBA-TPQ对BGC-823细胞信号通路的影响。结果:BA-TPQ和FBA-TPQ对BGC-823细胞有明显的体外增殖抑制作用,24 h的半数抑制浓度(IC50)分别为0.5986和0.6217μmol/L,且有明显的剂量依赖关系;BA-TPQ和FBA-TPQ作用BGC-823后S期细胞数增加,细胞出现明显的凋亡;BA-TPQ和FBA-TPQ体外通过下调磷酸化的细胞外信号调节激酶(P-ERK)和Bcl-2蛋白的表达发挥抗肿瘤作用。结论:BA-TPQ和FBA-TPQ对人胃癌细胞株BGC-823有生长抑制作用,其机制可能与阻滞细胞周期和诱导凋亡有关。; 徐哲张徐钱茜孙靖钱晖朱伟许文荣; 关键词：胃癌胃癌细胞系

肿瘤干细胞标志物CD133检测在胃癌诊断中的意义: 2011年; 目的检测胃癌组织和癌旁组织中肿瘤干细胞标志物CD133的表达,探讨其与临床病理参数的相关性和在肿瘤诊断中的意义。方法收集36例胃癌患者手术切除的癌组织和对应的癌旁组织,用RT-PCR检测CD133的mRNA表达,用免疫组织化学技术检测CD133蛋白质的表达,分析CD133 mRNA在胃癌组织中的表达与临床病理参数的相关性。结果 CD133 mRNA表达阳性率为胃癌组织66.7%(24/36),癌旁组织为16.7%(6/36),差异有统计学意义(P<0.01);胃癌组织中CD133表达阳性率与肿瘤分化状态相关,低、未分化组高于中、高分化组(P<0.01),但与年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度、TNM分期和有无淋巴结转移无关。结论肿瘤干细胞标志物CD133的表达与胃癌的发生及分化状态相关,可作为胃癌诊断的一个新的分子标志物。; 严家来钱晖朱伟严永敏曹慧玲许晓蒙孙靖徐哲钱茜许文荣; 关键词：胃癌 CD133 免疫组织化学肿瘤干细胞

全选清除导出

共1页<1>

徐哲