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两种存活蛋白变异剪接体在HeLa细胞中的表达定位及相互作用被引量：3: 2009年; 存活蛋白(survivin)是重要的肿瘤相关抗原基因,在肿瘤的发生发展中起着重要的作用.除了标准的剪接形式外,它至少还编码2种变异剪接产物—存活蛋白-2B和存活蛋白-ΔEx3,这2个变异剪接体所编码的蛋白具有不同的生物学功能.为研究这2个变异剪接体在肿瘤细胞中的相互作用情况,本实验利用增强型青色荧光蛋白(enhanced cyan fluorescent protein,ECFP)和增强型黄色荧光蛋白(enhanced yellowfluorescent protein,EYFP)分别标记存活蛋白-2B和存活蛋白-ΔEx3.首先通过激光共聚焦扫描显微镜观察它们的细胞定位;同时利用荧光共振能量转移(fluorescence resonanceenergytransfer,FRET)技术研究两者在细胞内的相互作用情况.研究结果表明,存活蛋白-2B主要分布在细胞质中,而存活蛋白-ΔEx3则主要分布在细胞核内,少量分布在细胞质中;FRET分析结果显示,两者仅在细胞质中存在着很弱的相互作用,表明两者很可能是通过某种间接的方式发挥功能上的相互调节作用.本研究为进一步探讨存活蛋白变异剪接体的生物学功能及相互作用机制奠定了基础.; 邵红伟张文峰胡青莲黄树林; 关键词：荧光共振能量转移相互作用

基于pHrodo分析腺病毒诱导胞内体裂解的方法: 本发明公开一种基于pHrodo分析腺病毒诱导胞内体裂解的方法，属于生命科学领域。本发明的通过将腺病毒与荧光染料pHrodo同时加入细胞，荧光染料pHrodo随病毒胞吞进入细胞并达到胞内体，在胞内体的酸性环境中可被激发出荧...; 张文峰邵红伟李柱明曾子绯谢欣; 文献传递

核转染技术转染人外周血淋巴细胞效率的初步研究被引量：1: 2012年; 目的探索核转染技术转染人外周血淋巴细胞的转染效率。方法利用核转染方法将携带增强型绿色荧光蛋白基因的质粒转染人外周血淋巴细胞,24小时后经流式细胞仪检测绿色荧光蛋白EGFP表达水平,确定转染效率。结果未经任何刺激的外周血淋巴细胞转染效率为8.7%,经抗CD3抗体OKT3和抗CD28抗体共同刺激后的外周血淋巴细胞转染效率为10.5%,经抗CD3抗体OKT3和IL-2共同刺激后的外周血淋巴细胞转染效率为9.9%。结论核转染方法是一种转染人外周血淋巴细胞的有效方法,转染前细胞是否受到刺激激活,对转染的效率影响不大。; 张文峰邵红伟区裕升黄树林; 关键词：外周血淋巴细胞转染效率

5型腺病毒载体对人T淋巴细胞的转染及细胞毒性分析被引量：2: 2014年; 目的:利用5型腺病毒载体转染人T淋巴细胞,对其转染T淋巴细胞的效率以及细胞毒性进行分析。方法:选取T淋巴瘤Jurkat细胞及原代T细胞,腺病毒按感染复数(multiplicity of infection,MOI)为20、50、100、200和400对其转染,转染48 h后利用流式细胞术检测转染效率;选取腺病毒转染后的不同时点,利用碘化丙啶染色法分析转染对于细胞周期的影响;利用Annexin V/7-AAD染色法分析转染诱导细胞凋亡情况;利用台盼蓝染色计数法分析转染对活细胞数目的影响。结果:5型腺病毒载体转染T淋巴瘤的效率最高,转染效率随着MOI值的增大而增加;CD8+T细胞和CD4+T细胞的转染效率大致相同,T细胞经刺激活化后,CD8+T细胞的转染效率下降;病毒转染未导致明显细胞凋亡;病毒转染对细胞周期与活细胞数目没有显著影响。结论:5型腺病毒载体转染T细胞呈现较低细胞毒性。; 张文峰张琼宇邵红伟吴凤麟王腾黄树林; 关键词：腺病毒载体 T淋巴细胞细胞毒性

Survivin启动子调控CD基因的重组腺病毒载体构建及其应用: 本发明提供一种重组腺病毒，这种重组腺病毒包含了胞嘧啶脱氨酶基因（CD基因），所述的CD基因受本发明设计的一种Survivin启动子控制。更具需要进一步的公开了这种重组腺病毒的制备方法，并将重组腺病毒应用于治疗癌症的药物。...; 邵红伟黄树林沈晗吴凤麟张文峰李家明; 文献传递

腺病毒感染及胞内运输途径的研究进展被引量：1: 2014年; 目前关于腺病毒感染及胞内运输的分子机制研究主要来源于C亚群腺病毒在肿瘤细胞系中的研究结果。腺病毒对靶细胞的感染及胞内运输大致分为几步:病毒与细胞表面受体的特异结合,胞吞介导的病毒内化,病毒逃脱胞内体进入细胞质,病毒沿着微管运输至核孔,病毒基因组入核。病毒胞内运输效率极高,感染后1 h,80%以上的病毒基因组被送至核内。但是腺病毒胞内的运输方式会因以下几个因素变化而产生差异:靶细胞类型,细胞生理状态,病毒血清型。文中对腺病毒感染靶细胞及胞内运输的已有分子机制进行综述,为临床基因治疗用途的病毒载体研发提供思路。; 张文峰邵红伟贺华黄树林; 关键词：腺病毒胞吞病毒受体

肝癌特异性TCRVβ亚家族基因的药效研究: 黄树林肖兰凤邵红伟陈启助吴凤麟沈晗薄华本王金全张文峰张帆罗利琼林月霞; 该项目在前期通过基因优势取用分离到特异性识别杀伤肝癌细胞的TCRVβ基因的基础上，以荷肝癌SCID小鼠为模型，重点研究了TCRVβ基因转染人PBMC后的抗肝癌药效学作用，结果发现特异性TCRVβ基因转染的PBMC在肿瘤局...; 关键词：; 关键词：肝癌恶性肿瘤治疗

着眼于研究生培养实际需要的《分子生物学》课程教学新探索被引量：2: 2014年; 研究生培养与本科生的最大不同是研究生要开展科学研究工作,因此对其各种课程教学有新的要求,分子生物学作为生物医药专业的基础性课程,其研究生教学具有代表性。本文从生物医药专业研究生的培养需求出发,探讨了对分子生物学课程教学的一些新的探索和尝试,目的是以点带面,以课程教学促进研究生专业能力的培养,对研究生后续开展的课题设计和实验研究起到有益的促进作用。; 沈晗孟民杰邵红伟张文峰黄树林; 关键词：研究生培养分子生物学

基于pHrodo分析腺病毒诱导胞内体裂解的方法: 本发明公开一种基于pHrodo分析腺病毒诱导胞内体裂解的方法，属于生命科学领域。本发明的通过将腺病毒与荧光染料pHrodo同时加入细胞，荧光染料pHrodo随病毒胞吞进入细胞并达到胞内体，在胞内体的酸性环境中可被激发出荧...; 张文峰邵红伟李柱明曾子绯谢欣

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张文峰