张玉
- 作品数：11 被引量：31H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金重庆市教委科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 高强度皮秒脉冲电场诱导HeLa细胞生物电效应分析被引量：15
- 2012年
- 为研究高强度ps脉冲电场(psPEF)诱导HeLa细胞的生物电效应,将脉冲电场参数组合(电场强度为250kV/cm,脉宽为800ps,脉冲个数为1 000、3 000、5 000,频率为3Hz)作用于人宫颈癌HeLa细胞。利用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测ps脉冲对细胞的生长抑制情况;钙离子指示剂(Fluo-3/AM)探针标记细胞,激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子体积分数的改变;蛋白质印迹法检测促凋亡蛋白Bax与凋亡抑制蛋白Bcl-2释放水平的改变。实验发现:细胞死亡率与施加脉冲个数正相关,且处理后12h抑制率最高;激光扫描共聚焦半定量分析显示,处理组细胞荧光强度明显高于对照组(检验水准P<0.05);蛋白质印迹法检测结果表明,处理组细胞内Bax表达量增加(P<0.05),Bcl-2释放量略有降低。上述结果表明:高强度ps脉冲通过诱导细胞凋亡进而抑制了HeLa细胞的增殖。
- 郭飞姚陈果章锡明孙才新张玉熊正爱
- 关键词：HELA细胞激光共聚焦显微镜
- 高强度皮秒脉冲电场对人宫颈癌Hela细胞体外作用初探
- 2012年
- 目的探讨高强度皮秒脉冲电场对人宫颈癌HeLa细胞的体外损伤效应及机制。方法固定皮秒脉冲电场脉宽800ps、频率3Hz、场强250kV/cm,根据处理脉冲个数不同(0、1 000、3 000和5 000个),将HeLa细胞分为对照组和不同剂量皮秒脉冲处理组,通过MTT比色法检测皮秒脉冲对各组细胞在处理后不同时间点生长抑制的影响;Fluo-3/AM探针标记细胞,激光扫描共聚焦显微镜检测细胞[Ca2+]i改变;Western blot法检测皮秒脉冲电场作用后Bax/Bcl-2蛋白表达量的改变。结果随着脉冲剂量的增加,细胞死亡率上升,生长受到抑制,12h时抑制率最为显著;皮秒脉冲处理可明显升高细胞[Ca2+]i(P<0.05);随着脉冲剂量的增加,细胞内Bax蛋白表达量由对照组的0.205±0.102增加至各处理组的0.257±0.083、0.586±0.138和0.791±0.262(P<0.05);Bcl-2蛋白表达量由对照组的0.694±0.132降低至各处理组的0.591±0.145、0.364±0.105和0.262±0.092(P<0.05);Bax/Bcl-2比值显著上调(P<0.05)。结论高强度皮秒脉冲电场对HeLa细胞有损伤效应,并能诱导其凋亡。
- 张玉熊正爱华媛媛章锡明姚陈果
- 关键词：电磁场脉冲疗法细胞凋亡
- 细胞外高K^+浓度对HCN(1,2)通道电生理特性的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:研究细胞外高K+浓度对异源转染的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞上的超极化激活的环核苷酸门控阳离子通道(HCN)1,2电生理特性的影响.方法:将HCN1,HCN2质粒DNA转染至CHO细胞,在两种不同细胞外K+浓度条件下用全细胞膜片钳记录细胞膜上HCN1,HCN2通道电流.结果:细胞外高K+浓度时,HCN1(pA/pF,112.30±21.50vs42.33±15.89;-140mV,n=6,P<0.05),HCN2(pA/pF,130.57±17.70vs26.98±4.62;-140mV,n=8,P<0.05)通道的电流密度增加,加快了HCN1(激活时间常数:ms,176.59±8.23vs306.12±45.66;-80mV,P<0.05),HCN2(激活时间常数:ms,385.24±31.58vs763.55±106.17;-80mV,P<0.05)通道的激活,减小了HCN2通道的半时最大激活电压[mv,-(110.05±1.73)vs-(126.09±2.85),P<0.05]和倾斜因子(11.70±0.46vs15.87±1.17,P<0.05),但对HCN1无影响.结论:细胞外高K+浓度对细胞膜上的HCN1和HCN2通道的电生理特性具有明显影响.
- 张玉佘强邓松柏肖骏
- 关键词：膜片钳术
- 重庆市1010例急性心肌梗死住院治疗状况分析被引量：3
- 2009年
- 目的调查分析重庆地区急性心肌梗死(AMI)一般情况和临床治疗状况。方法回顾分析重庆市1 010例AMI住院病历,记录其一般情况、病史特征、诊断、治疗方式及药物使用情况。结果行经皮冠状动脉介入治疗(PCI)325例,占32.2%,直接PCI 91例,占9.0%,药物溶栓治疗122例,占12.1%;药物使用:肝素/低分子肝素86.6%,他汀类80.8%,硝酸酯类76.7%,阿司匹林90.1%,阿司匹林联用氯吡格雷74.7%,ACEI/ARB 74.2%,β受体阻滞剂55.1%;逐年比较,他汀类、阿司匹林、阿司匹林联用氯吡格雷及肝素/低分子肝素使用率有提高,ACEI/ARB和β受体阻滞剂的实际/适宜使用率呈增加趋势。结论重庆地区AMI早期再灌注治疗及药物治疗距《急性心肌梗死诊断和治疗指南》要求尚有差距。
- 王喜春佘强汪洋邓松柏杨海燕张玉夏爽赵睿李叶青向玉鸾何莉
- 关键词：心肌梗死再灌注治疗
- 高强度皮秒脉冲电场对人宫颈癌HeLa细胞的生长抑制及凋亡诱导作用被引量：2
- 2011年
- 目的探讨高强度皮秒脉冲电场对体外培养的人宫颈癌细胞HeLa的生长抑制和凋亡诱导作用。方法体外培养人宫颈癌细胞HeLa,将细胞分为处理组(在高强度皮秒脉冲电场处理)及正常对照组(未经高强度皮秒脉冲电场处理)。固定脉宽、频率、场强,按脉冲个数1002、005、001、0001、5002、000分为6个处理组,利用MTT比色法检测脉冲电场对HeLa细胞的生长抑制作用和量效关系。检测细胞存活率发生显著变化的5001、0002、000组细胞的Caspase3活性。根据MTT及Caspase结果,只选取Caspase 3活性高的脉冲个数2000组加入罗丹明123探针后于激光共聚焦扫描显微镜下检测HeLa细胞线粒体跨膜电位。结果 MTT证明高强度皮秒脉冲电场对HeLa细胞有杀伤作用且存在剂量-效应关系,细胞存活率随脉冲个数的增加而降低,脉冲个数100、200、500、10001、5002、000处理组及正常对照组HeLa细胞存活率分别为96.23%±0.76%,94.11%±2.42%,90.31%±1.77%,64.59%±1.59%,32.95%±0.73%,23.85%±2.38%,100%,各处理组与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。脉冲个数500、1000、2000及正常对照组Caspase 3吸光度值(A值)分别为0.174±0.012,0.232±0.017,0.365±0.016,0.122±0.011,各处理组均高于正常对照组(P<0.05)。脉冲个数2000组线粒体跨膜电位荧光强度(76.66±13.38)明显低于正常对照组(155.81±2.33,P<0.05)。结论高强度皮秒脉冲电场对HeLa细胞有生长抑制作用,其机制可能是通过线粒体途径诱导细胞凋亡。
- 华媛媛熊正爱张玉章锡明姚陈果
- 关键词：HELA细胞细胞凋亡
- 缺氧诱导内皮祖细胞中孤儿核受体基因Nur77的表达被引量：1
- 2009年
- 孤儿核受体Nur77蛋白是早期反应转录因子之一,多种刺激因子如缺氧可诱导其迅速表达,参与调控细胞增殖、存活、分化等过程。内皮祖细胞移植可治疗缺血性疾病,缺氧是其移植后主要的早期刺激因素,缺氧诱导下内皮祖细胞的基因表达及其增殖、分化、凋亡的变化目前尚不清楚。本文研究了大鼠骨髓来源的内皮祖细胞缺氧诱导下Nur77基因的表达变化。通过RT-PCR和Western印迹方法检测Nur77mRNA、蛋白质的表达,发现正常氧浓度下内皮祖细胞中Nur77基因几乎不表达,而1%氧浓度诱导30min时Nur77基因即迅速表达,其mRNA表达量于缺氧1h达到峰值,随后下降,缺氧4h时表达量仍高于正常氧浓度下的表达量(P<0.05);其蛋白质的表达量持续增加并于4h达到峰值。本研究证实了大鼠骨髓来源的内皮祖细胞中存在Nur77基因,缺氧可诱导Nur77基因迅速表达,这种表达可能对内皮祖细胞生物学特性的改变产生影响。
- 夏爽张玉邓松柏佘强
- 关键词：内皮祖细胞缺氧孤儿核受体
- Mink相关肽1对超极化激活的环核苷酸门控的阳离子通道4电生理特性的调节被引量：2
- 2008年
- 目的:评价Mink相关肽1(KCNE2或MiRP1)对异源转染的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞上的超极化激活的环核苷酸门控的阳离子通道(HCN)4电生理特性的影响。方法:将成功转染HCN4的CHO细胞(n=12)及共转染HCN4+KCNE2的CHO细胞(n=13),即将KCNE2质粒脱氧核糖核酸(DNA)单独转染或和HCN4质粒DNA共转染CHO-K1细胞,用标准微电极全细胞膜片钳记录细胞膜上的HCN4电流。结果:KCNE2对HCN4电流大小的影响:无论是在单独转染HCN4,还是HCN4和KCNE2共转染的CHO细胞中,均能检测到电流的表达。HCN4和KCNE2共转染的细胞中所检测到的电流密度,显著大于单独的HCN4转染细胞中的电流密度,差异有统计学意义(P<0.01)。KCNE2对HCN4激活动力学的影响:KCNE2和HCN4共转染后,其代表通道激活动力学的指标:激活时间常数(Tau)较单独转染HCN4时明显减小,差异有统计学意义(P<0.05)。KCNE2对HCN4激活的电压依赖性的影响:从稳态激活曲线中发现,无论是通道激活50时的脉冲电压(V1/2)还是倾斜因子(S),在HCN4与HCN4+KCNE2两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:KCNE2对HCN4通道有明显的调控作用。
- 佘强刘廷容肖俊邓松柏夏爽杨海燕张玉
- 关键词：膜片钳
- 大鼠急性心肌梗死后梗死周边区HCN通道蛋白表达的动态变化被引量：2
- 2009年
- 目的了解急性心肌梗死后梗死周边区心肌组织中HCN2和HCN4的mRNA和蛋白表达的动态变化。方法通过结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌梗死模型,将成功建模的大鼠随机分为24 h组、1周组、2周组和4周组,同时于各时间点均设立假手术组,每组5只。于各时间点末取左心室梗死周边区心肌组织样本(假手术组取左心室相应部位的心肌组织),用逆转录聚合酶链反应检测HCN2和HCN4 mRNA的表达,用免疫组织化学和免疫印迹法检测HCN2和HCN4蛋白的表达。结果假手术组左心室心肌组织中存在HCN2和HCN4通道蛋白的表达,梗死周边区心肌组织中HCN2和HCN4的表达在梗死后24 h出现上升趋势,于梗死后1周表达达到峰值,之后逐渐下降,梗死后4周HCN2 mRNA和蛋白的表达仍高于对照组,而HCN4的表达已回落至假手术组水平。结论急性心肌梗死后左心室梗死周边缺血区心肌组织HCN2和HCN4通道蛋白的表达呈动态变化趋势,梗死后1周表达明显增高。
- 张玉佘强
- 关键词：心肌梗死梗死周边区
- 大鼠缺血心肌中KCNE1,KCNE2基因表达的变化被引量：2
- 2009年
- 目的:研究大鼠缺血心肌中KCNE1,KCNE2基因表达变化情况,进一步探讨急性心肌梗死后并发心律失常的机制.方法:成功建立SD大鼠急性心肌梗死模型,通过RT-PCR、免疫印迹方法检测急性心肌梗死后24h及1,2,4wk梗死周边缺血心肌中KCNE1,KCNE2mRNA和蛋白质的水平,并观察各组室性心律失常的发生情况.结果:SD大鼠左室心肌中有KCNE1及KCNE2的表达,在急性心肌梗死后24h,无论是KCNE1还是KCNE2的mRNA和蛋白质表达在缺血心肌中均呈明显增加(P<0.05),并在1～2wk达到高峰,随后开始下降,4wk时KCNE1的mRNA、蛋白质水平和KCNE2的mRNA水平仍显著高于正常心肌中的表达(P<0.05).此外,心梗模型各组尤其是心肌梗死后1wk和2wk组室性心律失常明显多于假手术组.结论:急性心肌梗死后缺血心肌中KCNE1,KCNE2这两个离子通道基因表达的异常变化,可能对心肌细胞的自律性、兴奋性和传导性产生影响,成为梗死后心律失常产生的原因之一.
- 夏爽张玉邓松柏佘强
- 关键词：KCNE1急性心肌梗死心律失常
- 电基因疗法治疗肿瘤的研究进展被引量：1
- 2011年
- 迄今大量研究已经证实,肿瘤发生与发展的生物学基础是基因突变,所以,肿瘤基因治疗已成为广大肿瘤学者研究的热点。基因转导和策略选择是肿瘤基因治疗的关键。目前基因转导方法包括DNA-磷酸钙共沉淀、脂质体介导、电穿孔、显微注射、受体介导转移、DNA直接注射、基因枪及病毒介导等,但仍存在许多问题,如基因转移效率低、靶向性不确切、安全性低等。1996年,Toru
- 张玉熊正爱
- 关键词：电穿孔基因疗法肿瘤
