张志强
- 作品数：13 被引量：37H指数：3
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- 猪干扰素IFNE1基因克隆及重组表达载体的构建被引量：1
- 2008年
- 依据电子延伸序列设计一对克隆引物,用RT-PCR法从猪胃组织扩增出猪干扰素epsilon 1(IFNE1)基因的完整编码区并进行序列分析;再根据克隆的序列设计一对表达引物,用PCR法从重组克隆载体中扩增出含EcoRI/XhoI酶切位点的猪IFNE1片段,插入原核表达载体,转化至宿主菌,诱导表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白。结果表明,克隆的猪IFNE1基因包含完整的开放阅读框架,长为586bp,ORF为582bp,编码193个氨基酸,与人、小鼠的同源性分别为83.6%和69.2%,推测的氨基酸序列与人、小鼠的同源性分别为76.2%和55.2%,表达的融合蛋白分子量约为47kD。
- 台玉磊王艳玲王伟杰韩立强张志强臧猛王静杨国宇
- 关键词：克隆原核表达
- 猪肿瘤抑制基因候选5的克隆与序列分析
- 2009年
- 基于电子延伸序列,克隆了仔猪肿瘤抑制基因候选5(TUSC5),并初步分析其组织分布情况;获得了TUSC5基因的全长序列636bp,包括开放阅读框架(ORF)534bp,编码177个氨基酸。克隆的仔猪TUSC5基因与人、小鼠、大鼠的TUSC5基因序列的同源性分别为83.5%,82.4%,82.6%,推测的氨基酸序列同源性分别为71.2%,77.5%,78%,成功克隆了猪TUSC5基因。
- 张志强杨国宇王伟杰韩立强王静武宇晓臧猛台玉磊
- 关键词：克隆
- 仔猪多胺代谢相关基因的克隆及断奶对其mRNA表达的影响
- 2013年
- 多胺是一类广泛分布于组织细胞内的天然低分子多价生物活性物质，在动物的消化、营养代谢以及正常生长中发挥重要作用。本实验克隆了猪（Susscrofa）的7个与多胺代谢相关的基因，分别是精氨酸脱羧酶（ADC）、鸟氨酸脱羧酶（ODC）、鸟氨酸转氨酶（OAT）、
- 郭豫杰张志强王月影
- 关键词：多胺代谢MRNA表达克隆仔猪鸟氨酸脱羧酶断奶
- 猪神经介素B和受体基因的克隆与组织分布被引量：1
- 2008年
- 基于电子延伸序列,克隆并分析了猪神经介素B(NMB)和受体(NMBR)基因。猪NMBcDNA克隆片段长度为567 bp,开放阅读框架长度为366 bp,编码121个氨基酸。NMBR cDNA克隆片段长度为1 194 bp,开放阅读框架长度为1 173 bp,编码390个氨基酸。同源分析表明,猪NMB的核酸序列与牛、人、小鼠和大鼠的同源性分别为87.1%,85.2%,78.1%和76.6%,氨基酸序列的同源性分别为81%,74.4%,70.2%和70.1%;NMBR的核酸序列与牛、人、小鼠和大鼠的同源性分别为91%,89%,84.2%和83.6%,氨基酸序列的同源性分别为92.3%,90.3%,86.9%和86.4%。组织分布结果显示,猪NMB在多种组织均有分布,NMBR仅分布在大脑。克隆的猪NMB和受体基因分别注册GenBank(EU375564和EU670045)。
- 王静李宏基王伟杰武宇晓李平张志强台玉磊臧猛杨国宇
- 关键词：受体克隆
- 仔猪多胺代谢相关基因的克隆与表达分析
- 为了研究多胺代谢相关基因在仔猪机体内的作用，本文以断乳前后仔猪为研究对象，依据报道的人、小鼠和大鼠的相似基因序列对猪的ESTs库和UniGene进行搜索并拼接序列设计引物进行RT-PCR，在猪体内克隆了以下七种与多胺代谢...
- 张志强
- 关键词：仔猪基因克隆基因表达
- 文献传递
- 猪FcRn基因及其剪接变体序列的克隆与序列分析被引量：1
- 2008年
- 克隆并分析猪FcRn基因;十二指肠组织提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR,PCR产物与pMD-19T载体连接后转化JM109感受态细胞,筛选阳性克隆并测序;FcRn阳性克隆两条序列在NCBI上比较,显示序列同猪FcRn(AY740682.1)同源性都为99%。克隆了猪FcRn基因的序列和其剪接变体序列,其剪接变体序列已在GenBank上注册(Accession.EU852582)
- 李海霞陈丽颖刘涛范沛乔新安张志强王月影王艳玲
- 关键词：FCRN克隆
- 猪肌肉素基因的cDNA克隆与表达被引量：1
- 2008年
- 从人肌肉素基因出发，在dbEST数据库中进行同源性搜索，找到七个有较高同源性的Expressed Sequence Tag（DY426490，CF787546，AJ660979，AJ664670，AJ663820，AJ680159，DN106254）。通过拼接和进一步RT-PCR实验验证，获得猪肌肉素基因全长cDNA序列，其全长651bp，开放阅读框为54～452bp，编码有132个氨基酸。同源性分析结果表明，与人、小鼠和大鼠的肌肉素基因cDNA编码区（CDS）同源性分别为87．2％、77．6％和77．9％。利用克隆出的猪肌肉素cDNA，构建表达载体pGEX-4T-1-musclin，并在BL21大肠杆菌中成功表达和纯化了分子量为38．59kD的融合蛋白GST-Musclin，并运用蛋白印迹技术进行鉴定。
- 王伟杰李宏基韩立强王月影王静李卫华林茂旺台玉磊张志强藏猛王艳龄杨国宇
- 关键词：纯化
- 猪KISS-1基因克隆、序列分析被引量：8
- 2008年
- 在猪的不同组织中克隆KISS-1基因,提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR,PCR产物与pMD-19T载体连接后转化E.coliDH5α,检测阳性克隆并测序;结果:克隆的猪KISS-1基因与牛、人、大鼠、小鼠同源性分别为81.0%、76.8%、71.4%、72.4%;克隆了猪KISS-1基因全长并注册GenBank(Accession.EU934235),猪KISS-1基因在多种组织中表达。
- 臧猛晁利刚张志强台玉磊王静武宇晓杨国宇
- 关键词：KISS-1基因GPR54克隆
- 猪Chemerin和受体基因的克隆与组织分布被引量：2
- 2009年
- 基于电子延伸序列,本试验克隆并分析了猪Chemerin和受体(ChemerinR)基因;各种组织提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR,PCR产物与pMD19-T连接后转化E.coliJM109,检测阳性克隆并测序;结果表明:猪Chemerin cDNA克隆片段为558 bp,开放阅读框架为492 bp,编码有163个氨基酸。ChemerinR cDNA克隆片段为1 470 bp,开放阅读框架为1 092 bp,编码363个氨基酸。同源分析结果表明,猪Chemerin的核酸序列与牛、人和大鼠的同源性分别为86.7%、79.1%和73%,氨基酸序列的同源性分别为83.1%、83.4%和67.7%,ChemerinR的核酸序列与人、大鼠和小鼠的同源性分别为80.4%、77.6%和72.6%,氨基酸序列的同源性分别为88.2%、80.7%和79.3%。组织分布结果显示:猪Chemerin在多种组织均有分布,ChemerinR仅在膀胱、大脑和肌肉有分布。
- 王静李宏基韩立强王伟杰武宁晓张志强台玉磊臧猛杨国宇
- 关键词：CHEMERIN受体电子克隆
- 猪乳脂肪球表面因子8的克隆与表达分布
- 2008年
- 基于电子延伸序列,本试验成功克隆了猪乳脂肪球表面因子8(MFGE8)基因(GenBank登录号:EU559724)并进行了序列分析,同时利用RT-PCR方法分析了MFGE8基因的组织分布规律。序列分析结果表明MFGE8开放读码框全长为1296 bp,编码431个氨基酸残基的多肽链,克隆的MFGE8基因与人、大鼠、小鼠、牛的同源性分别为71.9%、78.7%、79.1%、87.7%,推测的氨基酸序列的同源性分别为65.7%、74.0%、74.0%、84.5%。氨基酸序列N端含有Notch样"EGF"结构,C端含有FA58C结构域。构建的系统发育树显示猪与牛的亲缘关系最近。组织表达分析结果表明MFGE8在乳腺中表达最高,在大脑中表达量最低。
- 武宇晓王伟杰张志强林茂旺王静韩立强王艳玲杨国宇
- 关键词：克隆半定量RT-PCR
