张宏山
- 作品数：2 被引量：16H指数：1
- 供职机构：清华大学医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小鼠心肌组织3种总RNA提取方法比较被引量：16
- 2010年
- 目的:探索一种高效的心肌组织总RNA提取方法,对以后总RNA提取工作进行指导。方法:取小鼠心肌组织,分别采用剪刀剪碎法(剪碎法)、研钵加液氮研磨法(研磨法)、离心柱法(过柱法)对小鼠心肌组织进行总RNA提取,紫外分光光度计定量,聚丙烯酰胺凝胶电泳初步定性。结果与结论:研磨法提取出的总RNA量大,质量可靠,较适合于日常总RNA提取;剪碎法对于一些实验条件较差的地区仍然是一种可取的方法;过柱法对于小量心肌组织的提取较为适合。3种方法均能提取出总RNA。
- 张宏山许明张阳柳德斌吴清玉周玉祥
- 关键词：心肌组织RNA提取
- NNK转化人支气管上皮细胞中p53、MGMT基因表达及意义
- 2009年
- 目的探讨亚硝胺吡啶基丁酮(NNK)转化人支气管上皮细胞中p53、MGMT基因表达及意义。方法用NNK水溶液处理支气管上皮细胞株16HBE细胞,每隔5代取转化细胞,用免疫组化SP法检测细胞中的p53和MGMT基因表达,并与A549细胞及二羟环氧苯并芘(BPDE)成瘤细胞比较。结果免疫组化显示,MGMT基因在正常16HBE细胞呈强阳性表达,随着NNK对16HBE细胞转化代数增加,其表达逐渐减弱,至第20、23代呈阴性表达;在A549细胞及BPDE成瘤细胞中呈阳性表达。突变型p53基因在正常16HBE细胞中呈弱阳性表达,至第20代呈强阳性表达,在NNK成瘤细胞、A549细胞及BPDE成瘤细胞中均呈强阳性表达。结论p53和MGMT基因表达可作为肺癌早期诊断分子标记物的参考指标,用免疫组化SP法检测p53和MGMT基因,适用于高危人群的大规模筛检。
- 张宏山吴清玉张阳吕嘉春柳德斌
- 关键词：人支气管上皮细胞免疫组织化学染色
