张志强
- 作品数：5 被引量：20H指数：4
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一个肿瘤新生血管内皮新标志分子的分离鉴定及AA98抗体片段V<,H>/L的表达复性
- 重组质粒pET21a-V<,H>/L是该实验构建的含AA98的抗体片段V<,H>/L基因的高效表达质粒.将该质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）,V<,H>/L以包涵体形式得到了表达,其表达量占菌体总蛋白质的20﹪左右.经...
- 张志强
- 文献传递
- 抗肿瘤血管抗体AA98功能片段V_H/κ的脲浓度梯度柱复性被引量：4
- 2002年
- 利用稀释法、凝胶过滤、脲浓度梯度凝胶过滤 3种方法研究了抗肿瘤血管抗体功能片段VH/κ的体外复性 .通过考察复性液中还原型谷胱甘肽 /氧化型谷胱甘肽 (GSH/GSSG)比例、精氨酸浓度、pH值、洗脱速度、变性液中蛋白质浓度、凝胶过滤脲梯度长度等因素 ,发展了脲梯度凝胶过滤柱复性VH/κ的方法 .结果表明 ,与传统的稀释法和柱复性法相比 ,脲梯度法复性获得的VH/κ的活性回收率和相对亲和力均有显著提高 .
- 张志强林芸阎锡蕴
- 关键词：单链抗体基因工程抗体
- 抗肿瘤血管三结构域单链抗体V_H/L的构建与表达被引量：5
- 2001年
- 以本室研制的一株抗肿瘤血管单克隆抗体AA98为基础 ,采用PCR扩增抗体AA98基因的重链可变区(VH)和轻链 (L) ,以重链恒定区 1(CH1) 5′端 12个氨基酸的序列作为连接肽 ,并将连接肽中的Lys突变为Ser,构建VH 连接肽 L三结构域单链抗体。重组VH/L单链抗体在大肠杆菌中得到了高效表达 ,其表达量占菌体总蛋白质的 2 0 %。表达的蛋白质在菌内形成包含体 ,经凝胶过滤法复性 ,获得了有抗原结合活性的VH/L。该三结构域单链抗体的成功构建和复性 ,为重组抗体片段的研制提供了借鉴。
- 吴小平杨东玲张志强阎锡蕴
- 关键词：复性
- 肿瘤新生血管及相关靶标被引量：6
- 2001年
- 肿瘤血管导向治疗作为肿瘤治疗新策略已被广泛接受，其理论依据可归纳于两点：（１）肿瘤的持续生长和侵袭转移依赖于血管生成；（２）肿瘤新生血管不同于正常血管．后者是靶向治疗的关键．在肿瘤血管生成过程中，内皮细胞快速增殖及迁移，过度表达一些正常血管不表达或低表达的分子，内皮周细胞和血管基底膜缺乏，血管渗漏性高．肿瘤血管生成的每一个环节中出现的异常分子，理论上都可作为肿瘤导向治疗的靶标，大概可分为三类，即血管内皮细胞、细胞黏附分子和基底膜．
- 张志强阎锡蕴
- 关键词：新生血管靶标血管生成内皮细胞血管基底膜
- 一种新型肿瘤血管抗体Fab的基因克隆与表达被引量：5
- 2000年
- 鼠单克隆抗体AA98是我室研制的一株新型抗肿瘤血管抗体 ,体内实验证明它可以抑制血管生成 ,抑制肿瘤生长。从分泌抗体AA98的杂交瘤细胞中提取总RNA ,采用逆转录 PCR(RT PCR)分别扩增重链Fd及轻链κ,并进行序列测定。将Fd和κ链依次与噬菌粒 pComb3H连接 ,构建pComb3H AA98Fab表达载体。在大肠杆菌中表达了AA98Fab。免疫印迹表明该Fab片段识别分子量为 10 0kD的蛋白 ,具有原抗体AA98的抗原特异性。AA98Fab是研究抗体AA98作用机理的工具 ,也为制备重组免疫毒素 。
- 吴小平张志强杨东玲阎锡蕴
- 关键词：肿瘤血管基因克隆
